Водна проба робинзона-пауер-кеплера. Фракційне дослідження нейтральних 17-кетостероїдів, 17-оксикортикостероїдів в сечі

Водна проба Робінзона-Пауера-Кеплера використовується для діагностікіаддісоновойболезні.
проба заснована на затримці води в організмі хворих аддисоновой хворобою і на посилене виділення хлоридів з сечею при відносній затримки сечовини.

Методика. Хворому, який отримує звичайну дієту, забороняють після 18 годин їжу і питво. З 22-ї години, після попереднього спорожнення сечового міхура, збирають сечу до 8 годин ранку, вимірюють її об`єм і визначають зміст сечовини і хлоридів в ній. Взяту натщесерце кров з вени також досліджують на сечовину і хлориди.

Після цього хворий повинен випити води з розрахунку 20 мл / кг протягом 30-40 хвилин. Обсяг виділеної сечі визначають кожну годину протягом 4 годин. Результати аналізів сечі і крові, а також обсяги сечі, виділеної за ніч, і найбільшої денної порції використовуються для визначення індексу водної проби за такою формулою:

Індекс = (Сечовина сечі (г%) * Хлориди плазми (мг%) / Сечовина плазми (мг%) * Хлориди сечі (г%)) * (Обсяг найбільшої денної порції сечі (мл) / Обсяг нічний порції сечі (мл)) .

якщо результат індексу, отриманого при розрахунку, менше 25, то це свідчить про недостатність кори надниркових залоз. У здорових людей індекс водної проби перевищує 30. Проба не показова при захворюваннях нирок і серця, що супроводжуються набряклим синдромом, і мікседемі.

фракційне дослідження нейтральних 17-кетостероїдів, що виділяються з сечею. 17-кетостероїдів поділяються на а- і b-фракції. а-кетостероїдів (андростсрон, етіохоланолон і ін.) утворюються в сім`яниках і наднирниках, b-кетостероїди - виключно в надниркових залозах. Поділ 17-кетостероїдів проводиться методом тонкошарової хроматографії на окису алюмінію. У нормі 85-95% кетостероидов в сечі належать до групи а й тільки 5-15% до групи b.

При гіперплазії кори надниркових залоз, андростероме збільшується b-фракція 17-кетостероїдів. При андростсромах кількість дегідроепіандростерона досягає 45-79%.

Визначення 17-оксикортикостероїдів в сечі. Метод по Зільберу і Портеру заснований на вимірюванні забарвлених фракцій при реакції фенілгідразину з 17, 21-диокси-20-кетокортікостероідамі в кислому середовищі, які витягують з сечі хлороформом після гідролізу кон`югатів ферментом глюкуронідазу. Вільні кортикостероїди витягують з сечі хлороформом без попереднього гідролізу.

для фракціонування 17-оксикортикостероїдів застосовується метод хроматографії па тонкому шарі силікагелю (модифікація К. В. Дружиніної). У здорових людей добове виділення загальних 17-оксикортикостероїдів з сечею коливається від 1,32 до 5,59 мг, вільних - від 0,13 до 0,14 мг (Крехова). Збільшення виділення 17-оксикортикостероїдів з сечею спостерігається при болезніІценко - Кушинга, кортикостерома, зменшення - при хворобі Аддісона, церебрально-гіпофізарної недостатності.