Біохімічний аналіз крові

Стандартний біохімічний аналіз крові включає визначення різних параметрів, що відображають стан білкового, вуглеводного, ліпідного і мінерального обміну, а також активність деяких ключових ферментів сироватки крові.

З біохімічних показників, що відображають стан білкового обміну, найчастіше визначають зміст загального білка, білкові фракції (альбумін, &alpha-1-, 2-, &beta-- і &gamma - глобуліни) і вміст фібриногену. При необхідності визначають також С-реактивний білок, вміст серомукоида та інших білків в сироватці крові.

ЗАГАЛЬНИЙ БІЛОК І БІЛКОВІ ФРАКЦІЇ У нормі

Гіпопротеїнемія І гіперпротеїнемії

ЗМІНА ВМІСТУ ФРАКЦІЙ глобулін

Небілкова азотистих КОМПОНЕНТИ КРОВІ

ФЕРМЕНТИ

ВУГЛЕВОДИ

Глікопротеїну І Протеоглікани

ЛІПІДИ

НЕОРГАНИЧЕСКИЕ ВЕЩЕСТВА

Маркер НЕКРОЗУ МІОКАРДА

ДОСЛІДЖЕННЯ КОАГУЛЯЦІ0НН0Г0 гемостазу

Для визначення стану коагуляційного гемостазу використовують кілька груп методів:

орієнтовні (базисні) методи, що характеризують процес згортання в цілому, окремі його фази, а також дають можливість оцінити зовнішній і внутрішній механізми коагуляції;
методи, що дозволяють диференціювати дефіцит окремих факторів згортання крові;
методи, що дозволяють виявити внутрисосудистую активацію системи згортання крові.

До базисних методів відносять:

визначення часу згортання крові;
визначення часу рекальцифікації стабілізованої крові (плазми);
протромбіновий час (протромбіновий індекс);
тромбіновий час.

Час згортання крові

Визначення часу згортання цільної нестабилизированной крові виконують безпосередньо біля ліжка хворого. Голкою без шприца пунктируют ліктьову вену. Перші краплі крові випускають на ватний тампон і набирають по 1 мл крові в 2 сухі пробірки. Включивши секундомір, ставлять пробірки в водяну баню при температурі 37 ° С. Через 2-3 хв. а потім кожні 30 з пробірки злегка нахиляють, визначаючи момент, коли кров згорнеться. Визначивши час освіти батоги крові в кожної з пробірок, обчислюють середній результат. У нормі час згортання становить 5-10 хв.

Метод Моравіца. Цей спрощений метод досі використовують для визначення часу згортання застосовують, в основному, для динамічного контролю за станом гемокоагуляции при лікуванні прямими антикоагулянтами. На предметне скло наносять краплю крові, взяту з пальця або нирки вуха. Включивши секундомір, кожні 20-30 с в краплю крові опускають тонкий скляний капіляр. Час згортання визначають в момент появи першої тонкої нитки фібрину при витягуванні капіляра з краплі крові. У нормі час згортання крові за цим методом становить близько 5 хв.

Активований час рекальцифікації плазми

Метод заснований на вимірюванні часу згортання тромбоцитарной плазми при додаванні в неї оптимальної кількості хлориду кальцію або каоліну, що забезпечує стандартизацію контактної активізації факторів згортання.

У нормі час рекальцифікації плазми з хлоридом кальцію становить 60-120 с, з каоліном - 50-70 с. Результати зміни цього показника неспецифічні і вказують лише на загальну тенденцію до гіперкоагуляції (укорочення часу рекальцифікації) або до гіпокоагуляції (збільшення показника).

Причини подовження часу рекальцифікації:

недостатність більшості плазмових факторів згортання (крім факторів VII і XIII);
дефіцит тромбоцитарного фактора 3 (при вираженій тромбоцитопенії або порушення реакції вивільнення);
надмірний вміст в плазмі інгібіторів згортання (гепарин);
наявність ДВС-синдрому.

Активований частковий тромбопластиновий час

Принцип методу полягає у визначенні часу згортання плазми в умовах стандартизації не тільки контактної, але і фосфоліпідної (тромбопластинову) активації факторів згортання. З цією метою до плазми додають суміш каоліну і Кефалінія (тромбопластиновий активатор), а також хлорид кальцію і за секундоміром визначають час згортання плазми. У нормі АЧТЧ (Кефалінія-каолінове час) становить 35-45 с.

Зменшення АЧТЧ свідчить про гіперкоагуляцію і схильності до тромбозів, збільшення - про гіпокоагуляції крові. Цей показник надзвичайно чутливий до дефіциту плазмових факторів згортання, що беруть участь у внутрішньому механізмі згортання (фактори XII, XI, IX, VIII), і не залежить дефіциту тромбоцитів або їх функціональної недостатності (у зв`язку з додаванням Кефалінія). Воно подовжується також при наявності в крові інгібіторів згортання (гепарину), і його можна використовувати як чутливий тест для контролю за лікуванням гепарином.

Протромбіновий час (протромбіновий індекс)

Це ще одна модифікація визначення часу рекальцифікації плазми при додаванні в неї тканинноготромбопластину людини або кролика, що призводить до «запуску» згортання по зовнішньому механізму. Тканинної тромбопластин в комплексі з фактором VII і іоном Са 2+, активує фактор X, що входить до складу «проактіватора протромбіну».

У нормі протромбіновий час становить 12-18 с і багато в чому залежить від активності тканинного тромбопластину, використаного при дослідженні. З цієї причини в більшості випадків для визначення цього показника одночасно за тією ж методикою досліджують плазму донора і обчислюють так званий протромбіновий індекс: ПІ = (ПВД 100%) / ПВБ, де ПІ - протромбіновий індекс. ПВД і ПВБ - протромбіновий час донора і хворого, відповідно.

У нормі протромбіновий індекс становить 90-100%. Чим більше протромбіновий час, що свідчить про гіпокоагуляції крові, тим менше значення протромбінового індексу, і навпаки.

Подовження протромбінового часу (зменшення протромбінового індексу) інтегрально відображає недостатність плазмових факторів, що беруть участь в зовнішньому механізмі згортання і в активації протромбіну (фактори VII, X, V), а також на кінцевих етапах коагуляції (фактори I і II).

Найбільш часті причини подовженні протромбінового часу:

прийом непрямих антикоагулянтів (феніндіон, аценокумарол, варфарин та ін.);
дефіцит відповідних вітамін-К-залежних факторів згортання (фактори II, VII, IX. X) при важких ураженнях паренхіми печінки (гепатит, цироз, рак) і недостатності вітаміну К (механічна жовтяниця, порушення всмоктування в кишечнику, дисбактеріоз кишечника і ін.) ;
дефіцит К-незалежного фактора згортання фібриногену (гіпофібриногенемія) при важких ураженнях паренхіми печінки і ін .;
наявність феномена паракоагуляціі, зокрема, при ДВС-синдромі.

Міжнародне нормалізоване відношення

Оскільки тромбопластинову реагенти, які використовують в різних клінічних лабораторіях для визначення протромбінового індексу, характеризуються різною чутливістю до нестачі факторів згортання крові, виникла необхідність стандартизації методів визначення протромбінового індексу. З цією метою в якості еталону був обраний один із зразків людського мозкового тромбопластина. В даний час все тромбопластинову реагенти, що випускаються різними фірмами, калібрують по відношенню до цього ідеалу і визначають коефіцієнт перерахунку показників протромбінового індексу, отриманих в тій чи іншій лабораторії. Система такої калібрування отримала назву «міжнародне нормалізоване відношення» (МНО).

У нормі МНО становить близько 1,0. При проведенні антикоагулянтної терапії рекомендують прагнути до досягнення такого ефекту, щоб МНО знаходилося в межах 2,0-3,0.

На сьогоднішній день найкращим способом контролю лікування непрямими коагулянтами (НАК) є протромбіновий тест (ПТ) з представленням результатів у вигляді «Міжнародного нормалізованого відношення» (МНО) як тесту, наведеного до єдиного стандартним зразком. Впровадження системи МНО в практику лабораторних аналізів рекомендовано ВООЗ, однак в більшості лабораторій ЛПУ Росії до теперішнього часу продовжують визначати тромбиновой індекс, який є нестандартизованное показником, значення якого в терапевтичної області значно залежать від якості використовуваного тромбопластину, що не дає можливість зіставляти лікування НАК в різних ЛПУ .

В даний час все тромбопластинову реагенти, що випускаються різними фірмами, калибруются стосовно еталона. МІЧ повинен вказуватися маркування виробленого тромбопластина.

МНО розраховують за формулою:

МНО = (ПВ пацієнта / ПВ нормальної плазми)

Для визначення МНО визначають протромбіновий відношення (ПЗ), яке представляє відношення ПВ пацієнта до ПВ нормальної плазми (ПВ пацієнта / ПВ нормальної плазми), яке потім зводять до рівня МІЧ (МІЧ вказано виробником в паспорті до тромбопластину).

Для оцінки еффектівноеті лікування НАК рекомендується використовувати тромбопластини зі значеннями МІЧ нижче 2 (краще 1,0-1,2). Використання МНО дозволяє оцінювати ступінь гіпокоагуляції при лікуванні НАК, незалежно від використовуваного тромбопластину, порівнювати результати, отримані різними лабораторіями.

У нормі МНО становить близько 1,0. При проведенні антикоагулянтної терапії рекомендується прагне до показників МНО не менше 2,0-3,0.

тромбіновий час

Метод оцінки тромбінового часу полягає у визначенні часу згортання плазми при додаванні в неї тромбіну зі стандартною активністю, який має здатність індукувати перетворення фібриногену в фібрин без участі інших факторів згортання крові.

У нормі тромбіновий час становить 15-18 с. Його визначення дозволяє оцінити кінцевий етап згортання крові (перетворення фібриногену в фібрин). Таким чином, воно залежить від концентрації фібриногену, його властивостей і наявності в крові інгібіторів тромбіну (гепарину і антитромбіну III).

Причини подовження тромбінового часу:

афібриногенемія і гіпофібриногенемія;
ДВС-синдром і інші патологічні стани, що супроводжуються феноменом паракоагуляціі з порушенням процесу полімеризації фібрину і наростанням концентрації в крові продуктів деградації фібрину;
важкі порушення белковосинтетической функції печінки, що супроводжуються зниженням синтезу фібриногену;
гострий фібриноліз;
збільшення в крові концентрації інгібіторів тромбіну (антитромбіну III, гепарину).

Визначення тромбінового часу використовують для контролю за лікуванням гепарином і фибринолитиками.

Принципи оцінки базисних методів діагностики порушень коагуляційного гемостазу

Оцінка згортання крові за допомогою описаних базисних тестів дозволяє (залишити загальне орієнтовне уявлення про процес коагуляції крові. При цьому слід мати на увазі, що такі показники, як час згортання крові, і час рекальцифікації плазми мають досить низькою чутливістю, специфічністю і, отже, інформативністю : вони змінюються, як правило, лише при виражених порушеннях коагуляції крові і не дозволяють судити (хоча б приблизно) про пошкодження окремих її механізмів і етапів.

Перевагою в цьому відношенні мають три базисних тесту: тромбіновий, рромбіновий (в тому числі з визначенням МНО) і АЧТЧ. Вони дозволяють судити не тільки про стан всієї системи згортання в цілому, але і про можливість недостатності окремих факторів згортання.

При дефіциті фактора VII (проконвертин), який бере участь тільки в зовнішньому механізмі згортання, подовжується тільки протромбіновий час, а тромбіновий тест і АЧТЧ залишаються без зміни.
При дефіциті факторів XII, XI, IX, VIII і прекаллікреін, що беруть участь тільки у внутрішньому механізмі коагуляції, змінюються АЧТЧ, а протромбіновий і тромбіновий час згортання залишаються нормальними.
При дефіциті факторів X, V, II, на яких замикаються обидва механізму згортання крові, зміни виявляють як в протромбіновому тесті, так і у визначенні АЧТЧ. Тромбіновий час при цьому не змінюється.
При порушеннях кількості, структури і властивостей фібриногену (фактор I) зміни виявляють при виконанні всіх трьох базисних тестів. При цьому згідно також оцінити рівень фібриногену в сироватці крові.
При дефіциті фактора XIII показання всіх трьох базисних тестів виявляються нормальними.

Відео: Біохімічний аналіз крові - в діагностуванні хвороб

Подальше уточнення механізмів порушення коагуляції крові виконують за допомогою дифференцирующих тестів, докладно описаних в спеціальних інструкціях.

Визначення фібриногену і його високомолекулярних похідних

Зміст фібриногену в плазмі здорової людини становить 200-450 мг / дл.

Причини зменшення концентрації фібриногену:

вроджена недостатність фібриногену (афібриногенемія, гіпофібриногенемія, деякі варіанти дісфібріногенеміі);
важкі захворювання паренхіми печінки (цироз, рак, гепатит);
ДВС-синдром;
гострий фібриноліз.

Причини гіперфібриногенемії:

гострі інфекційні захворювання;
гострі і хронічні запальні захворювання;
злоякісні новоутворення;
тромбози і тромбоемболії, в тому числі у хворих на гострий інфаркт міокарда, ішемічний інсульт та ін.

похідні фібриногену

До найбільш важливим в практичному відношенні високомолекулярних похідним фібриногену відносять розчинні фібрінмономерние комплекси і продукти деградації фібрину.

Розчинні фібрин-мономерні комплекси - Високомолекулярні розчинні комплекси фібрин-мономера з фібриногеном і з продуктами розщеплення фібриногену / фібрину. У нормі розчинні фібрин-мономерні комплекси не виявляють. Їх поява в плазмі свідчить про порушення процесу нормальної полімеризації фібрин-мономерів. Ці комплекси погано коагулюють під впливом тромбіну, володіючи відносної тромбінрезістентностио.
Продукти деградації фібриногену в невеликих кількостях утворюються і в нормі (менше 8 мг / мл) в результаті розщеплення фібрину, присутнього в плазмі, під впливом плазміну. Підвищення вмісту продуктів деградації фібрину - ознака посилюється внутрішньосудинного згортання крові або масивних тромбоемболії, що супроводжуються активацією фібринолітичної системи.

Струтинскій А.В.

Лабораторні методи діагностики

Поділитися в соц мережах: