Тромбиновой тест

Облік часу коагуляції після додавання в БТП тромбіну дозволяє отримати інформацію про ефективність перетворення фібриногену в фібрин.

принцип методу

Принцип методу заснований на оцінці швидкості освіти фібрину після додавання в БТП тромбіну. Тромбін, отщепляя Фібринопептиди А і В від молекули фібриногену, утворює фібрин, тому тест дозволяє оцінити потенціал кінцевого етапу коагуляції.

Реактиви та обладнання

• Тромбиновой реагент.
• Коагулометр (при відсутності коагулометри - водяна баня і секундомір).

Зразки крові для дослідження Для виконання тромбинового тесту використовують БТП. Особливості підготовки зразків БТП детально розглянуті в додатку 3.

техніка виконання

У кювету коагулометри (або пробірку при мануальної техніці виконання) вносять 0,1 мл досліджуваної плазми і інкубують її. Після інкубації в кювету додають 0,1 мл тромбинового реагенту і в той же момент включають таймер коагулометри (або секундомір при мануальної техніці виконання). Коагулометр фіксує час коагуляції автоматично, а при мануальної техніці використання реєструють час появи згустку, постійно похитуючи пробірку.

Оцінка результатів дослідження

Час згортання враховують в секундах. Оскільки час згортання в нормі залежить від активності тромбіну, оцінюють час згортання не тільки досліджуваної БТП, але і контрольної нормальної плазми. У більшості випадків причиною подовження тромбінового тесту є наявність в досліджуваному зразку гепарину, тому в таких ситуаціях часто буває досить використання тромбіну, що має активність 14-17 с. При такій активності тромбіну метод демонструє вельми низьку варіацію. Однак для виявлення дісфібріногенеміі і виявлення дії інгібіторів кінцевого етапу коагуляції доцільно використовувати таку активність тромбіну, яка б обумовлювала коагуляцію нормальної плазми в діапазоні 25-35 с. У будь-якому випадку кожної лабораторії необхідно встановити свій діапазон нормальних значень.

Інтерпретація результатів дослідження

Значне подовження в тромбиновой тесті, а часто і несвертиваемость можуть бути обумовлені гепарином. Крім того, подовження тромбінового часу (ТБ) спостерігається при гіпо-, дис- і афібриногенемією, на тлі застосування прямих інгібіторів тромбіну, а також у пацієнтів з високою концентрацією ПДФ.

Іноді помірне подовження ТБ можна виявити при гепатитах. При цирозах, що супроводжуються вираженою гипофибриногенемией, нерідко виявляється істотне подовження ТБ.

причини помилок

• Недотримання температурного режиму зберігання реагентів.
• Наявність в досліджуваній крові гепарину з венозного катетера.
• Гемоліз.
• Відсутність або неефективність системи внутрішнього контролю якості.
• Використання нестабільного тромбіну.

Інші аналітичні технології

Для оцінки ТВ використовують тромбін, виділений з плазми великої рогатої худоби або з плазми людини. Істотних відмінностей з точки зору діагностики порушень гемостазу між цими реагентами немає.

Близькими за технікою виконання і діагностичним завданням є анцістроновий і батроксобіновий тести.