Плазматичні пухлини мишей. Роль полірібосом в біосинтезі імуноглобулінів

1. плазмоцитома значно більш гомогенні за своїм складом, відповідно і віднайдені ними білки більш гомогенні, ніж нормальні імуноглобуліни або антитіла. Слід зазначити, що уявлення про гомогенності мієломних клітин не потрібно абсолютизувати. Насправді будь-яка плазмоцитома (як і будь-який клітинний клон) являє собою сукупність клітин, що знаходяться на різних стадіях диференціювання і виконують різні функції. Мабуть, і продукти їх діяльності неоднакові.

Так, імуноглобуліни вдається виявити лише в 50% клітин плазмоцитоми Х5563 (Rifkind е. А., 1962). Антіідіотіпіческіх сироваткою до білка МОРС 315 вдається осадити не більше 50% секретується клітинами імуноглобуліну (Sirisinha, Eisen, 1971). У моноклональних компонентах макроглобуліна людини виявлені відмінності в первинній структурі Н і L-ланцюгів (Hannestad, Sletten, 1971). Нарешті, нещодавно виявлені фенотипічні зміни мієломних білків (Hausman, Rosma, 1975).

2. Незважаючи на те що відносний синтез імуноглобулінів в мієломних клітинах не перевищує такий в селезінці, і особливо в лімфовузлах імунізованих тварини (Becker е. а., 1970), трансплантуються мієломи дозволяють отримувати значно більші кількості матеріалу для аналізу (вага однієї пухлини, перевитої під шкіру миші, може досягати 1 / 3 ваги тварини, в той час як вага селезінки не перевищує 0,2 г).

3. Нарешті, в ряді випадків в клітинах плазмоцидом активність нуклеаз нижче, ніж в селезінці або лімфовузлах імунізованих тварин, а в деяких з них, мабуть, навіть міститься інгібітор РНКази, що представляє відомі переваги при фракціонуванні клітин і виділення з них полірібосом. Все це зробило плазмоцитоми основним об`єктом при вивченні механізмів синтезу і збірки поліпептидних ланцюгів імуноглобулінів.

Роль полірібосом в біосинтезі імуноглобулінів

дослідження біосинтезу імуноглобулінів почалися зі з`ясування ролі окремих субклітинних фракцій в цьому процесі. Детально історія питання була нами висвітлена раніше (Сидорова, 1974), тому зараз ми коротко зупинимося лише на основних отриманих при цьому результати.

Вже до середини 60-х років імуногістохімічними і електронно-мікроскопічними дослідженнями було показано, що в клітинах, активно продукують імуноглобуліни (в тому числі антитіла), є потужно розвинений ендоплазматичнийретикулум і містяться скупчення рибосом (до 18-25 в кожному). Наявність імуноглобулінів в мікросомах лімфовузлів імунізованих тварин і мієломних клітин підтверджувалося також дослідами за прямим фракціонування тканин (Svvenson, КегП, 1967а).

Однак виділити полірібосоми з лімфоїдних клітин і продемонструвати їх здатність до синтезу імуноглобулінів in vitro протягом досить довгого часу не вдавалося.

Серйозне вивчення механізмів синтезу імуноглобулінів стало можливим лише після того, як була розроблена техніка отримання нативних полірібосом. Основні зусилля при цьому прямували до зменшення деградації полірібосом під дією ендогенної РНК-ази.

В деяких випадках вдавалося різко знизити її вплив за рахунок надзвичайно м`яких умов гомогенізації тканини, що не викликають руйнування лізосом і вивільнення ферментів в гомогенат (Becker, Rich, 1966). Однак в більшості випадків дію РНКази намагаються загальмувати додаванням інгібіторів. До числа останніх відносяться цитоплазматические екстракти з клітин печінки або HeLa, полісульфат і сорбенти - макалоід і бентоніт (див. Сидорова, 1974). В останні роки в якості інгібітора РНКаз все частіше використовують гепарин (Schechter, 1974a, b).

оптимальні результати досягаються при поєднанні м`яких умов руйнування тканин з додаванням інгібіторів і максимально швидкому проведенні фракціонування гомогенату при 0 ° С.