Тромбоглобуліна бета: метод визначення

Реактиви та обладнання

• Лунки мікропланшетів, покриті антитілами до -ТГ.
• Калібратор / калібратори.
• Ферментний кон`югат (кролячі або козячі антитіла, кон`юговані з пероксидазою хрону).
• Буфер для зразків.
• Промивний буфер.
• Розчин хромогену / субстрату (хромоген - тетраметилбензидин, субстрат - перекис водню).
• Стоп-реагент.
• Устаткування для виконання ELISA (вошер, рідер для планшетів і ін.).

Відео: Тимур Процька "Підсумки Бета експерименту" соціоніка

Дистриб`ютор діагностичного набору реагентів - ЗАТ «Біохіммак».

Зразки крові для дослідження

Кров беруть вранці натщесерце (не менше ніж через 8 годин після останнього прийому їжі), в спокійному стані пацієнта, тому перед венепункцію йому рекомендується відпочинок протягом 20-30 хв. Кров набирають у спеціальні пробірки зі стабілізатором CTAD (натрію цитрат, аденозин, теофілін та дипіридамол). Щоб уникнути впливу вакууму і турбулентності на зразок крові, ряд авторів рекомендують відкрити пробірку для усунення вакууму, накласти джгут лише для пошуку вени, пунктировать вену голкою, видалити перші 2 мл крові і тільки після цього зібрати необхідний обсяг крові самопливом в пробірку. Із середньої частини пробірки відбирають У3 обсягу супернатанта для повторного центрифугування в тих же умовах і отримання бестромбоцітной плазми, яка і використовується для дослідження. Всі ці заходи призначені для того, щоб уникнути активації тромбоцитів на преаналітичному етапі, а також виключити потрапляння в досліджуваний зразок уламків клітин

техніка виконання

Послідовність дій лікаря-лаборанта при визначенні рівня -ТГ повинна строго відповідати інструкції до набору реагентів. Калібратори рекомендується досліджувати в дублюючих визначеннях і використовувати нову калібровану криву для кожної серії діагностичного набору. Реагенти, що входять до складу набору, і планшет перед аналізом повинні мати кімнатну температуру.

Оцінка результатів дослідження

Концентрація -ТГ у здорових осіб не більше 80 мкг / л, або 10-50 МО / мл. У деяких лабораторіях верхня межа нормальних значень може бути іной- рекомендується сформувати контрольну групу і самостійно визначити діапазон нормальних значень.

Рівень -ТГ може також змінюватися при тромбоцитозах і тромбоцитопеніях.

Інтерпретація результатів дослідження

-ТГ - один з найбільш чутливих маркерів активації тромбоцитів, може використовуватися в оцінці тромбофіліческіх станів поряд з іншими маркерами активації згортання. Рівень -ТГ підвищується при стимуляції тромбоцитів in vivo і in vitro колаген, АДФ, імунними комплексами та іншими речовинами, здатними викликати агрегацію. Низькі значення рівня -ТГ можуть служити допоміжним діагностичним критерієм дефіциту тромбоцитарних -гранул. При тромбоцитопеніях і тромбоцитозах рівень цієї речовини слід оцінювати з урахуванням числа тромбоцитів.

причини помилок

• Недотримання температурного режиму зберігання реагентів.
• Відсутність або неефективність системи внутрішнього контролю якості.
• Недостатнє центрифугування зразків обумовлює помилкове завищення рівня (3-ТГ за рахунок наявності в зразках плазми клітин.
• Високий рівень ліпідів.
• Результати дослідження завищуються при нирковій недостатності.
• Всередині утворюється конденсат лунок (для попередження виникнення конденсату не слід розкривати пакет до тих пір, поки він не прогріється до кімнатної температури).

Інші аналітичні технології Визначення рівня -ТГ засноване на обліку взаємодії антигену і антитіла, тому для його кількісного обліку придатні і інші технології, що дозволяють виявити компоненти імунної взаємодії (фермент, радіонуклід, флуоресцентний барвник і ін.).