Аптв тест

АПТВ-тест - один з найбільш поширених лабораторних методів оцінки потенціалу коагуляционного гемостазу. Методика визначення АПТВ була розроблена в 1953 р дослідниками з університету Північної Кароліни (США).

Для виконання цієї нескладної лабораторної методики необхідний АПТВ-реагент, що містить активує і фосфоліпідний компоненти. Активує призначений для стимуляції внутрішнього механізму коагуляції шляхом активації фактора Хагемана, а фосфоліпідний компонент робить стабільними умови освіти теназного і протромбиназного комплексів.

Субстанції, що входять в АПТВ-реагент, індукують коагуляцію БТП шляхом активації внутрішнього механізму згортання, тому пролонгація АПТВ спостерігається при недостатній кількості або функціональну неповноцінність наступних коагуляційних факторів: I, II, V, VIII, IX, X, XI, XII. Крім того, результати АПТВ-тесту змінені при наявності інгібіторів, а також у пацієнтів, які застосовують антикоагулянти.

Відео: test iptv live

принцип методу

Принцип заснований на визначенні часу утворення згустку фібрину після рекальцификации суміші, що містить цитратную БТП і АПТВ-реагент. З огляду на те, що час коагуляції істотно залежить від складу АПТВ-реагенту, техніки виконання, серії та багатьох інших факторів, важливо оцінити час згортання не тільки досліджуваної БТП, але і контрольної нормальної плазми.

Відео: test adsl e risoluzione scatti iptv streaming video

Реактиви та обладнання

• АПТВ-реагент.
• Розчин кальцію хлориду (0,025 М).
• Коагулометр (при відсутності коагулометри використовуються водяна баня і секундомір).

Зразки крові для дослідження

Для визначення АПТВ використовують БТП. Особливості підготовки зразків БТП для дослідження системи гемостазу детально розглянуті в додатку 3.

техніка виконання

У кюветі коагулометри (або пробірці при мануальної техніці виконання) змішують 0,1 мл досліджуваної БТП і 0,1 мл АПТВ-реагенту. Потім инкубируют цю суміш при температурі +37 ° С протягом 3 хв. Після інкубації в кювету (або пробірку при мануальної техніці виконання) додають 0,1 мл розчину кальцію хлориду, має температуру +37 ° С, в той же момент включають таймер коагулометри (або секундомір при мануальної техніці виконання) і реєструють час коагуляції.

Відео: Iptv test

Оцінка результатів дослідження АПТВ оцінюють в секундах. Кожній лабораторії слід визначити свій (локальний) діапазон нормальних значень. У ряді ситуацій зручно використовувати індекс Ratio, який обчислюють за такою формулою:

Ratio = АПТВ (б) / АПТВ (к), де АПТВ (б) - час коагуляції в плазмі хворого, АПТВ (к) - час коагуляції в плазмі здорової людини.

У нормі індекс Ratio становить 0,85-1,25.

Для визначення АПТВ використовують реагенти, в складі яких є різні субстанції, здатні активувати фактор Хагемана (каолін, еллаговая кислота, солі кремнію і ін.). Крім того, в складі будь-якого реагенту для визначення АПТВ присутній фосфоліпідний компонент, джерело отримання якого, а також технологія його приготування у більшості виробників реагентів істотно різняться. У зв`язку з відмінностями в складі АПТВ-реагентів АПТВ-тест не є стандартизованим методом дослідження і значимо відрізняється не тільки при патології, але і в контрольних дослідженнях. Для обліку результатів тесту корисно розділити наявні на ринку АПТВ-реагенти на кілька груп по переважної чутливості до різних дефектів системи гемостазу.

Інтерпретація результатів дослідження

Незважаючи на низьку специфічність і недостатню стандартизацію, АПТВ-тест - вельми ефективний спосіб лабораторної діагностики, повсюдно використовується для скринінгового виявлення дефектів коагуляції, а також моніторингу терапії концентратами коагуляційних факторів у хворих на гемофілію.

Цей лабораторний тест широко використовують для контролю лікування нефракціонованим гепарином, оскільки час утворення згустка при такому варіанті антитромботичної терапії збільшується пропорційно концентрації гепарину в крові. Слід, однак, відзначити, що внаслідок короткого періоду напіврозпаду нефракціонованого гепарину найбільш ефективна оцінка антикоагулянтної дії цього препарату при використанні инфузомата. Чутливість до гепарину у різних АПТВ-реагентів неоднакова, тому часто спостерігається невідповідність терапевтичних дозувань вираженості пролонгації АПТВ-тесту. Високі концентрації гепарину перешкоджають коагуляції в АПТВ-тесті, тому при кардіохірургічних втручаннях, які потребують застосування великих доз зазначеного антикоагулянту, цей тест використовувати не можна.

Подовження АПТВ спостерігається при вроджених дефіцити більшості факторів згортання, аномаліях фібриногену, коагулопатії споживання, застосуванні кровозамінників, інгібітори коагуляційних факторів, хворобах печінки, АФС, лікуванні антикоагулянтами і багато іншого.

Скорочення АПТВ вельми часто обумовлено дефектами преаналітичного етапу дослідження.

причини помилок

Неправильне дозування цитрату при заборі венозної крові.

• Попадання в досліджувану кров гепарину з венозного катетера.
• Гемоліз.
• Відсутність або неефективність системи внутрішнього контролю якості.

Інші аналітичні технології

Особливості перекладу англомовного позначення АРТТ зумовили поширення у вітчизняній літературі двох однакових, по суті, найменувань: активований парціальний (АПТВ) і активований частковий тромбопластиновий час (АЧТЧ). Для оцінки внутрішнього механізму згортання також використовують каолінове і кефаліновое час коагуляції, аутокоагуляціоннийтест і ряд інших методик. Слід зазначити, що зазначені аналоги володіють значно меншою воспроизводимостью в порівнянні з АПТВ-тестом.

АПТВ суміші досліджуваної плазми з нормальною бідної тромбоцитами плазмою

Оцінка часу коагуляції суміші - це додатковий лабораторний метод дослідження системи гемостазу у пацієнтів, що мають подовження часу згортання при АПТВ-тесті, в якому лікар отримує інформацію про присутність в досліджуваній плазмі інгібіторів коагуляції.

принцип методу

Принцип методу змішування заснований на тому, що при додаванні досліджуваної плазми до нормального відбувається корекція часу згортання у хворих з дефіцитом ка-кого-небудь коагуляционного фактора за рахунок поповнення недостатності компонентом з нормальною плазми. Однак в тих випадках, коли подовження АПТВ обумовлено інгібітором (ВА або інгібітор до якого-небудь коагуляционному фактору), нормалізації часу зсідання не спостерігається, оскільки відбувається пригнічення коагуляції ингибирующими антитілами з досліджуваного зразка.

Реактиви та обладнання

• АПТВ-реагент.
• Розчин кальцію хлориду (0,025 М).
• Коагулометр (при відсутності коагулометри - водяна баня і секундомір).

Зразки крові для дослідження

Для дослідження АПТВ суміші використовують БТП хворого і нормальну БТП.

техніка виконання

У кюветі коагулометри (або пробірці при мануальної техніці виконання) змішують 0,05 мл досліджуваної плазми, 0,05 мл нормальної БТП, 0,1 мл АПТВ-реагенту і інкубують цю суміш при температурі +37 ° С протягом 3 хв. Після інкубації в кювету додають 0,1 мл розчину кальцію хлориду, має температуру +37 ° С, в той же момент включають таймер напівавтоматичного коагулометри (або секундомір при мануальної техніці виконання) і реєструють час згортання. Коагулометр фіксує час коагуляції автоматично, а при мануальної техніці використання визначають час утворення згустку, похитуючи пробірку.

Оцінка результатів дослідження

АПТВ суміші досліджуваної плазми з нормальною оцінюють в секундах. Тест змішування є обов`язковим доповненням АПТВ-тесту при виявленні значного подовження часу згортання.

Відео: [TEST] Box Android AMLOGIC S905 MXQ PRO (Android 5.1 / KODI) + Test IPTV

Для оцінки результатів цього тесту необхідно визначити АПТВ нормальної БТП. Як нормальної БТП використовують спеціальні зразки, але можна також застосовувати і зливну нормальну БТП від 3-4 практично здорових осіб за умови, що всі ці зразки мають нормальні значення.

Інтерпретація результатів дослідження

При зниженні активності коагуляційних факторів відбувається нормалізація АПТВ в тесті змішування, проте в тих випадках, коли подовження часу згортання обумовлено дією інгібіторів, нормалізації АПТВ не відбувається.

Як правило, змішування зразка плазми хворого, що має подовження АПТВ, з нормальною плазмою обумовлює укорочення часу згортання від початкового значення різного ступеня вираженості (при дефіциті коагуляційних факторів більш виражене, а при наявності інгібіторів - менш) - проте в ряді випадків після Додавання нормальної плазми спостерігається парадоксальне подовження часу коагуляції. Такий феномен зустрічається при АФС і називається кофакторним ефектом. Кофакторний ефект в АПТВ-тесті спостерігається вкрай рідко, кілька частіше цей феномен виявляють при здійсненні змішування в каоліновому тесті.

Наявність в досліджуваному зразку БТП гепарину перешкоджає корекції в АПТВ-тесті.

Інші аналітичні технології

D.A. Kaczor et al. пропонують нерівне співвідношення обсягів досліджуваної і нормальної плазми (4: 1), що, на їхню думку, більш чітко виявляє ВА з низькою активністю.

У методиках, призначених для визначення інгібіторів коагуляційних факторів, після змішування зразків використовують збільшений час інкубації: 15, 60 або 120 хв.

причини помилок

• Недостатнє центрифугування.
• Неправильне дозування цитрату при заборі венозної крові.
• Попадання в досліджувану кров гепарину з венозного катетера.
• Гемоліз.
• Для виявлення інгібіторів волчаночного типу в тестах змішування необхідно використовувати свіжу нормальну БТП, оскільки лиофильно висушені зразки нормальної плазми в ряді випадків дають неправдиву корекцію гіпокоагуляції, обумовленої ВА.