Труднощі і помилки при вимірюванні деяких гормонів

Вимірювання рівня ХГ в сироватці сечі - найпоширеніші лабораторні дослідження в гінекологічній ендокринології. Існують иммунохимические тест-системи, що вимірюють концентрацію тільки інтактні молекул ХГ (димарів, що складаються з - -субодиниць), концентрацію тільки вільних -субодиниць і концентрацію всіх -субодиниць (як вільні? Так і входять до складу димарів). Третина різновид тест-систем дає найбільш інформативні результати і застосовується найчастіше. Навіть в найкращих тест-системах в 1% випадків спостерігаєте перехресна реакція з ЛГ, тому результати вимірювань рівня -субодиниці ХГ в області низьких концентрацій (lt; 5 МО / л) можуть бути недостовірними Фолликулостимулирующий і лютеїнізуючого гормону. Для вимірювання рівні ФСГ і ЛГ розроблено безліч тест систем на основі РІА, імунохемілюмінесцентного аналізу, ІФА. Всі ці тест-системи мають високу чутливість і специфічність, але відкалібровані вони за різними еталонним стандартним зразкам. У деяких еталонних зразках біологічна активність ФСГ і ЛГ не відповідає їх иммунореактивности. Якщо під час калібрування тест-системи був використаний подібний еталонний зразок, то ця тест-система буде давати хибнопозитивні або помилково негативні результати.

Пролактин. Тест-системи для вимірювання пролактину теж мають дуже високу чутливість і специфічність. В інструкціях до тест-систем в більшості випадків наводяться діапазони нормальних концентрацій пролактину для звичайного часу вимірювання (між 8:00 і 11:00). Тим часом рівень пролактину в сироватці сильно коливається протягом доби. Зокрема, в ранні ранкові години спостерігається пік секреції пролактину. Якщо пролактин вимірюють в ці години, то його рівень при порівнянні з нормою, зазначеної в інструкції, може бути невірно розцінений як підвищений. Протягом багатьох років вважалося, що пальпація молочних залоз, а також прийом позбав, багатою тірозіном, триптофан або аргініном, стимулюють секрецію пролактину і імітують гіперпролактинемію. Недавнє дослідження, проведене нашою групою, спростовує ці уявлення.

Тиреоидина гормони і ТТГ. Методи вимірювання цих гормонів налагоджені найкраще. Широко доступні високочутливі тест-системи для визначення загальних і вільних Т3 і Т4. Розроблено тест-системи для вимірювання ТТГ з надвисокою чутливістю - в фемтомолярном діапазоні. Такий арсенал тест-систем дозволяє з високою точністю діагностувати як гіпотиреоз, так і тиреотоксикоз.

Відео: Що робити, якщо при кожному запуску Word запускається настройка Office

Естрадіол. Цей гормон присутній в сироватці головним чином у зв`язаному вигляді, а саме в складі комплексів з альбуміном і ГЗСГ, а також у складі глюкуронідних кон`югатів і сульфатом. Частка вільного естрадіолу не перевищує 3% від його загального вмісту в сироватці. Тільки вільний естрадіол зв`язується з внутрішньоклітинними естрогенових рецепторів і таким шляхом регулює безліч процесів в репродуктивній системі, зокрема секрецію ЛГ і ФСГ в гіпофізі і розвиток фолікулів в яєчниках. Тому для оцінки репродуктивної функції найбільш важливі вимірювання рівня вільного естрадіолу. Концентрації вільного естрадіолу в сироватці невеликі: у жінок дітородного віку вони коливаються в залежності від фази менструального циклу, в межах від 25 до 450 нг / л, у дівчаток на різних стадіях статевого дозрівання - від 3 до 45 нг / мл, а в постменопаузі зазвичай нижче 30 нг / мл. Тому при діагностиці порушень статевого розвитку у дівчаток і безпліддя у жінок, а також при обстеженні жінок в постменопаузі треба мати на увазі, що иммунохимические тест-системи для вимірювання естрадіолу, що використовуються в державних і приватних клініко-діагностичних лабораторіях, можуть мати недостатню чутливість. Крім того, результати вимірювань естрадіолу в однієї і тієї ж пацієнтки в різних лабораторіях можуть сильно відрізнятися.

Навіть в самих чутливих і специфічних иммунохимических тест-системах для вимірювання вільного естрадіолу в 1-2% випадків спостерігається перехресна реакція з пов`язаним естрадіолом. Ця перехресна реакція може призводити до хибнопозитивних результатів, якщо вміст зв`язаного естрадіолу підвищений (наприклад, при надмірному утворенні його кон`югатів). Найчутливіший і специфічний метод вимірювання вільного естрадіолу - тандемна мас-спектрометрії з попереднім хроматографічним відділенням пов`язаного гормону, однак цей метод складний, трудомісткий і доступний тільки спеціалізованим лабораторіям. Нещодавно були виявлені естрогенових рецепторів в зовнішніх клітинних мембранах деяких клітин. Цілком ймовірно, з такими рецепторами взаємодіє не тільки вільний, але і пов`язаний естрадіол. Тому результати вимірювань вільного естрадіолу можуть не відповідати загальній біологічної активності естрадіолу в сироватці.

Відео: простатит басейн

Інші стероїдні гормони. Все, що було сказано про складнощі вимірювань естрадіолу, відноситься і до інших стероїдних гормонів, їх попередникам і метаболитам. Наприклад, тестостерон циркулює в крові переважно у вигляді комплексів з ГЗСГ, а кортизол - у вигляді комплексів з білком транскортином. Тому в клініко-діагностичних лабораторіях використовуються иммунохимические тест-системи двох типів: для вимірювання загального вмісту тестостерону або кортизолу і для вимірювання вільних гормонів. Найбільші труднощі виникають при вимірюванні вільного тестостерону. Еталонним методом вважається мас-спектрометрії з попереднім хроматографічним розділенням вільного і пов`язаного гормону, але цей метод доступний тільки спеціалізованим лабораторіям. У широкопрофільних діагностичних лабораторіях для вимірювання вільного тестостерону до середини 2000-х років використовувався переважно метод РІА з попередньої екстракцією вільного тестостерону з сироватки за допомогою органічних розчинників. Результати РІА були дуже близькі до результатів мас-спектрометричного методу. Однак РІА був витіснений з широкою лабораторної практики Імунохемілюмінесцентні аналізом і І ФА. Ці методи нерідко дають хибнопозитивні результати, особливо при вимірах в пробах з низькими концентраціями тестостерону. Цю обставину треба враховувати при оцінці рівнів вільного тестостерону у жінок, у хлопчиків в препубертатном і ранньому пубертатному періоді і у чоловіків з підозрою на дисфункцію клітин Лейдіга. Відзначимо, що при розробці та застосуванні методів иммунохимического аналізу стероїдних гормонів виникають і інші труднощі. Наприклад, при отриманні первинних антитіл до стероїдів для підвищення їх імуногенності доводиться кон`югованих їх з різними носіями, такими як метильований альбумін. При створенні тест-систем на основі РІА стероїди мітять ³Н або ¹⁴С (оскільки їх не можна помітити ¹²⁵I). Тому лабораторія, яка застосовує такі тест-системи, повинна мати сцинтіляційний лічильник -частинок.