Мікроскопія. Виділення збудника інфекції у дітей

Відео: Бактерії. Розум під мікроскопом

У лабораторній діагностиці хвороб інфекційної природи використовуються такі методи:
1) мікроскопія препаратів, в тому числі із застосуванням реакції імунофлюоресценції;
2) виділення культури збудника;
3) виявлення специфічних антитіл (серодиагностика);
4) молекулярно-генетичні методи.

лікар повинен отримати матеріал для дослідження, вибрати необхідний метод діагностики і, якщо можливо, повідомити про передбачуване збудника мікробіологові, що дозволяє провести діагностику з мінімумом витрат. Мікробіолог визначає не тільки вид збудника, але і його чутливість до антимікробних засобів.

Діагностика бактеріальних і грибкових інфекцій грунтується головним чином на мікроскопії, виявленні антигенів збудника і вирощуванні збудника на живильних середовищах. Для виявлення деяких збудників розроблений також методи молекулярної діагностики. Мікроскопія. У мікробіологічної діагностики використовується цілий ряд спеціальних забарвлень. Проте найбільш важливу роль в мікроскопічній діагностиці продовжує грати забарвлення по Граму, оскільки вона дешева і дозволяє швидко виявити бактерії, гриби, лейкоцити і епітеліальні клітини.

Відео: Секретні території Бактерії Розум під мікроскопом інфекції, епідемія

досвідчений мікробіолог може зробити предапрітельние висновки про етіологію захворювання по морфології мікроорганізмів (коки, палички та ін.), а також за результатами їх забарвлення: грампозитивнімікроорганізми мають синій колір, грамнегативні - червоний. Наприклад, коки скупченнями - це швидше за все, стафілококи. Проте ставитися до таких висновків слід обережно і подтвердать їх даними посіву. За наявності лейкоцитів і епітеліальних клітин оцінюється якість взяття матеріалу. Так, присутність в зразку мокротиння 10 епітеліальних клітин і більше на кожне поле зору мікроскопа під малим збільшенням - безсумнівна ознака забруднення слиною. У багатьох випадках, наприклад, при дослідження СМЖ, завдяки фарбуванні за Грамом вдається швидко отримати цінні дані.
На жаль, цей метод малочувствителен і виявляє мікроорганізми тільки в кількості не менше 10 000/100 000 / мл.

Методи швидкого виявлення антигенів бактерій. Широко використовується метод латекс-аглютинації. Він дозволяє виявити стрептококи групи А у виділеннях глотки, Haemophilus influencae типу b, Streptococcus pneumoniae, стрептококи групи В і Neisseria meningitidis в спинномозковій рідині. Однак використовувати даний метод для дослідження всіх зразків спинномозкової рідини недоцільно, оскільки він по діагностичної цінності приблизно відповідає фарбування за Грамом. Тому латекс-аглютинацію краще застосовувати при наявності плеоцітотоз в спинномозковій рідині у хворих, які отримували антимікробні препарати.

У США є швидкий і чутливий тест на присутність антигенів Streptococcus pneumoniae в сечі - Binax NOW Urinary Antigen Test (Binax Portland, ME). Його також можна застосовувати для виявлення антигенів Streptococcus pneumoniae в спинномозковій рідині у хворих на менінгіт. До серйозних недоліків даного тесту відноситься те, що він позитивний приблизно у 50% практично здорових дітей, у яких носоглотка колонізована Streptococcus pneumoniae.

Виділення культури збудника

Для виділення більшості бактерій, викликають захворювання у людини, використовують селективні поживні середовища, такі як кров`яний або шоколадний агар. Зокрема, агар Мак-Конки пригнічує ріст грампозитивних мікроорганізмів, а грамнегативні палички ростуть на ньому добре. Зміна кольору середовища навколо колоній бактерій, ферментують лактозу, на рожевий дозволяє відрізнити їх від колоній інших грамнегативних паличок. Рідкі середовища на м`ясному бульйоні застосовуються для посівів крові, а також для накопичення бактерій, що знаходяться в біологічних матеріалах в невеликій кількості.

Більшість грибів вирощують на середовищі Сабуро, містить глюкозу, агар і антибіотики, що пригнічують ріст бактерій. Багато збудники, наприклад Bartonella spp., Bordetella pertussis, Brucella spp., Francisella spp., Legionella spp., Анаероби, мікобактерії, окремі гриби (Malassezia furfur та ін.), Мікоплазми і хламідії потребують спеціальних поживних середовищах і умовах вирощування. При підозрі на інфекцію, викликану одним з цих мікроорганізмів, перед посівом слід проконсультуватися з мікробіологом.

після виділення культури вид збудника встановлюють по біохімічним тестам або здатності рости в присутності певних речовин, які гальмують ріст інших мікроорганізмів (деякі антибіотики, солі, жовч і т. п.). Для ідентифікації збудника також досліджують антигенну структуру за допомогою олігонуклеотидних зондів.