Визначення естрогенів, прегнандиола, тестостерону в сечі. Дослідження набору хромосом

Визначення естрогенів в сечі. Для визначення естрогенів в сечі використовується багато хімічних методів. Найбільш поширеними є методи Брауна і Іттріха. За методом Брауна естрогени сечі поділяють на ряд фракцій (естріол, естрон, естрадіол) і досліджують колориметрически за методом Кобера. Метод Брауна дозволяє визначати невеликі кількості естрогенів у сечі. Нормальна кількість естрогенів у сечі за методом Брауна у жінок становить для естрону 11-31 мкг, естрадіолу - 4-14 мкг, естріолу-13-54 мкг. Ітрій запропонував видозмінений метод, що полягає в екстракції пофарбованого комплексу в органічний розчинник.
В даний час для визначення естрогенів застосовують методи тонкошарової хроматографії на окису алюмінію і газорідинної хроматографії.

Визначення прегнандиола в сечі. Більшість існуючих методів визначення прегнандиола в сечі (метаболіти прогестерону) включають хроматографію на колонках з алюмінію і силікагелю або хроматографію на папері. Останнім часом запропоновані методи визначення прегнандиола з використанням тонкошарової хроматографії на силікагелі. Добове виділення прегнандиола у здорових жінок в період фолікулярної фази становить 1-2 мг, а в період лютеїнової фази - 3-7 мг. При відсутності овуляції виділення прегнандиола з сечею у другій фазі не змінюється.

Визначення тестостерону в сечі. Побічно про виділення андрогенів з сечею можна судити по екскреції 17-кетостероїдів і їх функцій. Однак не завжди виявляється паралелізм між виділенням 17-кетостероїдів і тестостероном. Для визначення тестостерону використовуються методи із застосуванням тонкошарової та газорідинної хроматографії (детально перераховані вище методи описані в кн. «Сучасні методи визначення стероїдних гормонів в біологічних рідинах» під ред. Н. Л. Юдаева).
У здорових чоловіків екскреція тестостерону з сечею становить 70 мкг, у жінок - 8 мкг.

хромосоми людини

Дослідження хромосомного комплексу

Хромосомний набір ядра будь-якої клітини (крім статевих) тіла людини складається з 46 хромосом, з яких 22 пари є соматичні хромосоми (аутосоми) і одна пара - статеві хромосоми. Жіночий організм характеризується наявністю XX статевих хромосом, а чоловічий - ХУ хромосом. Цитогенетичний метод дослідження дозволяє визначити кількість і форму хромосом в каріотипі (хромосомному комплексі). Підрахунок кількості хромосом можна виробляти в ядрах лейкоцитів крові, кісткового мозку, а також в ядрах клітин різних тканин організму.

дослідження хромосомного комплексу в культурі лейкоцитів крові включає етап штучної стимуляції ділення лейкоцитів (Взятих з венозної крові) за допомогою фітогем-агглютинина, так як тільки в певній фазі поділу їх (метафаза) можливий кількісний підрахунок і ідентифікація хромосом.

розподіл хромосом на стадії метафази припиняють шляхом додавання колхіцину. Після цього з культури лейкоцитів готують мазки і піддають мікроскопії при збільшенні в 900 разів. Після мікроскопічного підрахунку кількості хромосом (50-100 метафазних пластинок) хромосомний комплекс фотографують і виробляють ідентифікацію хромосом відповідно до міжнародної класифікації.

патологічні зміни статевих хромосом можуть виражатися як в збільшенні, так і в зменшенні їх кількості, а також у зміні їх форми (ділення, транслокація, кільцева хромосома і ізохромосома). В результаті зазначених патологічних змін в статевих хромосомах відбувається зміна балансу генетичного матеріалу, необхідного для нормального диференціювання і розвитку статевих органів, що служить причиною різних патологічних синдромів, що супроводжуються ознаками первинного гипогенитализма.

порушення статевого розвитку може виникнути і при нормальній кількості і формі статевих хромосом, але при цьому пошкодження, що ведуть до гипогенитализмом і невідповідності зовнішнього вигляду індивідуума (фенотип), і генетичної статі (генотип), є результатом пошкодження генного складу статевих хромосом.

численні клінічні синдроми, що входять до групи аномалій статевого розвитку, є результатом порушення ділення хромосом в процесі утворення статевих клітин (мейоз) або на ранніх стадіях мітотичного поділу зиготи. В процесі утворення статевих клітин (овогенез, сперматогенез) в кожну статеву клітину (гамета) потрапляє половинний набір хромосом -22 аутосоми і одна статева хромосома X або Y. Таким чином, процес мейозу (редукційний поділ) забезпечує кількісне сталість хромосомного комплексу у людини, так як при злитті двох статевих клітин загальна кількість хромосом в зиготі становить 46.

При різних порушеннях процесів овогенеза або сперматогенезу відбувається неправильне розбіжність статевих хромосом, що призводить до відсутності статевої хромосоми або наявності двох хромосом в статевих клітинах. В результаті при утворенні зиготи в ній виникає нестача або надлишок статевих хромосом. Неправильне розбіжність статевих хромосом на ранніх стадіях мітотичного поділу зиготи може привести до явищ мозаицизма - наявності різних наборів статевих хромосом в тканинах організму, що також може служити причиною аномалій статевого розвитку.


Увага, тільки СЬОГОДНІ!
Поділися в соц мережах:
—хоже