Властивості мрнк антитіл. Структура мрнк імуноглобулінів

виділення щодо чистих препаратів мРНК дозволило перейти до прямого вивчення їх фізико-хімічних властивостей і структури. Відразу ж виявилося, що константи седиментації, а отже, і молекулярні ваги і розміри мРНК, що кодують Н і L-цінуй, значно вище раніше передбачалися. Константи седиментации мРНК для Н-ланцюгів визначені рівними 12-17S (Namba, Hanaoka, 1969- Bernardini, Tonegawa, 1973- Cowan ea, 1976), а для L-мРНК -12- 15S (Tonegawa, Baldi, 1973- Mach ea, 1973- Schechter ea, 1976).

відповідно молекулярні ваги цих мРНК складають 440 000 на разі L-мРНК, а не 220 000, як вважалося раніше, і 650 000, а не 400000 для Н-мРНК. Число нуклеотидів в L-мРНК складає 1100-1250, а в Н-мРНК -1900.

Легко підрахувати, що для синтезу L-ланцюга, що складається з 214 амінокислотних залишків, потрібно всього ~ 650 нуклеотидів (м. В. 220 000). Для синтезу попередника, що містить додатково 20 NH2-кінцевих і 25 СООН-кінцевих амінокислотних залишків, потрібно ще 60 і 75 нуклеотидів (м. В. 45 000). Разом для синтезу попередника L-ланцюга досить 785 нуклеотидів, т. Е. ~ 65% всіх наявних в мРНК.

аналогічно для синтезу Н-ланцюгів, що складаються з 450 амінокислот, потрібно 1350 нуклеотидів, а в Н-мРНК, як ми бачили, входить 1900. Таким чином, число екстр а нуклеотидів в цьому випадку становить 650. Що ж являють собою «невикористовувані» 30% нуклеотидів, де вони розташовані і яка їхня функція?

Вивчення будови двох мРНК, кодують L-ланцюга (Brownlee е. а., 1973- Faust е. а., 1974), і однієї мРНК, що кодує Н-ланцюг (Вегпаг-dini, Tonegawa, 1973, 1974) показало, що 200 нуклеотидів (м. в . 65000) в цих мРНК припадає на частку Поліани-послідовності, що розташовується на 3`-кінці молекул. Функція їх поки неясна. Очевидно лише, що оскільки Поліани-нуклеотиди виявлені у всіх досліджених досі мРНК, що кодують синтез білків як пов`язаними, так і вільними полірібосомамі (Rosenfeld е. А., 1972), то спеціального відношення до синтезу секретується білків взагалі і імуноглобулінів зокрема вони не мають.

Відомо що Поліани-кінець приєднується до молекули мРНК вже після завершення її синтезу. Передбачається, що Поліани-ділянку грає роль при транспорті мРНК з ядра в цитоплазму, проте наявність Поліани-ділянки в вірусному геномі, реплицирующихся в цитоплазмі, свідчить про те, що у Поліани-нуклеотидів повинні бути й інші функції. Не виключено, що ділянку Поліани потрібен для зміни вторинної та третинної структури мРНК і підвищення її стабільності або для зв`язування мРНК з полірібосомамі- може бути, він грає роль в трансляції мРНК, хоча однозначно це не доведено (Rosenfeld е. А., 1972).
Крім 200 нуклеотидів, припадають на частку ділянки Поліани, в L-мРНК залишається ще 200 нуклеотидів, що не транслюються і невідомо де розташовані.

В L-цепьевой мРНК з клітин МОРС 41 недавно були знайдені незначні кількості N6-метілгуанозіна і N7-метілгуанозіна, розташованого на 5`-кінці і пов`язаного з сусідніми нуклеотидами 5 `, 5`-пірофосфатной зв`язком. Зараз відомо, що наявність метілгуаніділового залишку на 5`-кінці необхідно для стабілізації і трансляції мРНК у еукаріотів.

Відео: 44 - Генетичний код кодони, триплети); синоніми

дані по розшифровці будови мРНК носять попередній характер. За свідченням самих авторів, неточно визначені розміри нетрансльовані ділянки на 5`-кінці мРНК- поки тільки 194 нуклеотиду вдалося «приписати» кодируемой області білкової ланцюга, що складається з 75 амінокислот (з 214 у всій L-ланцюга).

Схожа робота була проведена і з мРНК, кодує Н-ланцюги МОРС 21 (Cowan е. а., 1976). Використання одного з мутантів МОРС 21, який синтезує Н-ланцюги з делецией СН1 -домен, дозволило розшифрувати 18 олігонуклеотидів, що містять 202 підстави і належать як V-, так і С-областях. В Н-мРНК також були виявлені поліА- і нетрансльовані нуклеотиди.

Необхідно відзначити, що принципове значення результатів, отриманих в цих дослідах, полягає ще й у тому, що вони остаточно вирішили питання про синтез Н-і L-цепсй як єдиного цілого і про злиття інформації про структуру V- і С-областей на рівні ДНК-Дійсно, в L-мРНК вдалося не тільки виявити послідовності нуклеотидів, які кодують V- і С-області, і показати, що вони розташовані на одній молекулі, але навіть виділити олигонуклеотид, що кодує залишки 105-108, т. е. місце зчленування V- і С-областей.
Як ми бачили раніше, аналогічні дані були отримані і за допомогою іншого підходу також на молекулярному рівні.

Крім того, на користь злиття V- і С-генів на рівні ДНК і зчитування інформації вже з таких об`єднаних генів, як з одного гена, свідчать досліди з соматичними гібридами клітин, що продукують імуноглобуліни, що розрізняються за своїми V- і С-областях (Margulies е. а., 1977- Milstein е. а., 1977) . Ні в одному з таких дослідів не спостерігалося освіти рекомбінаптних молекул, що містять V-область, кодованих одним партнером, а С-область, кодованих іншим.