Зміст альфафетопротеїн (афп) в амніотичної рідини. Ацетилхолінестеразою і пренатальна діагностика дефектів нервової трубки.

Альфафетопротеїн - АФП відноситься до категорії онкоембріональних антигенів, тобто білків, які в нормі присутні тільки в ембріональних тканинах, в той час як у дорослих тканинах вони виявляються лише при наявності певних типів пухлин. Зміст АФП в АЖ змінюється в різні терміни вагітності. У невеликих кількостях АФП з`являється вже на ранніх стадіях, його концентрація швидко зростає після 10 тижнів вагітності, зберігається на цьому рівні аж до 17-го тижня, поступово знижується внаслідок розведення АЖ сечею плода після 20 тижнів вагітності. Так, максимальний вміст АФП (близько 3000 мкг / мл) в сироватці крові плода спостерігається між 10-й і 14-м тижнем вагітності, воно в сотні разів перевищує рівень АФП в АЖ і в тисячі разів - в материнській сироватці в досліджуваний період. На 17-му тижні вагітності вміст АФП в сироватці крові плоду приблизно в 50 000 разів вище, ніж в материнській сироватці, і в 150 разів вище, ніж в навколоплідних водах.

До дослідження діагностичних зразків необхідно в кожному лабораторному центрі отримати свої медіани (норми) змісту Альфафетопротеїн - АФП в АЖ для кожного тижня вагітності. Відхилення зазвичай висловлюють в одиницях, кратних нормального рівня для даного терміну вагітності (МОМ).

У лабораторії пренатальної діагностики Інституту акушерства і гінекології ім. Д.О. Отта РАМН (Санкт-Петербург) з 1989 р проводиться дослідження АЖ вагітних групи високого ризику по народженню дітей з дефектами нервової трубки і іншими пороками розвитку.

Для імуноферментного аналізу змісту Альфафетопротеїн - АФП в АЖ використовуються стандартні набори реактивів (наприклад, тест-системи «Рош-Москва» або «Алкор-Біо» (Санкт-Петербург)), при цьому навколоплідні води необхідно розводити принаймні в 100 разів, так як вміст АФП в АЖ в нормі становить не менше 5 мкг / мл.

підвищення рівня Альфафетопротеїн - АФП в АЖ в кілька разів є серйозною ознакою наявності дефектів нервової трубки, передньої черевної стінки або інших аномалій, внаслідок яких відбувається витікання тканинної рідини (сироватки) плода в АЖ.

альфафетопротеин в амніотичної рідини

Ацетилхолінестеразою і пренатальна діагностика дефектів нервової трубки

ацетилхолінестеразою (АХЕ) відноситься до класу естераз, що беруть участь в гідролізі холінового ефірів. Існують два великі класи: БУТИРИЛХОЛІНЕСТЕРАЗИ (псевдохолінестерази) і справжні АХЕ. Головними труднощами в вимірі АХЕ є дискримінація активностей двох ферментів, тому в ПД використовується метод якісного дослідження з-ферментного складу, при якому в по-ліакріламідном гелі в зразках АЖ плодів з аненцефалія виявляється специфічна швидко рухається смуга. Останнім часом у пресі знову з`явилися повідомлення про розробку тест-систем для кількісного аналізу АХЕ, проте в нашій країні вони поки не виробляються.

У 1989 р в 17 центрах Великобританії було проведено спільне дослідження зразків АЖ 32 642 вагітних, 428 з яких мали плід з відкритою спинномозковою грижею, а 238 - з аненцефалією. Специфічність АХЕ-тесту виявилася вищою, ніж АФП, особливо при терміні вагітності понад 16 тижнів. Частота виявлення вад розвитку за наявністю АХЕ склала 98% при 0,31% хибнопозитивних результатів, в той час як визначення змісту АФП дозволило виявити патологію в 91% випадків (при 0,36% хибнопозитивних даних). Був зроблений висновок про високу інформативність комплексного визначення АФП і АХЕ у всіх АЖ з підвищеним вмістом АФП.

Згідно з нашими спостереженнями у всіх АЖ плодів з дефектами нервової трубки методом нативного електрофорезу в поліакриламідному гелі визначається наявність специфічної ізоформи АХЕ. Слід зазначити, що проведення в Санкт-Петербурзі дворівневого ультразвукового обстеження вагітних дозволяє в останні роки виявляти більшість грубих вад розвитку, не вдаючись до вимірювання АФП і АХЕ в АЖ.

Таким чином, біохімічне дослідження АЖ для виявлення дефектів нервової трубки або передньої черевної стінки проводиться в разі різко підвищеного рівня АФП в сироватці крові (більше 2,5 МОМ в 15-17 тижнів) і при відсутності ультразвукових даних про патологію плода.

Зразки АЖ отримують при амниоцентезе шляхом аспірації 5-10 мл рідини в терміни вагітності від 16 до 26 тижнів. АЖ центрифугируют 20 хв при 2500 об. / Хв і або безпосередньо використовують, або зберігають до дослідження при температурі -20- 70 ° С. Зміст АФП в АЖ визначають методом ракетного іммуноелектрофореза або імуноферментним методом. Детально з методикою визначення АФП і АХЕ в АЖ можна ознайомитися в керівництві.


Поділитися в соц мережах:

Cхоже