Вивчення комплексу генів тканинної сумісності. Виявлення мутацій головного комплексу генів

Оскільки головний комплекс - Це комплекс багатьох генів, які можуть контролювати різні, хоча і подібні, функції, то необхідно виокремити вплив кожного гена. Іншими словами, потрібно створити пару коізогенних ліній, які розрізнялися б не по всьому головному комплексу або навіть окремої його області, а тільки по одному гену, наприклад H-2D. Тоді можна буде аналізувати дію цього гена, участь його продукту в імунологічних реакціях.

Досягти такої ізогенна шляхом генетичної рекомбінації практично неможливо, оскільки немає способу показати, що кросинговер пройшов на кордоні між двома генами і відділив саме той з них, який нам потрібен. Крім того, як уже згадувалося, що зустрічаються в природі аллели одного гена (наприклад, H-2D) можуть відрізнятися за кількома амінокислотним замін.

Отже, ці алельних відмінності не можна приписати одному мутаційному події, навпаки, вони - кінцевий результат декількох послідовних мутацій. Цілком можливо, що деякі з цих мутацій могли надавати протилежні впливу на властивості і функцію кінцевого продукту цього гена і піддавалися дії природного відбору. Тому для вивчення функції продукту гена, контролюючого серологічно визначним антиген, найкраще використовувати мутантні по комплексу Н-2 лінії мишей, які задовольняють всім викладеним тут вимогам.

для виявлення мутантних по Н-2-комплексу мишей спеціальними методами шукають мутантів серед великого числа нормальних мишей. До сих пір пошуки проводили тільки одним методом: шляхом масових пересадок шкіри мишей однієї инбредной лінії (Єгоров, Бландова, 1968) або гібридів F, між двома інбредних (Bailey, Kohn, 1965) або конгеннимі лініями (Єгоров, 1967). Згідно генетичним законам трансплантації, в нормі всі такі трансплантати повинні пріжіваться- відторгнення трансплантатів свідчить про носійство мутації тканинної сумісності (Н-мутації) донором або реципієнтом.

Після виявлення Н-мутації її переводять в гомозиготний стан і визначають її приналежність до Н-2. Якщо використовуються гібриди F4 двох різних інбредних ліній, то мутацію необхідно перевести на конгенную основу однієї з ліній шляхом повторних зворотних схрещувань, на що йде кілька років роботи. Тільки після цього можна встановити локус, в якому відбулася мутація. Так, мутант Hzl був виділений в 1965 р (Bailey, Kohn, 1965), але тільки в 1971 р (Bailey е. А., 1971) було показано, що це - мутація гена, що входить в комплекс Н-2.

В даний час виявлено близько 20 мутантів по Н-2. Отримані генетичні та біохімічні дані показують, що мутантні гаплотипи Н-2 відрізняються від вихідних дуже невеликою ділянкою генетичного матеріалу, швидше за все, в межах одного цистрона.