Антитіла до кардіоліпіну: норма

Цей негативно заряджений фосфолипид вперше був виділений з тканин серцевого м`яза, що і визначило його назву.

Виявлення високого титру антитіл до кардіоліпіну використовують для діагностики АФС. Однак виявлення антитіл до кардіоліпіну, незважаючи на високу надійність і відтворюваність, в клінічній практиці має доповнюватися і іншими методами імунологічної діагностики АФС, а також визначенням ВА, оскільки антитіла до кардіоліпіну в ряді ситуацій виявляються при малярії, сифілісі, туберкульозі та ін.

принцип методу

Методики кількісного визначення антитіл до кардіоліпіну засновані на технологіях ELISA. На першому етапі розведені зразки пацієнтів инкубируют в лунках планшета. Використовувані в наборі лунки планшета покриті високоочі-щенним кардіоліпіну. При наявності специфічних імуноглобулінів в досліджуваному зразку останні зв`язуються з антигенами на твердій фазі. Після додавання хромогену суміш набуває забарвлення за рахунок його розщеплення пероксидазой.

Реактиви та обладнання

• Лунки мікропланшетів, покриті високоочищеним кардіоліпіну.
• Ферментний кон`югат.
• Буфер для розведення зразків.
• Промивний буфер.
• Розчин тетраметилбензидину.
• Стоп-реагент.
• Калібратори.
• Устаткування для виконання ELISA (вошер, рідер для планшетів і ін.).

Дистриб`ютор діагностичного набору реагентів - ЗАТ «Біохіммак».

Зразки крові для дослідження

Як зразок для визначення концентрації антитіл до кардіоліпіну слід використовувати БТП з стабілізованою натрію цитратом крові або сироватку.

техніка виконання

Процедура дослідження повинна чітко відповідати інструкції до набору реагентів.

Оцінка результатів дослідження

Оскільки в даний час не існує міжнародного стандарту антитіл до кардіоліпіну, результати дослідження оцінюють в відносних одиницях (Од / мл).

Для здійснення контролю якості визначають концентрацію антитіл до кардіоліпіну в позитивному і негативному контролях.

причини помилок

• Недотримання температурного режиму зберігання.
• Порушення процедури промивання (при ручної промивки потрібно промивати не менше 4 разів). Після здійснення промивки слід осушити планшет на фільтрувальної папері, оскільки рідина, зазвичай залишається в лунках після промивання, може перешкодити дії субстрату і знизити оптичну щільність досліджуваного зразка.
• Змішування реагентів з різних лотів.
• всередині утворюється конденсат лунок. Для попередження виникнення конденсату не слід розкривати пакет до тих пір, поки він не прогріється до кімнатної температури.

Інші аналітичні технології Оскільки виявлення антикардіоліпінових антитіл засноване на обліку взаємодії антигену і антитіла, для їх виявлення придатні і інші технології, що дозволяють мітити компоненти імунної взаємодії (фермент, радіонуклід, флуоресцентний барвник і ін.).