Онкологія-

Б.П.Копнін

Російський онкологічний науковий центр ім. Н.Н.Блохина РАМН, Москва

джерело RosOncoWeb.Ru

01 0203 04
2. Онкогени і пухлинні супресори в регуляції апоптозу

Іншою найважливішою точкою докладання активностей онкогенов і опухолевихсупрессоров є регуляція апоптозу (програмованої гібеліклеток). Апоптоз, як відомо, викликається різними сигналами: зв`язуванням з рецепторами специфічних кілерних лігандів, нехваткойфакторов зростання / виживання, ушкодженнями ДНК і руйнуваннями цитоскелета, гіпоксією і іншими несприятливими умовами (див. Огляди [49-52]). У регуляції апоптозу виділяють два основних етапи : фазу індукції (прийняття рішення) і фазу екзекуції (виконання вироку). Последняяосуществляется шляхом активації каспаз - сімейства цістеіновихпротеіназ, що розщеплюють свої субстрати по залишкам аспартатовойкіслоти. Розщеплення каспазами 3, 6, 7 (так звані "ефекторні"або "казнящий" каспаз) ряду ключових субстратів, зокрема DFF45 / ICAD - інгібітора нуклеази DFF40 / CAD (осуществляетсякаспазой 3), Ламін - ядерних цитоскелетних білків (осуществляетсякаспазой 6) і т.д., призводить до фрагментації ДНК і деструкції клітини [52]. Каспаз присутні в цитоплазмі у вигляді проензімов і актівіруютсядо повністю функціональних протеаз шляхом розщеплення проензімана велику і малу субодиниці і подальшого відщеплення від ніхN-кінцевих доменів. Потім субодиниці збираються в тетрамер сдвумя активними центрами [49,52]. Розщеплення прокаспаз могутосуществлять різні протеази, в тому числі і інші каспаз.

Передбачається, що існує щонайменше два прінціпіальноразних сигнальних шляху, що призводять до активації каспаз 3, 6, 7 [49,52] (рис. 5). Один з них ініціюється зв`язуванням спеціфіческіхкіллерних молекул (Fas-ліганд, TNFa і ін.) Зі своїми рецепторами, що викликає рекрутування адаптерних білків і прокаспаз, в частностіпрокаспази 8. Агрегація молекул прокаспази 8 достатня, чтобиініцііровать їх аутопроцессірованіе (розщеплення) і образованіеактівних форм каспаз 8 , яка, в свою чергу, процесує"казнящий" каспаз. При альтернативному механізмі расщепленіекаспаз 3, 6, 7 здійснюється каспазой 9, активація якої ініцііруетсявиходом з мітохондрій протеази AIF (Apoptosis Inducing Factor) і / або цитохрому с, стимулюючого зв`язування прокаспаз 9 з белкомApaf1 (гомолог білка CED-4 у C. elegans) і, як наслідок, образованіеагрегатов прокаспаз 9 і аутопроцессірованіе їх до активних форм.Проніцаемость мітохондріальної мембрани для AIF і цитохрому срегуліруется білками сімейства Bcl2. Це сімейство структурносходних білків включає більше двох десятків членів, в тому чіслепродукти протоонкогенов bcl2 і bcl-x, що володіють способностьюблокіровать апоптоз, і пухлинний супресор Bax, навпаки, індуцірующійапоптоз [53-55]. Передбачається, що антіапоптогенние молекулиBcl2 і Bcl-x, локалізуючись в мембранах мітохондрій, закривають канали, через які здійснюється викид цитохрому с і / або AIF. Bax, що знаходиться в нормі в певних компартментах цитоплазми, пріапоптогенних сигналах переміщається в мітохондріальні мембрани, де він, взаємодіючи з інтегральним білком зовнішньої мітохондріальноймембрани VDAC, стимулює відкриття каналу, через який секретіруетсяцітохром с. Крім того, Bax утворює гетеромерного комлекс з белкаміBcl2, Bcl-x, що, можливо, відкриває закриті до цього канали [54,55]. Інші проапоптотическими білки сімейства Bcl2 (Bak, Bad, Bid і т.д.), по-видимому, мають схожий дією [53,55].

Мал. 5. Участь онкогенов і пухлинних супресорів в регуляцііапоптоза (пояснення в тексті)

Якщо Bcl2, Bcl-x і Bax безпосередньо контролюють викид ізмітохондрій апоптогенних молекул, то ряд інших протоонкогенові пухлинних супресорів регулюють активність цих та інших белковсемейства Bcl2 (рис. 5). Одним з найбільш потужних таких регуляторовявляется пухлинний супресор р53. Активуючи у відповідь на самиеразние несприятливі впливу (пошкодження ДНК, гіпоксія, втрата контактів клітини з субстратом, перманентна нерегуліруемаястімуляція мітогенного сигналу і багато інших [13,14,56-58], p53 здійснює на транскрипционном рівні одночасно і актіваціюгена bax, і репресію гена bcl2 [57,59]. Крім того, р53 повишаетекспрессію ряду генів PIG, продукти яких викликають оксідатівнийстресс і, як наслідок, порушення проникності мітохондріальнойі ядерної мембран [60], а також трансактівірует деякі кіллерниерецептори, зокрема Fas і KILLER / DR5 [57,61 , 62]. Таким чином, активація р53 дає потужний апоптогенних сигнал, в реалізації которогозадействовани різні механізми індукції "страчують"каспаз. Важливо підкреслити, що р53-залежний апоптоз елімініруетіз організму не тільки пошкоджені клітини, але і клітини, в которихнаблюдается нерегульована стимуляція проліферації, що викликається, наприклад, конститувною активацією онкогена MYC і / або транскріпціонногофактора E2F. Стабілізація р53 при активації онкогенів пов`язаназ індукованим E2F підвищенням транскрипції гена p19ARF, продукткоторого перешкоджає Mdm2-залежною деградації р53 [13,14]. Природно, що инактивирующие мутації р53 або p19ARF, що порушують роботу етогозащітного механізму, будуть різко збільшувати ймовірність появленіяпостоянно пролиферирующих клітинних клонів, а отже, івероятность подальшого розвитку з них злоякісних пухлин.

Цікаво, що конститутивна експресія онкогенів Ras ініцііруетодновременно і апоптогенних і антіапоптогенние сигнали. Первиеобусловлени активацією сигнального шляху Ras-Raf-МАРК-E2F-p19ARF-p53 [63]. Другі пов`язані як зі здатністю одного з еффекторовRas - білка Raf - прямо фосфорилювати і инактивировать проапоптотіческійбелок Bad (член сімейства Bcl2), так і з дією іншого еффектораRas - PI3K (фосфоінозітол-3-кінази) [21,51,63,64]. Антіапоптотіческіееффекти PI3K обумовлені її здатністю активувати серин-треоніновуюпротеінкіназу PKB / Akt (вперше була ідентифікована як онкогенретровіруса AKT8, що викликає Т-клітинні лімфоми у мишей AKR), яка блокує апоптоз декількома шляхами [65] (див. Рис. 5) .По-перше, вона, як і Raf, має здатність фосфоріліроватьі инактивировать білок Bad. Крім того, супрессіруя функцію белкаDAF-16 - транскрипційного фактора сімейства Forkhead - PKB / Aktможет пригнічувати продукцію кілерних молекул, зокрема Fas-ліганда.І, нарешті, недавно виявлено, що PKB / Akt активує функціютранскріпціонних факторів сімейства Rel / NF-kB [65 ] (гомологи вірусногоонкобелка v-Rel- ампліфікація і перебудови їх генів характернидля багатьох новоутворень людини [66]), які, в свою чергу, пригнічують апоптоз декількома шляхами (рис. 5). Зокрема, онтрансактівірует ген, що кодує білок A1 / Bfl1 - член семействабелков Bcl2, інгібує викид цитохрому С і / або AIF [67]. Нарядус цим, NF-kB збільшує експресію інгібіторів апоптозу IAP1і IAP2, членів сімейства білків IAP (Inhibitors of Apoptosis), які блокують функцію каспаз 3, 6, 7, 8, 9 [66]. У зв`язку з ізложеннимстановітся зрозумілою одна із захисних функцій пухлинного супрессораPTEN (його інактивація закономірно виявляється в гліома, ракахмолочной залози і простати, а вроджені мутації ведуть до развітіюсіндрома множинних гамартом [68], табл. 2): білок PTEN, обладающійактівностямі тирозинового фосфатази, пригнічує антіапоптогенниееффекти сигналу PI3K-PKB / Akt [69].

Для неопластичних клітин характерні порушення функції і другіхопухолевих супресорів, які здійснюють позитивну регуляцію апоптоза.Так, розвиток хронічного мієлоїдного лейкозу обусловліваетсяхромосомной транслокацией t (9-22), в результаті якої образуетсяхімерний ген BCR / ABL. Така перебудова викликає одновременнодва важливих наслідки: а) різке збільшення тірозінкіназной актівностібелка Abl, що веде до стимуляції мітогенного і антіапоптотіческогосігналов, опосередковуваних Ras-регульованими сигнальними шляхами [70,71], а також збільшенням синтезу интегринов, що забезпечує лучшеепрікрепленіе до позаклітинного матриксу [72], і б) інактивацію апоптогеннихактівностей Abl [73-75], обумовлених, мабуть, його участіемв позитивної регуляції JNK (інша назва SAPK, Stress ActivatedProtein Kinase), яка має здатність пригнічувати актівностьBcl2 і, можливо, активувати р53 (рис. 5). Ряд даних указиваюттакже на те, що білок Abl може безпосередньо зв`язуватися ср53, модифікуючи його проапоптотическими функцію [57,65,75].

Результатом хромосомної транслокації t (15-17), наблюдающейсяв переважній більшості випадків гострого промієлоцитарного лейкозу, є з`єднання гена рецептора ретиноєвої кислоти (RAR-a) c геном пухлинного супрессора PML [3,12,76], продукт которогообразует в ядрі специфічні матрикс-асоційовані тельца.Предполагается, що химерний білок PML / RAR-a інактивує по домінантно-негатівномумеханізму апоптогенних функцію нормального білка PML, образуяс ним гетеродімери. Механізми індукції апоптозу при гіперекспрессііPML поки не зовсім ясні. Отримано дані про його участь в актіваціікаспаз 1, 3 і рекрутуванні білка Bax при апоптозу, індуцірованномTNF-a, интерферонами 1 і 2, активацією Fas і ушкодженнями ДНК [77,78]. Крім регуляції апоптозу PML контролює також розмноження, ймовірно, диференціювання мієлоїдних попередників. Так, показано, що трансактіваціі p21WAF1 / CIP1, відповідальна за остановкуклеточного циклу під впливом ретиноєвої кислоти, опосредуетсяіменно PML [79]. Таким чином, експресія химерного білка PML / RAR-a, що викликає інактивацію нормальної функції білка PML, як і перестройкаBCR / ABL, веде одночасно і до змін регуляції клеточногоцікла, і до часткового блокування індукції апоптозу (следуетзаметіть, що на відміну від BCR / ABL перебудова PML / RAR-a визиваеттакже і блок діфференціровкі- см. розділ 8). В результаті многонаправленногохарактера дії гібридних молекул з`являються клітини з повишеннимпроліфератівним потенціалом і одночасно зі стійкістю до негатівнимрегуляторним сигналам і / або несприятливих умов навколишньогосередовища. Передбачається, що такі зміни можуть бути вже достаточнимідля розвитку принаймні деяких форм гемобластозів. І, дійсно, перебудови BCR / ABL або PML / RAR-a часто являютсяедінственнимі генетичними змінами, які виявляються соответственнопрі хронічному мієлоїдному і гострому промієлоцитарному лейкозах [3,12].

Однак для розвитку злоякісних форм солідних пухлин (раків, сарком і ін.), Безумовно, потрібні й інші зміни, в первуюочередь зумовлюють порушення взаємодії клітин з своімісоседямі і позаклітинним матриксом, і, зокрема, втрату імізавісімості від субстрату і контактного гальмування розмноження-підвищену локомоторную активність, відповідальну за інвазію вокружающіе тканини і др здатність неопластичних клітин стімуліроватьпрорастаніе судин (неоангіогенез) в тканини пухлини для обеспеченіяее харчування і т.д. У зв`язку з цим не дивно, що в клеткахсолідних пухлин число виявлених мутацій і інших генетіческіхізмененій, як правило, значно вище, ніж в клітинах лейкозов.Чісло генетичних перебудов нерідко досягає в них несколькіхдесятков. Ясно, що виходячи зі звичайного темпу мутірованія, характерногодля нормальних клітин, не можна пояснити появи в одній клеткетакого кількості генетичних порушень. Тому, перш чемперейті до аналізу ролі протоонкогенов і пухлинних супрессоровв регуляції морфогенетичних реакцій клітини і неоангіогенезу, розглянемо механізми виникнення генетичної нестабільності- ще одного найважливішого ознаки неопластической клітини.

3. Протоонкогени і пухлинні супресори в контролі генетіческойстабільності

Спостерігається в неопластических клітинах придушення індукції апоптозаповишает життєздатність клітин, які зазнали ДНК-повреждающімвоздействіям, і, таким чином, саме по собі вже збільшує вероятностьсохраненія виникли генетичних порушень. Однак в клітці существуюті інші, більш спеціалізовані системи контролю целостностігенома, порушення роботи яких також характерні для опухолевихклеток.

Системи контролю цілісності геному умовно можна розділити надвоє групи: 1) репараційні системи, що виявляють і ісправляющіеошібкі, які призводять до змін послідовності нуклеотідовв ДНК, і 2) системи контролю клітинного циклу, предотвращающіедальнейшее розмноження клітин, в яких вже відбулися або могутпроізойті порушення структури або числа хромосом .

Зміни систем репарації характерні, по-видимому, для относітельнонебольшой частини новоутворень. Однак при розвитку некоторихформ пухлин вони можуть грати основну роль. Так, врожденниедефекти генів, продукти яких відповідальні за ексцизійної репараціюДНК, викликають пігментну ксеродерму - синдром, характерізующійсяразвітіем множинних пухлин шкіри в місцях, подвергающіхсясолнечному опроміненню [80]. Цікаво, що, незважаючи на участіеексцізіонной репарації у виправленні дефектів, викликані не толькоУФ-опроміненням, а й самими різними мутагенами / канцерогенами [81,82], частота виникнення інших форм пухлин при пігментного ксеродермепочті не збільшується. При цьому у трансгенних мишей з аналогічнимідефектамі системи ексцизійної репарації відзначається повишеніечастоти індукції хімічними канцерогенами пухлин внутренніхорганов [82]. Переважне виникнення у пацієнтів з пігментнойксеродермой пухлин шкіри може вказувати на незначну рольхіміческіх факторів, що забруднюють навколишнє середовище, в развітііновообразованій у людини [83].

Вроджені вади інший репарационной системи, ісправляющейошібкі реплікації ДНК, які призводять до утворення неспареннихоснованій ("mismatch repair"), Викликають синдром Лінча.Главной рисою цього синдрому є розвиток пухлин толстогокішечніка (так званий "спадковий неполіпозний колоректальнийрак") І / або пухлин яєчника [83-86]. (Переважне вознікновеніеіменно пухлин кишечника при дефектах цієї системи репарації, можливо, пов`язано з високим проліферативних потенціалом клетокна дні кишкових крипт, що, природно, веде і до більш частомупоявленію помилок реплікації.) Ідентифіковано чотири гени - MSH2, MLH1, PMS1 і PMS2, инактивирующие мутації в яких призводять доцього станом [84-86]. Маркером інактивації будь-якого з цих геновявляется легко виявляється нестабільність мікросателітних последовательностейДНК [83,87]. Порушення в системі репарації неспарених основанійхарактерни і для деяких форм спорадичних (неспадкових) пухлин: вони виявляються в 13-15% пухлин товстої кишки, рак шлунка та ендометрія, але значно рідше (lt; 2%) в другіхновообразованіях [83].

Передбачається, що порушення в системі репарації двунітевихразривов ДНК, що здійснюється шляхом гомологичной рекомбінації, також можуть призводити до розвитку певних форм пухлин. Наетом вказує той факт, що супресорні білки BRCA1 і BRCA2, гермінальних мутації яких відповідальні за спадкові формирака молочної залози і яєчників [85,86,88], мають способностьюобразовивать комплекс з білком RAD51 - гомологом бактеріальногобелка RecA, відповідальним за гомологичную рекомбінацію, а інактивація ("нокаут") Генів BRCA1 і BRCA2 призводить до різкого повишеніючувствітельності до g-опромінення [89-91]. Однак поки окончательнонеясно, чи дійсно канцерогенез при порушеннях функції BRCA1і BRCA2 обумовлений саме цими, а не якимись іншими їх актівностямі.В зокрема, слід зауважити, що репарація двунітевих разривовДНК відбувається в певні періоди клітинного циклу, остановкав яких різко збільшує ефективність процесу. Не виключено, що здатність білка BRCA1 підвищувати експресію p21WAF1 / CIP1 черезр53-залежні і р53-незалежні механізми [30,31] і, навпаки, пригнічувати трансактіваціонную здатність білка Myc [92] направленаіменно на зупинку клітинного циклу в пошкоджених клітинах.

Якщо порушення репараційних систем і пов`язана з ними "нуклеотіднаянестабільность" причетні до розвитку щодо небольшогочісла певних форм пухлин, то "хромосомная нестабільність", Що випливає з порушень нормальної регуляції клітинного циклу, характерна, по всій видимості, для переважної більшості соліднихопухолей. У клітинному циклі постулировано існування так званих"звіряльні точок" (Checkpoints), проходження которихвозможно лише в разі нормального завершення попередніх етапові відсутності поломок. Виділяють щонайменше чотири такі точки: в G1, S, G2 і "точку перевірки збірки веретена поділу"в мітозі [27,93-95].

Звіряльні точка в G1. Основна вимога до клітки, вступающейв S-фазу - интактность ДНК, так як реплікація пошкодженої ДНКпріведет до передачі генетичних аномалій потомству. Тому клітини, які зазнали мутагенну впливам, що викликають розриви ДНК (УФ-і g-опромінення, алкилирующие з`єднання і ін.), Останавліваютсяв G1 і не входять в S-фазу [95,96]. Зупинка в G1 наблюдаетсяне тільки після ДНК-пошкоджуючих впливів, але і при другіхсостояніях, в тому числі що призводять до порушень числа хромосом- при незавершеності попереднього клітинного циклу митозом (расхожденіемхромосом) [97], при неправильній сегрегації хромосом у времямітоза, що призвела до утворення мікроядер [ 98], а також при разрушеніімікротрубочек, яке згодом може викликати порушення мітозу [99]. Зупинка в G1 може бути незворотною, як це наблюдаетсяв випадку g-опромінення [100] або оборотною, припиняється з окончаніемдействія фактора, її викликав, наприклад, при восстановленіінормального пулу нуклеотидів [56,101] або при реставрації сістемимікротрубочек [98].

Звіряльні точка в S-фазі контролює правильність реплікацііДНК. Зокрема, зупинка в певний період S-фази наблюдаетсяпрі нестачі нуклеотидів в клітинах, що не зупинилися в сілукакіх-небудь причин в G1 [102].

Звіряльні точка в G2. Пошкодження ДНК і інші порушення визиваютостановку клітин не тільки в G1- і S-, але і в G2-фазі клеточногоцікла. При цьому виявляються ушкодження, пропущені при прохожденііпредидущіх звіряльні точок або отримані на наступних стадіяхклеточного циклу. Крім того, в G2-фазі детектується полнотареплікаціі ДНК і клітини, в яких ДНК недорепліцірована, що не входятв мітоз [103].

Звіряльні точка зборки веретена поділу (spindle-assembly checkpoint) .У уникнути неправильного розподілу хромосом клітини задержіваютсяв метафазі до тих пір, поки всі кінетохор НЕ будуть прікрепленик микротрубочкам. Руйнування ненатягнутих кінетохор лазернимпучком ініціює початок анафази [104], в ході якої проісходятотставаніе хромосом, що не прикріплених до веретену ділення, і образованіеіз них мікроядер. Визначальну роль в індукції зупинки в метафазеіграют зміни взаємодій асоційованих з кінетохорамібелков BUB1, BUBR1, MAD1 і MAD2 [105,106].

Виявилося, що для пухлинних клітин характерні зміни компонентовсверочних точок клітинного циклу, що є або сенсорами змін, або ефекторами, опосередкованими зупинку клітинного циклу. Так, інактивація звіряльні точки збірки веретена поділу, связаннаяс порушенням функції MAD1 або MAD2, спостерігається в деяких случаяхрака молочної залози і Т-клітинних лейкозах, викликаних вірусомHTLV-1 (MAD1 є прямою мішенню онкобелка Tax цього вірусу), а мутації генів BUB1 і BUBR1 виявляються в невеликої частини случаеврака товстого кишечника [83,105]. Однак значно більше значеніедля інактивації звіряльні точок клітинного циклу має дісфункціянекоторих пухлинних супресорів і протоонкогенов, в частностір53, pRb, Myc і Ras (рис. 6).

Мал. 6. "звіряльні точки" (Checkpoints) клеточногоцікла і участь в їх регуляції деяких пухлинних супрессорові онкогенов (пояснення в тексті)

р53 є ключовим компонентом деяких звіряльні точек.Как вже зазначалося вище (див. розділ 2) він активується в відповідьна найрізноманітніші несприятливі впливу, в тому числі і пріводящіек генетичних порушень - розриви ДНК [28,59], недолік пулануклеотідов [56], руйнування микротрубочек [98], відсутність сегрегацііхромосом в мітозі [97] або її неправильне завершення, пріведшеек утворення мікроядер [98]. При цьому сенсорами ушкоджень ДНКявляются, очевидно, ДНК-протеинкиназа і / або білок ATM (Ataxia-TeleangioectasiaMutated), що володіють здатністю, з одного боку, распознаватьсвободние кінці ДНК, а з іншого, - фосфорилювати р53 по Ser-15, перешкоджаючи тим самим його зв`язування з білком Mdm2, последующемутранспорту з ядра і деградації [14,28]. Сенсори інших вишеупомянутиханомалій і шляхи передачі при них сигналу до р53 поки неясні.

Одним із наслідків активації р53 є зміна експрессіірегуліруемих їм генів, таких як BAX, BCL2 і ін., Контролірующіхапоптоз (див. Попередній розділ) і p21WAF1, GADD45 (Growth Arrestand DNA Damage-induced), експресія яких призводить до остановкеклеточного циклу [56,57 , 59]. В результаті клітина, в якій ужепроізошлі або тільки можуть статися генетичні зміни, лібогібнет в результаті індукції апоптозу, або зупиняється вG1- або G2-, а іноді в S-фазі клітинного циклу. Вибір між двумявозможнимі реакціями клітини на активацію р53 - апоптозом і остановкойклеточного циклу - залежить від безлічі факторів: гістогенетіческоготіпа клітин (наприклад, в нормальних фібробластах, як правило, спостерігається зупинка клітинного циклу, тоді як в лімфоцітах- апоптоз), ступеня активації р53 (зі збільшенням рівня його експрессііповишается ймовірність апоптозу), рівня функціональної актівностісігнального шляху p21WAF1-pRb-E2F, відповідального за остановкув G1 (в фібробластах з інактивованих p21WAF1 або pRb наблюдаетсяапоптоз), і т.д. [56,57,59], а точка зупинки клітинного ціклаопределяется в першу чергу тим, в якій фазі клітинного цікланаходітся клітина в момент підвищення експресії р53 [107] і какімфактором викликана його активація [56]. Порушення функції р53, характерниедля більшості різних новоутворень людини, значітельноослабляют контрольні функції звіряльні точок клітинного циклани одночасно інгібують індукцію апоптозу [106,108], що нарядус деякими іншими наслідками дисфункції р53, в частностіутратой механізму, який би освіту дополнітельнихцентросом [109], різко збільшує ймовірність появи проліферірующіхклеток зі спонтанно виникли або індукованими генетіческіміаномаліямі - змінами числа хромосом [110-112], розривами ірекомбінаціямі хромосом [110,112,113] або амплификацией отдельнихгенов [112,114-116]. Важливо підкреслити, що відновлення нормальнойфункціі р53 в клітинах, її втратили, навпаки, призводить до уменьшеніютемпа виникнення генетичних порушень [111].

Дестабілізація генома спостерігається і при порушеннях функції другіхопухолевих супресорів, зокрема pRb. Однак в цьому случаечастота появи і спектр генетичних змін в делящіхсяклетках значно менше, ніж в клітинах з дисфункцією р53. Ймовірно, це пояснюється тим, що інактивація pRb послаблює тільки работусверочной точки в G1 (рис. 6), але істотно не впливає на сверочнуюточку в G2, а головне - не блокує р53-залежний апоптоз в аномальнихклетках.

Активація деяких протоонкогенов також може послаблювати работусверочних точок клітинного циклу (рис. 6) і, як наслідок, увелічіватьгенетіческую нестабільність. Так, гіперекспресія Myc позволяетпреодолеть інгібуючу дію p21WAF1 на комплекси циклин D- Cdk4 і циклін E - Cdk2, скасовуючи таким чином зупинку в G1, викликану активацією р53. Гіперфункція Ras теж може визиватьослабленіе роботи звіряльні точок в G1 і G2 і індукувати генетіческуюнестабільность, але проявлятися такі ефекти можуть тільки в клітинах, що мають ті чи інші аномалії р53-регульованих сигнальних шляхів [117].

Отже, часто зустрічаються в новоутвореннях людини ізмененіяопухолевих супресорів (інактивація р53, pRb і, возможнo, p16INK4a-p19ARF) і / або протоонкогенов (активація Myc, Ras і, можливо, інших) призводить до дисфункції звіряльні точок клітинного циклу і нестабільностігенома. Крім того, в пухлинних клітинах закономірно виявляютсяізмененія і деяких інших генів, відповідальних за поддержаніецелостності генома. Більш того, вроджені инактивирующие мутацііне тільки р53 або pRb, але і деяких з генів репараційних сістемнеізменно призводять до розвитку певних новоутворень. Етосвідетельствует про найважливішу роль генетичної нестабільності вгенезе пухлин і / або їх подальшої прогресії. Хоча повишеннаянестабільность генома, ймовірно, не є строго необхідної для онкогенеза, без неї практично неможливо виникнення водної клітці достатнього числа мутацій, що визначають злокачественнийхарактер зростання солідних пухлин. Створюючи гетерогенність клеточнихпопуляцій, генетична нестабільність постійно предоставляетматеріал для відбору все більш і більш автономних і агрессівнихклеток.