Онкологія-

И.У. Оостерхуіс, М.К. Мостерт, Л.Х.І. Лоойенга

Роттердам, Нідерланди

джерело RosOncoWeb.Ru

Пухлини статевих клітин людини представляють собойгетерогенную групу новоутворень, що відбуваються, мабуть, з прімордіальних статевих клітин. Вони в основному зустрічаються вгонадах, але можуть також утворюватися і в певних внегонаднихсайтах. Така локалізація пояснюється міграційними шляхами прімордіальнихполових клітин, які образуясь в ентодермі жовткового мешка4-х тижневих ембріонів, мігрують вздовж дорзального мезентеріяв область генітальної складки. У чоловіків герміногенні опухолімогут розвиватися як в яєчку, так і крижово-куприкової відділі, заочеревинномупросторі, а також в середостінні (Mostofi 1998 Scully 1979). У підлітків і дорослих (включаючи осіб старшого віку) герміногенні пухлини в основному утворюються в яєчку, в той часяк у новонароджених і дітей молодшого віку їх головним образомобнаружівают в крижовому відділі, основнм місці локалізації данноготіпа пухлин у жінок.

На підставі даних гістології, віку пацієнта, а також біологііопухолей все герміногенні пухлини яєчка можуть бути разделенина три групи (клініко-морфологічні категорії) (Oosterhuis, Looijenga, et al., 1997):

Герміногенние пухлини новонароджених і дітей молодшого віку (GCTI): тератоми і пухлини жовтковиммішка
Герміногенние пухлини підлітків і юнаків (TGCT): семиноми і несеміномниеопухолі
Герміногенние пухлини літніх (SS): сперматоцітние семиноми
У наступних параграфах будуть розглянуті основні характерістікіданних груп, а також сучасні погляди на їх генетичні взаємини.

Герміногенние пухлини яєчка новонароджених і дітей молодшого віку (GCTI).

GCTI виявляються в ранньому дитячому віці з частотою 0.12на 100.000 (Looijenga 1999). У більшості випадків вони вознікаютво внегонадной сайтах, переважно, в крижовому відділі (45%), і в рідкісних випадках в яєчку (6%). Гістологічно GCTI представляютсобой тератоми, або пухлини жовткового мішка. Тератоми (TE) являютсядоброкачественнимі пухлинами і тому в якості лікування можетпріменяться лише орхіектомія. Пухлини жовтковиммішка вознікаютчаще, ніж TE (4: 1) (Harms and Janig 1986), є злоякісними, і їх лікування може зажадати проведення додаткової хіміотерапії.

На відміну від ситуації з герміногеннимі пухлинами яєчка підліткового дорослих (TGCT- див. Нижче), для яких показано, що їх предшественнікаміявляются внутрішньоепітеліальні карциноми (carcinoma in situ, CIS) (Skakkebaek et al., 1987), в даному випадку переконливих доказ зв`язку GCTI з CIS немає. Герміногенние пухлини крижово-копчіковогоотдела зазвичай являють собою великі доброякісні тератоми, що з`являються незабаром після народження і відзначалися найчастіше вулиць жіночої статі. Діти у віці стрше 6-и років мають большійріск розвитку злоякісної пухлини жовтковиммішка як ізпредшествующей тератоми, так і де мають бути удаленнойтератоми (Perlman et al., 1994).

Методом проточної цитометрії було показано, що тератоми в основномдіплоідни (Silver et al., 1994- Stock et al., 1995 Hoffner etal., 1994), в той час як пухлини жовтковиммішка можуть битьанеуплоіднимі, в більшості випадків - майже тетраплоидной (Oosterhuiset al., 1989- Kommoss et al., 1990 Perlman, Cushing et al., 1994 Jendery et al., 1995). Різниця в плоїдності була подтвержденацітогенетіческі: FISH-аналіз і кариотипирование показали отсутствіехромосомних аберацій в тератомах і наявність значних аберраційхромосом в пухлинах жовтковиммішка. Чи пов`язано відсутність хромосомнихаберрацій в тератомах з втратою пухлинних клітин в процесі культивування, поки не відомо. Каріотипування пухлин жовтковиммішка виявілоаномаліі в короткому плечі хромосоми 1 (часткова втрата районаp36), довгому плечі хромосоми 6, а також аномалії в районі 3p (Kaplan et al., 1979- Oosterhuis et al., 1988- Oosterhuis et al., 1993- Hoffner , Deka et al., 1994- Perlman, Cushing et al., 1994 Bussey et al., 1999). FISH-аналіз клітин пухлин жовткового мешкаподтверділ наявність аберацій в хромосомі 1, а так само показав ізмененіечісла копій для хромосом 8, 10, 12, 17 і X (Hu 1992 Stock etal., 1994- Jenderny, Koester et al., 1995 Perlman et al., 1996).

Нещодавно пухлини жовтковиммішка з сім`яників дітей раннеговозраста були проаналізовані за допомогою CGH-технології. Несмотряна те, що число проаналізованих випадків було невелике, в них був виявлений подібна картина хромосомного дисбалансу (вовлеченниерайони поміщені в дужки). У всіх випадках була виявлена потерячасті хромосомного матеріалу областей 4q (23-33) і 6q (16-22), всочетаніі з придбанням матеріалу в області 20q. За крайнеймере в трьох випадках виявлено: втрати частини хромосомного матеріалав області 1p (21-31) в поєднанні з придбанням хромосомного матеріалав областях 3p (22-24), 9q (34), 12p (12-13), 17q (22-25) , 19q (13) і 22 (13).

Крім чотирьох пухлин жовтковиммішка нами були обследованислучаі прогресії крижових тератом в пухлини жовткового мешка.Виявленная картина хромосомнихаберацій була дуже схожа з таковойдля пухлин яєчка. Ці дані добре узгоджуються з більш раннімікаріотіпіческімі дослідженнями (Perlman, Cushing et al., 1994 Bussey, Lawce et al., 1999) і вказують на те, що генетіческаяконстітуція цих пухлин в більшій мірі визначається гістологією, а не анатомічної локалізацією.

В одному випадку пухлини жовтковиммішка був показаний високий уровеньампліфікаціі району 12q12-q14 області, як відомо, содержащейген MDM2. Відомо також, що MDM2 утворює комплекс з P53, пріводяк ингибированию функції останнього (Haupt et al., 1997 Lane andHall 1997 Midgley and Lane 1997). У зв`язку з цим, використовуючи іммуногістохіміческійподход, ми досліджували наявність в даних пухлинах MDM2 і P53. Нашіданние показали, що в пухлинах жовтковиммішка і тератомах продуціруютсяMDM2, в той час як продуктів гена P53 виявлено не було. Відповідно, в цих пухлинах не було виявлено мутацій в екзонах 5-8 генаP53. Ці дані показують, що інактивація гена P53 в цих опухоляхпроісходіт не так на генетичному, а на біохімічному рівні (Prives1998).

Оскільки в хромосомніаберації в тератомах виявлені не були, наші дані не дають нових відомостей про можливі взаімоотношеніяхмежду пухлинами жовтковиммішка і тератомами. Припущення про тому, що тератоми можуть прогресувати в пухлини жовтковиммішка, зроблене на підставі дослідження крижових тератом (Gonzalez-Crussi1982), нуждаетс надалі подтверденіі з використанням жівотнихмоделей (Van Berlo et al., 1990).

Герміногенние пухлини яєчка у підлітків і дорослих (TGCT)

Гістологія, клінічна характеристика і моделі прогресії

Клінічно і морфологічно TGCT можуть бути розділені на дватіпа: семиноми (SE) і несеміноми (NS). SE зазвичай проявляютсяу чоловіків у віці 35-и років, в той час як NS як правило проявляетсялет на десять раніше. SE складаються з неопластических аналогів первічнихполових ктеток. NS можуть складатися з ембріональних тканин (ембріональнаякарцінома, незріла і зріла тератома) і / або внеембріональнихтканей (пухлина жовткового мішка і хоріокарцінома). З усіх TGCT, 40% складають NS, і 50% - SE. Решта TGCT складаються з компонентовобоіх типів пухлин і класифікуються згідно Британської классіфікаціікак змішані пухлини (CT), або як NS згідно классіфікацііВОЗ (Mostofi, 1998).

SE зазвичай менш агресивні в порівнянні з NS, хоча агрессівностьпоследніх залежить від гістологічного подпіпа. Загальний рівень вилечіваемостіпаціентов з TGCT високий, але до сих пір 10% хворих помирає від даннойболезні. Відсоток смертності може бути знижений застосуванням інтенсівноголеченія. До теперішнього часу не існує надійних факторів, здатних передбачити результати лікування (Bokemeyer and Schmoll1995).

Вважається, що загальним попередником SE і NS є CIS (Skakkebaek, Berthelsen et al., 1987), що складаються з інтратубулярних раковихклеток, що нагадують клітини SE. Екстраполяції засновані на наблюденіяхпаціентов з діагнозом CIS без інвазивного TGCT показують, чтоCIS завжди прогресує в інвазивні TGCT (Giwercman et al., 1993- Burke and Mostofi 1988- Dieckmann and Loy 1993). Первоначальнаяекспансія CIS клітин виявляється як інтратубулярная або мікроінвазівнаясемінома.

Існують дві основні моделі розвитку CIS в TGCT. Согласноодной різні гістологічні варіанти TGCT виникають незалежно (Sesterhenn 1985), в той час як інша модель передбачає, що SE є проміжною стадією між CIS і різними несеміномниміопухолямі (Oosterhuis et al., 1989- Oliver 1987). Цітогенетіческіеісследованія, які показали наявність однакових хромосомних аберраційв SE і в NE компоненті CT (Van Echten-Arends et al., 1995 Haddadet al., 1988) свідчать на користь останньої моделі. Недавновидвінутая гіпотеза про те, що на кожній стадії розвитку TGCTможет відбуватися перепрограмування клітин CIS або Семіноми поліпонентние ембріональні ракові клітини, які є стволовиміклеткамі несеміномних пухлин, (Oosterhuis et al., 1997) такжене суперечить другій моделі. Висловлюється припущення, чтошанс перепрограмування CIS і SE в NS зменшується з віком, що пояснює факт клінічного прояву несеміномних опухолейв більш ранньому віці в порівнянні з Семіноми (Oosterhuis, Castedo et al., 1989).

хромосомна конституція

Методом проточної цитометрії було показано, що TGCT представляютсобой анеуплоїдних клітини, причому клітини SE гіпертріплоідни, аклеткі NS - гіпотріплоідни (Oosterhuis, Castedo et al., 1989-Fossе et al., 1991 el-Naggar et al., 1992). Механізм поліплодідізаціів даному випадку відрізняється від такого, описаного для большінстваракових клітин, які розвиваються відповідно до моделі опухолевойпрогрессіі, запропонованої Nowell (Nowell 1976- Nowell 1986). Етамодель описує клональную еволюцію популяції пухлинних клітин, що починається з диплоїдних клітин, які розвиваються в сторонуувеліченія числа наборів хромосом. У разі ж TGCT цей механізмсостоіт в поліплоїдизації з последуюімі локальними втратами хромосомногоматеріала. Схильність клітин TGCT до поліплоїдизації можетбить пов`язана з їхнім походженням з первинних статевих клеток.Еті клітини можуть бути особливо схильні до поліплоїдизації, посколькуоні мають високу митотической активністю і тенденцією до образованіюмехромосомних мостів. Відомо, що патогенгез TGCT включає определенниймеханізм освіти хромосомних мостів (Gondos 1993).

Поліплоїдизація з подальшими локальними втратами хромосом вTGCT в результаті дають специфічний патерн хромосомних наборів, який виявляється каріотипуванням (De Jong et al., 1990 Castedoet al., 1989- Van Echten-Arends et al., 1995). Ці ісследованіяпоказалі, що на тлі триплоїдного індексу ДНК в клітинах SE іNS є надлишок хромосом 7, 8, 12 і Х при нестачі хромосом11, 13, 18 і Y. Іншими часто зустрічаються хромосомними аномаліяміявляются втрати хромосом 4, 5 і 9, надлишок хромосоми 21. з меньшейчастотой (lt; 20%) зустрічаються делеции або аберації в районах1p21-26- 6q14-25- 7q11-q36 і 12q12-24 (Murty and Chaganti 1998) .Однак, ці хромосомніаберації з одного боку не завжди обнаружіваютсяв даних типах пухлин, а з іншого - виявляються в другіхопухолях, вказуючи на те, що ці події мають відношення до опухолевойпрогрессіі. Незважаючи на те, що в SE і NS виявляються однотіпниехромосомние пересторойкі, специфічною рисою SE є значітельнобольшее, ніж в NS число копій хромосом 7, 15, 19 і 22, нарядус зменшеним числом копій хромосоми 17 (Van Echten-Arends etal., 1995).

Іншою відмінною рисою TGCT є сверхпредствленостькороткого плеча хромосоми 12, яка спостерігається в більшості случаевв вигляді ізохромосома i (12p- рис. 4). Дана ізохромосома билавпервие описана в 1982 р (Atkin and Baker 1982). Вона зазвичай обнаружіваетсяв 80% TGCT (De Jong, Oosterhuis et al., 1990). Спільність проісхожденіяобоіх хромосомних плечей (Sinke et al., 1993) говорить в пользупреположенія, що i (12p) хромосома швидше утворилася в результатенеправільного розподілу центроміри, ніж як результат не-сестрінскогохроматідного обміну (Mukherjee et al., 1991). Незважаючи на те, що в клітинах TGCT завжди присутні аберації 12p, образованіюi хромосоми завжди передує полиплоидизация. Доказательствометого служить збереження гетерозиготності по 12p в i-позітівнихTGCT (Geurts van Kessel et al., 1989).

Ідея про те, що сверхпредставленность короткого плеча хромосоми12 грає важливу роль в развитиии TGCT була підтверджена гібрідізаціейin situ (Suijkerbuijk et al., 1993- Samaniego et al., 1990). Показанотакже, що сверхпредставленность 12p спостерігається і в i-негатівнихTGCT.

Дані кариотипирования. представлені вище отримали дальнейшееподтвержденіе недавніми експериментами з використанням CGH-технології (Korn et al., 1996 Mostert et al., 1996 Ottesen et al., 1997 Summersgill et al., 1998 Rosenberg et al., 1999).

Більш того, ампліфікація певній галузі короткого плечахромосоми 12 в семіномних метастазах (Suijkerbuijk et al., 1994).

Протоонкогени і супресорні гени

Молекулярні дослідження TGCT знаходяться в початковій стадіі.Для болученія більшої інформації про можливу роль супрессорнихгенов, у багатьох дослідженнях проводився аналіз втрати гетерозиготності (LOH). Незважаючи на те, що отримані не завжди узгоджуються дані, в частині досліджень підтвердилися результати. отримані з помощьюцітогенетіческіх методів, тобто, делеции областей, що включають район1p (Mathew et al., 1994), 5q (Peng et al., 1995 Murty et al., 1994- Peng et al., 1999) and 12q ( Murty et al., 1992).

Виявлено також гарячі точки делеций, що включають генs DCC (18q21) і RB1 (13q14) (Murty et al., 1994). Аберації інших протоонкогенові супресорних генів в TGCT зустрічаються рідко: MYC (c-MYC- 8q24, N-MYC- 2p24), c-KIT (4q11-12) і P53 (17p13) (Lothe et al., 1995), K-RAS (12p12) (Dmitrovsky et al., 1990) і NME1 (17q22) (Schmidtet al., 1997).

На рівні РНК виявлено збільшення експресії таких проктоонкогеновкак: c-KIT (Rajpert-De Meyts and Skakkebжk 1994- Strohmeyer etal., 1995), N-MYC, c-MOS (Shuin et al., 1994), циклин D2 and K-або N-RAS (Houldsworth et al., 1997 Houldsworth et al., 1997) .Обнаружено також зниження або відсутність експресії таких онкогеновкак: RB, DCC (Murty, Li et al., 1994), INT-2 (Shimogaki et al. , 1993- Yoshida et al., 1988) і c-eERB-1 і 2 (Shuin, Misaki et al., 1994).

Оскільки за єдиним винятком (Murty et al., 1994) вданому типах пухлин не було виявлено нестабільності мікросателлітнихпоследовательностей, вважається. що дефекти репарації генів неграючі ролі в пргресс TGCT (Lothe, Peltomaeki et al., 1995).

Семйние випадки TGCT

Епідеміологічні дослідження і аналіз зчеплення позволяютпредположіть, що третина пацієнтів з TGCT характеризується генетіческойпредрасположенностью (Nicholson and Harland 1995). У несколькіхісследованіях робилися спроби ідентифікувати райони хромосом, що несуть чутливі гени. Аналіз зчеплення проведений в 50семьях з використанням 221 маркера (Leahy et al., 1995) показав, що такими районами можуть бути певні області хромосом1, 4 (2 області), 5, 14 і 18. Порівняння отриманих результов зданими представленими International Testicular Cancer LinkageConsortium дозволяє припустити, що дані гени ймовірно локалізуютсяв хромосомах 3. 5. 12 і 18. на жаль, немає даних про локалізаціігенов схильності, що може пояснюватися генетіческойгетерогенностью (дію різних генів проводить до одного конечномурезультату).

Герміногенние пухлини людей старшого віку

Третій типом герміногенних пухлин, діагносціруемих в яічкеявляется сперматоцітная семінома (SS), як правило обнаружіваемаяу чоловіків старше 50-ти років. Подібні пухлини ніколи не вознікаютво внегонадной сайтах і в більшості випадків прогноз сприятливий (Talerman 1980 Burke and Mostofi 1993). Фенотипічно SS характерізуютсяклеточной гетерогенність. Морфологічно вони можуть напомінатьSE (Talerman 1980). На відміну від SE, SS є проізводниміболее диференційованих клітин, а саме, B сперматогонієв B (Masson 1946- Romanenko and Persidskii 1983- Rosai et al., 1969) .Як правило в разі SS в прилеглій паренхімі НЕ обнаружіваетсяпреінвазівних пухлин (CIS), хоча наявність інтратубулярних SSпредполагает, що їх попередником є преинвазивного пухлини (Muller et al., 1987).

Вважається, що SS розвиваються незаісімо, хоча на цей рахунок імеютсянекоторие сумніви. Грунтуючись на даних про те, що 40% SS являетсяc-KIT позитивними, висловлюється припущення, що по крайнеймере деякі з цих пухлин ведуть свій початок від первічнихполових клітин (Kraggerud et al., 1999). Іммуногістохіміческійаналіз з використанням PLAP показав гістологічні відмінності SSот інших пухлинних клітин. У цих експермента SS характерізоваліськак негативні, в той час як інші герміногенні пухлини биліпозітівнимі (Manivel et al., 1987). Методом прточной цітометріібило показано. що клітини SS можуть бути як диплоїдними. так іанеуплоіднимі (Takahashi 1993). Оскільки даний тип опухолейявляется рідкісним (0.2 на 100.000- Burke and Mostofi 1993), сведеніяоб їх хромосомної конституції дуже мізерні.

Перші дані про хромосомної конституції SS були отримані в 1973 р, коли були описані 2 випадки з 52 і 82 хромосомами відповідно (Atkin 1973). Результати пізніших робіт по визначенню плоідностіданних типів клітин з використанням різних методів дали протіворечівиерезультати (Talerman et al., 1984- Dekker et al., 1992 Takahashi1993- Looijenga et al., 1994). У наших роботах була вперше опісанакаріограмма SS клітин, що показує їх анеуплоїдних і небольшоеколічество структурних аберацій (Rosenberg et al., 1998). Ісследованіянашего експериментального матеріалу а також трьох інших зразків, включаючи білатеральні пухлини, з використанням CGH- технологііпоказалі, що єдиною специфічною особливістю SS являетсясверхпредставленность хромосоми 9 (Rosenberg, Mostert et al., 1998). Можливо, що відносна доброякісність данноготіпа пухлин пов`язана з тим, що спостерігається хромосомний дісбаланссвязан з цілими хромосомами. Гибридизацией in situ з пробами спеціфічнимідля X і Y хромосоми була показана гетерогенність популяцій опухолевихклеток. Мабуть, це пов`язано з тим, що гістологічно ці опухоліпредставлени дрібними, середніми і великими клітинами (Burke andMostofi 1993- Cummings et al., 1994- Eble 1994- Looijenga, Olieet al., 1994). в яких взаєминах перебувають ці клеточниетіпи поки не встановлено. Передбачається, що в цьому отношенііметод мікродіссекціі і CGH можуть бути вельми перспективними (Looijengaet al., 1999).

Передбачається, що SS відбуваються з сперматгоніев B (Masson1946- Rosai et al., 1969- Romanenko and Persidskii 1983). Обнаруженіеодінакових хромосомних аномалій в білатеральних SS ставить подсомненіе це припущення. як пояснення обнаруженнимсходствам пропонується припущення про мутації клітин зародишевихліній (de novo, або сімейних), або про наявність метастазів. Обидва предположеніяпредставляются малоймовірними, оскільки сімейні випадки SS невідомі, метастазування чистих SS також ніколи не обнаружівалось.Недавно з`явилася нова гіпотеза пов`язана з виявленням в SSклетках c-KIT (SCF) білка, який є маркером первічнихполових клітин (Manova and Bachvarova 1991). Цей рецептор такжебил виявлений в CIS і SE (Strohmeyer et al., 1991 Strohmeyeret al., 1995). Передбачається, що принаймні частина SS ведетсвое походження від первинних (прімордіальних) статевих клітин (Kraggerud et al., 1999), в яких мутації відбуваються до їх міграції гонадного зачатки. Ці різні моделі можуть також служити об`ясненіемпрісутствія аналогічних хромосомнихаберацій в білатеральнихSS. Аналіз рівнів генної експресії і особливостей мейозу могутбить інформативними в даному випадку.

патогенетичне спорідненість

Вважається, що SS беруть свій початок не з CIS, а від первинних (прмордіальних) статевих клітин. Дискусія з приводу загального ілінезавісімого патогенезу GCTI і TGCT від частини пов`язана з обнаруженіемCIS-подібних клітин в прилеглій паренхімі GCTI. Існує опісаніедвух випадків, в яких припущення про присутність даних клетокстроітся на даних про PLAP-позитивності і морфології (Jacobsen1992). Ці дані критикуються іншими авторами (Parkinson andRamani 1993). Слід зазначити, що иммуногистохимический підхідного може бути використаний для ідентифікації CIS клітин в паренхімеяічка на першому році життя, тому що нормальна паренхіма може содержатьPLAP-позитивні статеві клітини-попередники (Jшrgensen et al., 1993). Загальний патогенетичний шлях для GCTI і TGCT представляетсямаловероятним також і в зв`язку з їх різною плоїдності.

У той же час, є вказівки на те, що пухлини желточногомешка яєчка дітей можуть містити додаткові копії 12p (Stock, Ambros et al., 1995 Jenderny et al., 1996), і навіть i (12p) хромосому, яка детектується за допомогою FISH -Методика (Stock, Ambros etal., 1995). Правда, останній результат не підтверджується каріотипуванням (Perlman, Cushing et al., 1994). На нашій невеликій вибірці митакже не виявлено присутності екстра копій 12p. Ми действітельнопоказалі наявність в трьох з п`яти пухлинах жовтковиммішка дополнітельнихфрагментов 12p, але ці фрагменти відрізнялися від тих, які обнаружіваютсяв TGCT. Ми припускаємо, що в ряді випадків виявлення опухолейс i (12p) у дітей мова йде про пухлини дорослого типу у мальчіковс раннім статевим дозріванням.

Додатковими свідченнями на користь незалежного патогенезаGCTI і TGCT є дані епідеміологічних і іммуногістохіміческіхісследованій. На відміну від TGCT, підйому частоти GCTI НЕ наблюдается.В той час як P53 білок виявляється в клітинах TGCT (Schenkmanet al., 1995 Guillou et al., 1996), він не детектується в GCTIклетках.

Описано тварини моделі GCTI і TGCT. Тератокарціноми миші вероятнеевсего передставляют модель GCTI (Walt et al., 1993), демонстріруяту ж, здатність пргрессіровать в пухлини жовтковиммішка (van Berlo et al., 1990). Семіноми собак найімовірніше представляютмодель SS пухлин людини (Looijenga, Olie et al., 1994). Отсутствіежівотних моделей TGCT підкреслює специфічність даного тіпаопухолей для людини.

Таким чином, представлені дані підтверджують незавісімиегенетіческіе шляху GCTI, TGCT і SS.

Ампліфікація 12p в TGCT

Дані кариотипирования, FISH- і CGH-аналізів показують наявність TGCT додаткових доз цілого короткого плеча хромосоми 12. У більшості випадків ця подія детектується як прісутствіеi (12p). FISH- аназіз з використанням центромеру-спеціфіческойпроби як гібридизаційного зонда вважається подходящімметодом для детектування i (12p) в інтерфазних ядрі (Mukherjeeet al., 1991 Rodriquez et al., 1992). Хоча згідно з нашими данниметот метод не є достатньо надійним, він може бути усовершенствовандополнітельним застосуванням FISH з двома гібридизаційним пробами, специфічними до центромере і до короткому плечу хромосоми 12. дляетого цілей можуть бути також успішно використані кольорові зонди, специфічні до короткого і довгого плеча хромосоми 12 ( Bloughet al., 1997 Blough et al., 1998).

Хоча освіту ізохромосома 12 і не є першою стадіейпатогенеза TGCT (Geurts van Kessel et al., 1989), постійне прісутствіеетіх структур в клітинах інвазивних пухлин вказує на те, чтопрісутствіе екстра копій генів розташованих в короткому плечехромосоми 12 грає важливу роль в розвитку цього типу пухлин. ідентифікувати гени, залучені в цей процес дуже важко, оскільки розмір короткого плеча становить 40 Mb, і воно содержіт2000 - 4500 генів (https://ncbi.nlm.nih.gov/genemap). Нами, а також рядом інших авторів були описані TGCT пухлини, в клеткахкоторих виявлялися ампліфікації обмежених районів 12p (Suijkerbuijket al., 1994- Korn, Olde Weghuis et al., 1996 Mostert, Van dePol et al.,). Можна припустити, що якщо важливі з точки зреніяразвітія раку гени розташовуються в ампліфіціруемого районі, тоізученіе TGCT з такими ампліфікації і без них може пролітьсвет на біологічну роль екстра дози 12p в розвитку TGCT. Сетой метою ми досліджували амплификацию 12p в ряді TGCT опухолей.Данная ампліфікація була виявлена в 8% випадків, в основному вSE. Слід також зазначити, що в клітинах з амплификацией НЕ обнаружівалісьi хромосоми. Даний факт вказує на те, що існують два альтернатівнихмеханізма придбання додаткових копій 12p. які связанис біологією даних пухлин.

FISH- аналіз показав. що наявність 12p ампліфікації ассоціірованос інвазивним ростом. Показано наявність 12p ампліфікації в інвазівнихопухолях, мікро-інвазивних клітинах SE, але не в CIS. Прісутствіеданной хромосомної аберації практично у всіх SE указиваетна два можливих в цих випадках шляху розвитку - зростання або інгібірованіеапоптоза. Остання воможность підтверджена за допомогою ДНК-фінгерпрінтінга (Olie et al., 1996) і аналізом виживання клітин in vitro. Слід зазначити. що SE з амплификацией 12p виникають в більш раннемвозрасте. Кореляції з клінічною стадією хвороби і з результатівностьюлеченія відзначено не було. Ампліфікація 12p не має прогностіческогозначенія для NS.

Незважаючи на те, що описана досить велика серія TGCT з ампліфікаціямі12p, найменша зона перекриття ампліфікації (SHROA), осталасьв колишніх межах. Схоже, що точки розривів амплікон кластеріруютсяв певних місцях, припускаючи залученість багатьох геновв цей процес. До настоящемку моменту в зоні SHROA картірованитрі гена: SOX5, JAW1 і KRAS2. Ми припускаємо, що найбільш вероятнимкандідатом є ген KRAS2 (Olie et al., 1995). Мутації KRAS2также не мають прогностичного значення.

подальші перспективи

Багато питань до сих про не вирішені. це стосується раннього развитияи, особливо, генів залучених до процесу освіти герміногеннихопухолей. Дослідження сімей з схильністю до определенномкутіпу раку представляється досить багатообіцяючим для з`ясування молекулярнихмеханізмов. У разі TGCT генетична схильність виявленау 25-33% хворих (Nicholson and Harland 1995). Пошук генів схильності пухлинах цих хворих показав. що найбільш ймовірними местамііх локалізації є хромосоми 3, 5, 12 і 18 (Leahy et al., 1995). Безсумнівно, припущення про існування генів предрасположенностітребует проведення ширшого сімейного аналізу. якщо виявиться, що ідентифіковані гени є пухлинними супрессорами, то результати цих досліджень повинні бути співставлені з данниміLOH-аналізу (Murty et al., 1994- Peng et al., 1999).

Біологічне значення присутності екстра копій генів 12p в развітііTGCT залишається поки невідомою. У зв`язку з цим цікавими представляютсяісследованія малого числа копій 12p в CIS, і їх можливого увеліченіяв процесі інвазивного росту. Остаточне рішення етоой проблемибудет досягнуто з розвитком нових методів дослідження in vitroі створенням відповідних тварин моделей.

Література.

Atkin, NB (1973). "High chromosome numbers of seminomataand malignant teratomata of the testis: a review of data on 103tumours." Britisch Journal of Cancer 28: 275-279.

Atkin, NB, and MC Baker (1982). "Specific chromosome change, i (12p), in testicular tumours?" Lancet 8311: 1340.

Blough, RI, NA Heerema, P Albers, and RS Foster (1998). "Fluorescencein situ hybridization on nuclei from paraffin-embedded tissuein low stage pure embryonal carcinoma of the testis." J Urol159: 240-244.

Blough, RI, TA Smolarek, TM Ulbright, and NA Heerema (1997)."Bicolor fluorescence in situ hyrbridization on nuclei fromformalin-fixed, paraffin-embedded testicular germ cell tumors: comparison with standard metaphase analysis." Cancer GenetCytogenet 94: 79-84.

Bokemeyer, C, and HJ Schmoll (1995). "Treatment of testicularcancer and the development of secondary malignancies." Journalof Clinical.Oncology 13: 283-292.

Burke, AP, and FK Mostofi (1988). "Intratubular malignantgerm cells in testicular biopties: clinical course and identificationby staining for placental alkaline phosphatase." Modern Pathology1: 475-479.

Burke, AP, and FK Mostofi (1993). "Spermatocytic seminoma.A clinicopathologic study of 79 cases." Journal of UrologicPathology 1: 21-32.

Bussey, KJ, HJ Lawce, SB Olson, DC Arthur, DK Kalousek, M Krailo, R Giller, S Heifetz, R Womer, and RE Magenis (1999). "Chromosomeabnormalities of eighty-one pediatric germ cell tumors: sex-, age-, site-, and histopathology-related differences - a Children`sCancer Group study." Genes Chromosom & Cancer 25: 134-46.

Castedo, SM, B De Jong, JW Oosterhuis, R Seruca, VJ Idenburg, A Dam, G te Meerman, HS Koops, and DT Sleijfer (1989). "Chromosomalchanges in human primary testicular nonseminomatous germ celltumors." Cancer Res. 49: 5696-5701.

Cummings, OW, TM Ulbright, JN Eble, and LM Roth (1994). "Spermatocyticseminoma: an immunohistochemical study." Hum Pathol 25: 54-59.

De Jong, B, JW Oosterhuis, SMMJ Castedo, A Vos, and GJ Te Meerman (1990). "Pathogenesis of adult testicular germ cell tumors: A cytogenetic model." Cancer Genet Cytogenet 48: 143-167.

Dekker, I, T Rozeboom, J Delemarre, A Dam, and JW Oosterhuis (1992). "Placental-like alkaline phosphatase and DNA flowcytometry in spermatocytic seminoma." Cancer 69: 993-996.

Dieckmann, KP, and V Loy (1993). "Testicular intraepithelialneoplasia: The precursor of testicular germ cell tumors."Onkologie. 16: 61-68.

Dmitrovsky, E, GJ Bosl, and RSK Chaganti (1990). "Clinicaland genetic features of human germ cell cancer." Cancer Surv.9: 369-389.

Eble, JN (1994). "Spermatocytic seminoma." Hum Pathol25: 1035-1042.

el-Naggar, AK, JY Ro, D McLemore, AG Ayala, and JG Batsakis (1992)."DNA ploidy in testicular germ cell neoplasms. Histogeneticand clinical implications." Am J Surg Pathol 16: 611-8.

Fossa, SD, JM Nesland, EO Pettersen, O Amellem, H Waehre, andK Heimdal (1991). "DNA ploidy in primary testicular cancer."Br J Cancer 64: 948-952.

Geurts van Kessel, A, E Van Drunen, B De Jong, JW Oosterhuis, A Langeveld, and MP Mulder (1989). "Chromosome 12q heterozygosityis retained in i (12p) -positive testicular germ cell tumor cells."Cancer Genet Cytogenet 40: 129-134.

Giwercman, A, H Von der Maase, and NE Skakkeb? K (1993). "Epidemiologicaland clinical aspects of carcinoma in situ of the testis."European Urology 23: 104-114.

Gondos, B (1993). "Ultrastructure of developing and malignantgerm cells." European Urology 23: 68-75.

Gonzalez-Crussi, F (1982). Extragonadal teratomas. Washington, Armed Forces Institute of Pathology.

Guillou, L, A Estreicher, P Chaubert, J Hurlimann, AM Kurt, GMetthez, R Iggo, AC Gray, P Jichlinski, and J Benhattar (1996)."Germ cell tumors of the testis overexpress wild-type p53."Am J Pathol 149: 1221-1228.

Haddad, FS, PM Sorini, AA Somsin, MH Nathan, RM Dobbs, CS Berger, and AA Sandberg (1988). "Familial double testicular tumors: identical chromosome changes in seminoma and embryonal carcinomaof the same testis." J Urol 139: 748-50.

Harms, D, and U Janig (1986). "Germ cell tumours of childhood.Report of 170 cases including 59 pure and partial yolk-sac tumours."Virchows Arch Pathol Anat 409: 223-239.

Henderson, BE, L Bernstein, RK Ross, RH Depue, and HL Judd (1988)."The early in utero oestrogen and testosterone environmentof blacks and whites: potential effects on male offspring."Br J Cancer 57: 216-8.

Haupt, Y, R Maya, A Kazaz, and M Oren (1997). "Mdm2 promotesthe rapid degradation of p53." Nature 387: 296-9.

Hoffner, L, R Deka, A Chakravarti, and U Surti (1994). "Cytogeneticsand origins of pediatric germ cell tumors." Cancer GenetCytogenet 74: 54-58.

Houldsworth, J, V Reuter, GJ Bosl, and RS Chaganti (1997). "Aberrantexpression of cyclin D2 is an early event in human male germ celltumorigenesis." Cell Growth Differ 8: 293-9.

Houldsworth, J, V Reuter, GJ Bosl, and RSK Chaganti (1997). "Aberrantexpression of cyclin D2 is an early event in human male germ celltumorigenesis." Cell Growth & Developm 8: 293-299.

Jacobsen, GK (1992). "A fetal testis with intratubular germcell neoplasia (ITGCN)." Modern Pathology 5: 547-549.

Jorgensen, N, A Giwercman, J Muller, and NE Skakkeb? K (1993)."Immunohistochemical markers of carcinoma in situ of thetestis also expressed in normal infantile germ cells." Histopathol22: 373-378.

Jenderny, J, E Koester, A Meyer, O Borchers, W Grote, D Harms, and U Jaenig (1995). "Detection of chromosome aberrationsin paraffin sections of seven gonadal yolk sac tumors of childhood."Hum Genet 96: 644-650.

Jenderny, J, E Koester, O Borchers, A Meyer, W Grote, D Harms, and U Jaenig (1996). "Interphase cytogenetics on paraffinsections of paediatric extragonadal yolk sac tumours." VirchArch Int J Pathol 428: 53-57.

Kaplan, CG, FB Askin, and K Benirschke (1979). "Cytogeneticsof extragonadal tumors." Teratology 19: 261-266.

Kommoss, F, M Bibbo, and A Talerman (1990). "Nuclear deoxyribonucleicacid content (ploidy) of endodermal sinus (yolk sac) tumor."Lab Invest. 62: 223-231.

Korn, MW, DEM Olde Weghuis, RF Suijkerbuijk, U Schmidt, T Otto, S Du Manoir, A Geurts van Kessel, S Seeber, and R Becher (1996)."Detection of chromosomal DNA gains and losses in testiculargerm cell tumors by comparative genomic hybridization." GenesChromosom & Cancer 17: 78-87.

Kraggerud, SM, A Berner, M Bryne, EO Pettersen, and SD Fossa (1999). "Spermatocytic seminoma as compared to classicalseminoma: an immunohistochemical and DNA flow cytometric study."Apmis 107: 297-302.

Lane, DP, and PA Hall (1997). "MDM2 - arbiter of p53`s destruction."Trends Biochem Sci 22: 372-4.

Leahy, MG, S Tonks, JH Moses, AR Brett, R Huddart, D Forman, RTD Oliver, DT Bishop, and JG Bodmer (1995). "Candidate regionsfor a testicular cancer susceptibility gene." Hum Mol Genet4: 1551-1555.

Looijenga, LHJ, RA Olie, I Van der Gaag, FJ van Sluijs, J Matoska, J Ploem-Zaaijer, C Knepfle, and JW Oosterhuis (1994). "Seminomasof the canine testis- counterpart of spermatocytic seminoma ofmen?" Lab Invest 71: 490-496.

Looijenga, LHJ, Oosterhuis J.W. (1999). "Pathogenesis oftesticular germ cell tumors." Rev of Reproduction 4: 90-100.

Lothe, RA, P Peltomaeki, N Tommerup, SD Fossa, AE Stenwig, ALBorresen, and JM Nesland (1995). "Molecular genetic changesin human male germ cell tumors." Lab Invest 73: 606-614.

Manivel, JC, J Jessurun, MR Wick, and LP Dehner (1987). "Placentalalkaline phosphatase immunoreactivity in testicular germ-cellneoplasms." Am J Surg Pathol 11 (1): 21-29.

Manova, K, and R Bachvarova (1991). "Expression of c-kitencoded at the W locus of mice in developing embryonic germ cellsand presumptive melanoblast." Developmental Biology 146: 312-324.

Masson, P (1946). "Etude sur le seminome." Rev CancerBiol 5: 361-387.

Mathew, S, VVVS Murty, GJ Bosl, and RSK Chaganti (1994). "Lossof heterozygosity identifies multiple sites of allelic deletionson chromosome 1 in human male germ cell tumors." Cancer Researchs54: 6265-6269.

Mostofi FK, Sesterhenn IA, Sobin LH. Histological typing of testistumours, second edition, Springer, Berlin, 1998.

Midgley, CA, and DP Lane (1997). "p53 protein stabilityin tumour cells is not determined by mutation but is dependenton Mdm2 binding." Oncogene 15: 1179-89.

Mostert, MMC, M Van de Pol, D Olde Weghuis, RF Suijkerbuijk, A Geurts van Kessel, J Van Echten-Arends, JW Oosterhuis, and LHJLooijenga (1996). "Comparative genomic hybridization of germcell tumors of the adult testis- confirmation of karyotypic findingsand identification of a 12p-amplicon." Cancer Genet Cytogenet89: 146-152.

Mukherjee, AB, VVVS Murty, E Rodriquez, VE Reuter, GJ Bosl, andRSK Chaganti (1991). "Detection and analysis of origin ofi (12p), a diagnostic marker of human male germ cell tumors byfluorescent in situ hybridization." Genes Chromosom Cancer3: 300-307.

Muller, J, NE Skakkebaek, and MC Parkinson (1987). "Thespermatocytic seminoma: views on pathogenesis." Int J Androl10: 147-56.

Murty, VVVS, GJ Bosl, J Houldsworth, M Meyers, AB Mukherjee, V Reuter, and RSK Chaganti (1994). "Allelic loss and somaticdifferentiation in human male germ cell tumors." Oncogene9: 2245-2251.

Murty, VVVS, and RSK Chaganti (1998). "A genetic perspectiveof male germ cell tumors." Semin Oncol 25: 133-144.

Murty, VVVS, J Houldsworth, S Baldwin, V Reuter, W Hunziker, P Besmer, G Bosl, and RSK Chaganti (1992). "Allelic deletionsin the long arm of chromosome 12 identify sites of candidate tumorsuppressor genes in male germ cell tumors." Proc Natl AcadSci USA 89: 11006-11010.

Murty, VVVS, RG Li, J Houldsworth, DL Bronson, VE Reuter, GJBosl, and RSK Chaganti (1994). "Frequent allelic deletionsand loss of expression characterize the DCC gene in male germcell tumors." Oncogene 9: 3227-3231.

Murty, VVVS, RG Li, S Mathew, VE Reuter, DL Bronson, GJ Bosl, and RSK Chaganti (1994). "Replication error-type geneticinstability at 1q42-43 in human male germ cell tumors." CancerResearchs 54: 3983-3985.

Nicholson, PW, and SJ Harland (1995). "Inheritance and testicularcancer." Britisch Journal of Cancer 71: 421-426.

Nowell, PC (1976). "The clonal evolution of tumor cell populations."Science 194: 23-28.

Nowell, PC (1986). "Mechanisms of tumor progression."Cancer Res. 46: 2203-2207.

Olie, RA, AWM Boersman, MC Dekker, K Nooter, LHJ Looijenga, andJW Oosterhuis (1996). "Apoptosis of human seminoma cellsupon disruption of their micro-environment." Brit J Cancer73: 1031-1036.

Olie, RA, LHJ Looijenga, L Boerrigter, B Top, S Rodenhuis, MPMulder, and JW Oosterhuis (1995). "N- and KRAS mutationsin human testicular germ cell tumors: incidence and possible biologicalimplications." Genes Chromosom & Cancer 12: 110-116.

Oliver, RTD (1987). "HLA phenotype and clinicopathologicalbehaviour of germ cell tumours: possible evidence for clonal evolutionfrom seminomas to nonseminomas." Int J Androl 10: 85-93.

Oosterhuis, JW, SM Castedo, B de Jong, CJ Cornelisse, A Dam, DT Sleijfer, and H Schraffordt Koops (1989). "Ploidy of primarygerm cell tumors of the testis. Pathogenetic and clinical relevance."Lab Invest 60: 14-21.

Oosterhuis, JW, SMMJ Castedo, B De Jong, CJ Cornelisse, A Dam, DT Sleijfer, and H Schraffordt Koops (1989). "Ploidy of primarygerm cell tumors of the testis. Pathogenetic and clinical relevance."Lab Invest 60: 14-20.

Oosterhuis, JW, SMMJ Castedo, B De Jong, R Seruca, J Buist, HSchraffordt Koops, and JB Leeuw (1988). "Karyotyping andDNA flow cytometry of an orchidoblastoma." Cancer Genet Cytogenet36: 7-11.

Oosterhuis, JW, B De Jong, E Dmitrovsky, and LHJ Looijenga (1997) .Testicular Germ Cell Tumors. Molecular Biology and Genetics. Principlesand Practice of Genitourinary Oncology. D. Raghavan, H. I. Scher, S. A. Leibel and P. Lange. Philadelphia, Lippincott-Raven Publishers: 631-642.

Oosterhuis, JW, RJ Van Berlo, B De Jong, A Dam, J Buist, RYJTamminga, and RP Zwierstra (1993). "Sacral teratoma withlate recurrence of yolk sac tumor: human counterpart of embryo-or yolk sac-derived teratoma?" J Urol Pathol 1: 257-267.

Ottesen, AM, M Kirchhoff, E Rajpert De-Meyts, J Maahr, T Gerdes, H Rose, C Lundsteen, P Meidahl Petersen, J Philip, and NE Skakkeb? K (1997). "Detection of chromosomal aberrations in seminomatousgerm cell tumours using comparative genomic hybridization."Genes Chromosom & Cancer 20: 412-418.

Parkinson, MC, and P Ramani (1993). "Intratubular germ cellneoplasia in an infantile testis." Histopathology 23:99.

Peng, HQ, L Liu, PE Goss, D Bailey, and D Hogg (1999). "Chromosomaldeletions occur in restricted regions of 5q in testicular germcell cancer." Oncogene 18: 3277-83.

Perlman, EJ, B Cushing, E Hawkins, and CA Griffin (1994). "Cytogeneticanalysis of childhood endodermal sinus tumors: a Pediatric OncologyGroup study." Pediatr Pathol 14: 695-708.

Perlman, EJ, MB Valentine, CA Griffin, and AT Look (1996). "Deletionof 1p36 in childhood endodermal sinus tumors by two-color fluoresencein situ hybridization: a pediatric oncology group study."Genes Chromosom & Cancer 16: 15-20.

Prives, C (1998). "Signaling to p53: breaking the MDM2-p53circuit." Cell 95: 5-8.

Rajpert-De Meyts, E, and NE Skakkeb? K (1994). "Expressionof the c-kit protein product in carcinoma-in-situ and invasivetesticular germ cell tumours." Int J Androl 17: 85-92.

Rodriquez, E, S Mathew, AB Mukherjee, VE Reuter, GJ Bosl, andRSK Chaganti (1992). "Analysis of chromosome 12 aneuploidyin interphase cells from male germ cell tumors by fluorescencein situ hybridization." Genes Chromosom Cancer 5: 21-29.

Romanenko, AM, and YV Persidskii (1983). "Ultrastructureand histogenesis of spermatocytic seminoma." Voprosi Onkologii19: 61-66.

Rosai, J, K Khodadoust, and I Silber (1969). "Spermatocyticseminoma." Cancer 24: 103-116.

Rosenberg, C, T Bakker Schut, MC Mostert, HJ Tanke, AK Raap, JW Oosterhuis, and LHJ Looijenga (1999). "Chromosomal gainsand losses in testicular germ cell tumors of adolescents and adultsinvestigated by a modified CGH approach." Lab Invest 79: 1447-1451.

Rosenberg, C, MC Mostert, T Bakker Schut, M Van de Pol, J VanEchten-Arends, B De Jong, T Raap, H Tanke, JW Oosterhuis, andLHJ Looijenga (1998). "Chromosomal constitution of humanspermatocytic seminomas: comparative genomic hybridization supporedby conventional and interphase cytogenetics." Genes Chromosom& Cancer 23: 286-291.

Samaniego, F, E Rodriguez, J Houldsworth, VV Murty, M Ladanyi, KP Lele, QG Chen, E Dmitrovsky, NL Geller, V Reuter, and et al., (1990). "Cytogenetic and molecular analysis of human malegerm cell tumors: chromosome 12 abnormalities and gene amplification."Genes Chromosom Cancer 1: 289-300.

Schenkman, NS, IA Sesterhenn, L Washington, YA Tong, CM Weghorst, GS Buzard, S Srivastava, and JW Moul (1995). "Increased p53protein does not correlate to p53 gene mutations in microdissectedhuman testicular germ cell tumors." J Urol 154: 617-621.

Schmidt, B, R Ackermann, M Hartmann, and T Strohmeyer (1997)."Alterations of the metastasis suppressor gene nm23 and theproto-oncogene c-myc in human testicular germ cell tumors."J Urol 158: 2000-2005.

Scully, RE (1979). Atlas of tumor Pathology. Washington, DC, Armed Forces Institute of Pathology.

Sesterhenn, IA (1985). The role of intratubular malignant germcells in the histogenesis of germ cell tumors. Proceedings ofthe 2nd germ cell tumor conference. W. G. Jones, A. Milford Wardand C. K. Anderson. Leeds: 25-35.

Shimogaki, H, S Kitazawa, S Maeda, and S Kamidono (1993). "Variableexpression of hst-1, int-1, and parathyroid hormone-related proteinin different histolofical types of human testicular germ celltumors." Cancer Journal 6 (2): 81-86.

Shuin, T, H Misaki, Y Kuboto, M Yao, and M Hosaka (1994). "Differentialexpression of protooncogenes in human germ cell tumors of thetestis." Cancer 73: 1721-1727.

Siebert, R, and K Weber-Matthiesen (1997). "Fluorescencein situ hybridization as a diagnostic tool in malignant lymphomas."Histochem Cell Biol 108: 391-402.

Silver, SA, JM Wiley, and EJ Perlman (1994). "DNA ploidyanalysis of pediatric germ cell tumors." Mod Pathol 7: 951-956.

Sinke, RJ, RF Suijkerbuijk, B De Jong, JW Oosterhuis, and A Geurtsvan Kessel (1993). "Uniparental origin of i (12p) in humangerm cell tumors." Genes Chromosom Cancer 6: 161-165.

Skakkebaek, NE, JG Berthelsen, A Giwercman, and J Muller (1987)."Carcinoma-in-situ of the testis: possible origin from gonocytesand precursor of all types of germ cell tumours except spermatocytoma."Int J Androl 10: 19-28.

Stock, C, IM Ambros, T Lion, OA Haas, A Zoubek, H Gadner, andPF Ambros (1994). "Detection of numerical and structuralchromosome abnormalities in pediatric germ cell tumors by meansof interphase cytogenetics." Genes Chromosom & Cancer11: 40-50.

Stock, C, IM Ambros, S Sthehl, A Zubek, FM Fink, H Gadner, andPF Ambros (1995). "Cytogenetic aspects of pediatric germcell tumors." Klin Padiatr 207: 235-241.

Strohmeyer, T, D Reese, M Press, R Ackermann, M Hartmann, andD Slamon (1995). "Expression of the c-kit proto-oncogeneand its ligand stem cell factor (SCF) in normal and malignanthuman testicular tissue." Journal of Urology 153: 511-515.

Strohmeyer, T, S Peter, M Hartmann, S Munemitsu, R Ackermann, A Ullrich, and DJ Slamon (1991). "Expression of the hst-1and c-kit protooncogenes in human testicular germ cell tumors."Cancer Research 51: 1811-1816.

Suijkerbuijk, RF, RJ Sinke, AM Meloni, JM Parrington, J van Echten, B De Jong, JW Oosterhuis, AA Sandberg, and A Geurts van Kessel (1993). "Overrepresentation of chromosome 12p sequences andkaryotypic evolution in i (12p) -negative testicular germ-cell tumorsrevealed by fluorescence in situ hybridization." Cancer GenetCytogenet 70: 85-93.

Suijkerbuijk, RF, RJ Sinke, DEM Olde Weghuis, L Roque, A Forus, F Stellink, A Siepman, C Van de Kaa, J Soares, and A Geurts vanKessel (1994). "Amplification of chromosome subregion 12p11.2-p12.1in a metastatis of an i (12p) -negative seminoma: relationship totumor progression?" Cancer Genet Cytogenet 78: 145-152.

Summersgill, B, H Goker, S Wber-Hall, R Huddart, A Horwich, andJ Shipley (1998). "Molecular cytogenetic analysis of adulttesticular germ cell tumours and identification of regions ofconsensus copy number change." Brit J Cancer 77: 305-313.

Takahashi, H (1993). "Cytometric analysis of testicularseminoma and spermatocytic seminoma." Acta Pathol Japon 43: 121-129.

Talerman, A (1980). "Spermatocytic seminoma." Cancer45: 2169-2176.

Talerman, A, YS Fu, and T Okagaki (1984). "Spermatocyticseminoma. Ultrastructural and microspectrophotometric observations."Lab Invest 51 (3): 343-349.

Van Berlo, RJ, JW Oosterhuis, E Schrijnemakers, CJF Schoots, B De Jong, and I Damjanov (1990). "Yolk-sac carcinoma developsspontaneously as a late occurrence in slow-growing teratoid tumorsproduced from transplanted 7-day mouse embryos." InternationalJournal of Cancer 45: 153-155.

Van Echten-Arends, J, JW Oosterhuis, LHJ Looijenga, A Dam, DTSleijfer, H Schraffordt Koops, and B De Jong (1995). "Cytogeneticevidence that the seminoma and nonseminoma component of mixedtesticular germ cell tumors may either be monoclonal or polyclonalin origin: report of 3 cases." Modern Pathology in press.

Van Echten-Arends, J, JW Oosterhuis, LHJ Looijenga, J Wiersma, G te Meerman, H Schraffordt Koops, DT Sleijfer, and B De Jong (1995). "No recurrent structural abnormalities in germ celltumors of the adult testis apart from i (12p)." Genes Chromosom& Cancer 14: 133-144.

Van Echten-Arends, J, JW Oosterhuis, LHJ Looijenga, J Wiersma, G te Meerman, H Schraffordt Koops, DT Sleijfer, and B De Jong (1995). "No recurrent structural abnormalities in germ celltumors of the adult testis apart from i (12p)." Genes Chromosom& Cancer 14: 133-144.

Yoshida, T, M Tsutsumi, H Sakamoto, K Miyagawa, S Teshima, TSugimura, and M Terada (1988). "Expression of the HST1 oncogenein human germ cell tumors." Biochem Biophys Res Commun 155: 1324-1329.