Конформенная модель імунних комплексів. Взаємодія антитіл з антигенами

Форма спектрів ЕПР IgG і їх субодиниць, спін-мічених Rlf ймовірно, по гистидинового залишкам, може бути обумовлена наступними двома причинами і їх комбінацією.
1. Спектри є результатом суперпозиції двох спектрів, які відповідають двом різним ділянкам зв`язування мітки з різним мікрооточенням.
2. Спектр ЕПР визначається здатністю кожної мітки знаходитися в двох різних мікрооточення. Таке пояснення припускає здатність Fab-фрагментів і димарів легких ланцюгів змінювати четвертинних структуру в процесі броунівського руху доменів. При цьому А-компоненти спектра ЕПР відповідають більш компактному А-кон-Формер (мітка иммобилизована), а В-компоненти відповідають менш компактному По-конформер (обертання мітки вільніше).

Перше пояснення не є задовільним, так як при взаємодії спін-міченого антитіла з антигеном відбувається не тільки збільшення іммобілізації мітки в А-стані, але і збільшення кількості мітки в цьому стані.

Описані вище експериментальні факти добре інтерпретуються за допомогою «конформерной моделі». Досить допустити, що при взаємодії активного центру з антигенною детермінантою в результаті переорієнтації та стабілізації V-доменів відбувається зсув рівноваги між А- і В-конформерами Fab-фрагментів в сторону А-кон-Формеру і збільшення його компактності.

Зазначенням на правильність конформерной моделі є зникнення А-компонент спектра ЕПР спін-мічених L-ланцюгів при їх розщепленні навпіл, т. е. у разі втрати ними здатності перебувати у вигляді А-конформера.

Раніше нами була висловлена гіпотеза, що стабілізація і переорієнтація доменів під дією антигенної детермінанти індукують зміна характеру відносного руху всіх інших доменів, що входять до складу молекули IgG (Кяйвяряйнен і ін., 1973). Це повинно приводити до зміни не тільки конформації Fab- і Fc-субодиниць, але і до зміни взаємодії між субодиницями. Ця гіпотеза в даний час знаходить підтвердження в цитованих вище роботах з використанням методу малокутового рентгенівського розсіювання і методу кругової поляризації флуоресценції.

правильність нашої інтерпретації процесів, що відбуваються з молекулою IgG при утворенні імунного комплексу з антигеном, підтверджується також роботами по вивченню кінетики цієї реакції. Досліджували інтенсивність і поляризацію флуоресценції в процесі реакції між гаптеном флуоресцеїном (Г) і гомологічним антитілом (AT) (Levison e. A., 1975) в статичному режимі і методом зупиненого потоку. При цьому виявлено, що процес йде в два етапи.

Освіта проміжного комплексу AT ... Г характеризується константою швидкості другого порядку, відбувається швидко і завершується через 0,3 сек після змішування реагентів. Процес AT ... Г-gt; АТ-Г має константу швидкості першого порядку і завершується повністю лише через 60 хв. Другий етап пояснюють повільним конформаційним зміною молекули антитіла, яке може супроводжуватися десорбцией води. Цікаво помститися, що нейтральні іони збільшують константу швидкості асоціації відповідно до низки Гоффмейстера.

У роботі по вивченню кінетики взаємодії мієломний монометра IgA (МОРС 460) з ДНФ-Ліз (Lancet, Pecht, 1976) інтерпретація результатів майже повністю збігається з даною раніше нами для IgG. Автори приходять до висновку, що молекула (МОРС 460) існуєте вигляді двох конформеров і у вільному, і у зв`язаному з гаптеном стані.

Зв`язування гаптена змінює константу рівноваги між конформерами. У згаданій вище роботі виявлено дві стадії реакції - швидка і повільна, які відповідно до нашої моделлю означають переорієнтацію і стабілізацію варіабельних доменів (перша стадія) і релаксаційний процес, що приводить до зрушення рівноваги між А і В-конформерами Fab-фрагментів в сторону компактного А -конформера (друга).