Алельні мітки антитіл. Аллельному виняток антитіл

Особливо чіткі дані були отримані після видалення імуноглобулінів з поверхні лімфоцитів і вивчення регенерувати молекул. Так, серед лімфоцитів крові гетерозиготних кроликів генотипів b5b9 і b4b5 є клітини, на поверхні яких присутній лише один з алельних варіантів легких ланцюгів (b5 на 5,5% і b4 на 44,2% клітин).

Досить багато (14%) клітин містять на поверхні обидва варіанти легких ланцюгів. Після обробки лімфоцитів протеолітичних ферментом (проназа) імуноглобуліни на поверхні клітин не виявляються протягом деякого часу. Через 13-24 години імуноглобуліни на поверхні лімфоцитів регенерують, але тепер обидва варіанти легких ланцюгів є лише на поверхні 2,2% клітин. Зате виявляються тільки b4- або тільки b5-ланцюга (на 63 і 15% клітин відповідно) (Jones е. А., 1973).

Ці результати були підтверджені вивченням лімфоцитів гетерозиготних кроликів (B5b9) за допомогою спеціального апарату, що дозволяє расфракціоніровать лімфоцити на несучі один варіант або обидва варіанти легкого ланцюга (Jones е. А., 1974а). На користь того, що на поверхні клітин локалізована лише один аллотипи, кажуть і ауторадіографіческіе дані (Jones, Cebra, 1974).

Використовуючи аллельноспеціфіческіе сироватки для ингибиции локального гемолізу, можна встановити алельних мітки антитіл, утворених окремими АОК. Виявилося, що, як правило, кожна АОК синтезує антитіла, що відносяться до одного аллельному варіанту.

Необхідно, однак, зазначити існування аргументів на користь можливості присутності на одній лімфатичної клітці продуктів двох алельних генів. По-перше, на це вказують досліди по індукції трансформації лімфоцитів гетерозиготних кроликів при дії на лімфоцити аллельноспеціфіческіх антисироваток (Sell е. А., 1970). По-друге, на присутність продуктів двох алельних генів на одній В-клітці вказує серія докладних дослідів, в яких лімфоцити обробляли антитілами проти аллотіпіческіх міток, локалізованих на їх поверхні (наприклад, анти-b4 або анти-b6).

потім вивчали освіту розеток між насиченими антитілами лімфоцитами і покритими одним або іншим алельним продуктом (b4 або b6) еритроцитами барана. Крім того, в одну з груп еритроцитів барана вводили флуоресціюючу фарбу. Цим методом серед лімфоцитів гетерозиготного кролика виявлялися як клітини, що несуть один з алельних варіантів імуноглобулінів, так і клітини, що несуть обидва варіанти (в деяких випадках їх 50%, а в інших від 10 до 30%). Спеціальні досліди показали, що виявляються на поверхні клітин імуноглобуліни синтезуються цими клітинами, а не захоплюються з навколишнього клітини сироватки. На це, зокрема, вказують два факти: 1) після регенерації імуноглобулінів, віддалених з поверхні пролазить, число клітин, які мають два алельних варіанти, знову стає таким же (8-30%), яким воно було до обробки-2) гетерозиготні кроленята можуть відрізнятися від матері по аллельному варіанту іммуноглобуліна- на поверхні клітин материнський варіант імуноглобуліну відсутня, хоча відповідні молекули матері протягом деякого часу знаходяться в крові кроленят.

Наведені дані показують, що питання про існування аллельного виключення повністю не вирішене, хоча наявність його зізнається переважною більшістю дослідників. Тут доречно нагадати, що при вивченні інших генів алельних виключення було описано лише в одному випадку - для продукту Ха-гена, локалізованого в Х-хромосомі (Grubb, 1970).

Були зроблені спроби з`ясувати молекулярні механізми аллельного виключення. Особливий інтерес мають непідтверджені дані про аллельном виключення на рівні трансляції. Згідно з цими даними, в окремих пробах бесклеточной системи, що містить полісоми гетерозиготних кроликів (b4b5), синтезував або один, або інший з -аллельних продуктів, але не обидва відразу (Huff е. А., 1973).