Медичне законодавство: права, документи, обов`язки, норми, акти.

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ`Я І НАУКИ ФЕДЕРАЦІІПРІКАЗ9 січня 1998 р N 2об затвердження інструкцій з ІММУНОСЕРОЛОГІІВ метою вдосконалення системи забезпечення іммунологіческойбезопасності переливання крові та її компонентів, профілактікіпосттрансфузіонних реакцій і осложненійПРІКАЗИВАЮ: I. Ввести в дію з 01.02.98: 1. Інструкцію попредупрежденіюнесовместімостіпріпереліваніі крові (додаток 1) .2. Інструкціюпоізготовленіюстандартнихізогемагглютінірующіх сироваток для визначення групи кровісістеми АВО (додаток 2) .3. Інструкцію по визначенню групи крові системи АВО припомощи стандартних ізогемагглютінірующіх сироваток (додаток 3) .4. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-А, анти-В Іанта-АВ діагностичних рідких для визначення групи кровісістеми АВО (антитіла моноклональні анти-А, анти-В, анти-АВ) (додаток 4) .5. Інструкцію з виготовлення стандартних сироваток іреагента антирезус (додаток 5) .6. Інструкцію з видалення з сироваток антирезус антітелдругой специфічності (додаток 6) .7. Інструкцію по визначенню резус-приналежності крові (додаток 7) .8. Інструкцію по визначенню резус-приналежності крові наплоскості без підігріву і з виготовлення стандартної сироватки іреактіва антирезус, призначених для цієї мети (додаток 8) .9. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-D діагностіческогожідкого для визначення D антигену системи резус (антітеламоноклональние анти-D) (додаток 9) .10. Інструкцію із застосування анти-D IgM моноклональногореагента для визначення резус-приналежності (Цоліклони анти-Dсупер) (додаток 10) .11. Інструкцію по дослідженню сироватки наналічіерезус-антитіл (додаток 11) .12. Інструкціюпоізготовленію рідкісних сироваток, призначених для визначення різних ізоантігенов ерітроцітовчеловека (додаток 12) .13. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-С моноклональногодля визначення антигену С системи резус на еритроцитах людини (Цоліклони анти-С супер) (додаток 13) .14. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-Е моноклональногодля визначення антигену Е системи резус на еритроцитах людини (Цоліклони анти-Е супер) (додаток 14) .15. Інструкцію по предупрежденіюпосттрансфузіоннихосложненій, обумовлених факторами Kell та c (hr `) (додаток 15) .16 Інструкцію по імунізації донорів для отримання сироватки ііммуноглобуліна антирезус (додаток 16) .17. Інструкцію з узяття і обліку крові, одержуваної від доноровмалимі дозами, для пріготовленіястандартнихерітроцітов (додаток 17) .18. Інструкцію по визначенню імунних антитіл групповойсістеми АВО (додаток 18) .19. Інструкцію з виготовлення консервованих стандартнихерітроцітов і їх застосування в изосерологической дослідженнях (додаток 19) .2. Керівникам органів управління охороною здоров`я суб`єктів Російської Федерацііобеспечітьнеукоснітельное прімененіеутвержденних інструкцій.3. Управлінню організації медичної допомоги населенню, управління охорони здоров`я матері і дитини забезпечити контроль засвоевременним впровадженням в практику і якістю проведеніяіммуносерологіческіх ісследованій.4. Вважати нечинними на території Російської Федерації: 1. Інструкцію попредупрежденіюнесовместімостіпріпереліваніі крові, затверджену наказом МОЗ України 05.12.90N 05-14 / 37-14.2. Інструкціюпоізготовленіюстандартнихізогемагглютінірующіх сироваток для визначення груп кровісістеми АВО, затверджену наказом МОЗ України 07.09.90 N 05-14 / 26.3. Інструкцію по визначенню груп крові системи АВО припомощи стандартних ізогемагглютінірующіх сироваток, утвержденнуюМінздравом СРСР 07.09.90 N 05-14 / 27.4. Інструкцію з виготовлення стандартних сироваток і реагентаантірезус, затверджену наказом МОЗ України 07.09.90 N 05-14 / 28.5. Методичні рекомендації "Видалення з сироватки антірезусантітел інший специфічності", Затверджену Міністерством охорони здоров`я СССР27.11.90 N 10-11 / 136.6. Інструкцію по визначенню резус-приналежності крові, затверджену наказом МОЗ України 07.09.90 N 05-14 / 29.7. Інструкцію по визначенню резус-приналежності крові наплоскості без підігріву і з виготовлення стандартної сироватки іреактіва антирезус, призначених для цієї мети, утвержденнуюМінздравом СРСР 06.12.90 N 05-14 / 38-14.8. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-Dдіагностіческого рідкого для визначення D антигену системи Резус (антитіла моноклональні анти-D), затверджену Міністерством охорони здоров`я СССР21.08.90.9. Інструкцію по дослідженню сивороткінаналічіерезус-антитіл, затверджену наказом МОЗ України 07.09.90 N 05-14 / 30.10. Тимчасову інструкцію з виготовлення сироваток редкіхгрупп, призначених для визначення різних ізоантігеноверітроцітов людини, затверджену наказом МОЗ України 26.03.79N 06-14 / 3.11. Методичні рекомендації "Імунізація донорів дляотримання сироватки і імуноглобуліну антирезус", УтвержденнуюМінздравом СРСР 27.11.90 N 10-11 / 138.12. Інструкцію з узяття і обліку крові, одержуваної від доноровмалимі дозами, для приготування стандартнихерітроцітов, затверджену наказом МОЗ України 14.10.76 N 06-14 / 1.13. Методичні рекомендації "Визначення імунних антітелгрупповой системи АВО", Затверджені Міністерством охорони здоров`я СРСР 27.11.90N 10-11 / 135.5. Вважати такими, що втратили чинність: 1. Інструкцію із застосування Цоліклони анти-А, анти-В Іанта-АВ діагностичних рідких для визначення груп кровічеловека системи АВО (антитіла моноклональні анти-А, анти-В, анти-АВ), затверджену Минздравмедпромом Росії 17.03.95.2. Інструкцію із застосування анти-Rhо (D) lgM моноклональногореагента для визначення резус-приналежності крові людини (Цоліклони анти-D супер), затверджену Минздравмедпромом Россіі14.07.94.3. Інструкцію попрімененіюцоліклонаанті-rh `(С) моноклонального для визначення антигену С системи Резус наерітроцітах людини (Цоліклони анти-С супер), утвержденнуюМінздравмедпромом Росії 17.03.95.4. Методичні рекомендації "Спосіб виявлення іммунниханті-А, анти-В антитіл в сироватці крові людини", УтвержденнуюМінздравом РРФСР 15.09.89.6. Контроль за виконанням цього наказу покласти назаместітеля Міністра Стародубова В.І.МіністрздравоохраненіяРоссійской ФедерацііТ.Б.ДМІТРІЕВАПріложеніе N 1УТВЕРЖДЕНОПріказ МОЗ Россііот 09.01.1998 р N 2ІНСТРУКЦІЯПО ПОПЕРЕДЖЕННЯ НЕСОВМЕСТІМОСТІПРІ ПЕРЕЛИВАННІ КРОВІI. ВВЕДЕНІЕ1. Загальні сведенія.Основним принципом попередження гемотрансфузіоннихосложненій є забезпечення сумісності крові донора іреціпіента.Прежде ніж приступити до переливання крові, лікар долженпредусмотреть, щоб кров донорів була сумісна з кровьюреціпіента.Под сумісністю розуміється сприятливе поєднання кровідонора і реципієнта. Біологічно неможливе їх поєднання поантігенам і антитіл різних групових систем определяетнесовместімость крові донора і реціпіента.В даний час відомо більше 11 групових систем кровічеловека, але значення їх в переливанні крові нерівноцінні. Впервую чергу сумісність при переливанні крові повинна битьобеспечена правильним вибором донора по групах крові системи АВОі резус-антигену D.2. Групи крові АВО.Наібольшее значення для забезпечення совместімостіпріпереліваніі крові має вибір крові за системою АВО.Под групами крові АВО маються на увазі різні сочетаніяантігенних властивостей еритроцитів, званих агглютиногенами, іантітел по відношенню до них - аглютиніни, які перебувають в плазмекрові людей.Существуют два групових агглютиногена - А і В і два групповихагглютініна - альфа і бета. Різні поєднання цих свойствобразуют чотири групи крові: + ---------------- + ---------------- + ------- ------- + -------------- + || Агглютіногени | антитіла | частота || Позначення | в еритроцитах | в плазмі | народження |||| | у відсотках | + ---------------- + ---------------- + ------------ - + -------------- + | Про альфа бета (I) | немає | анти-А (альфа) | 33,5 |||| анти-В (бета) | | + ---------------- + ---------------- + -------------- + -------------- + | А бета (II) | А | анти-В (бета) | 37,8 | + ---------------- + ---------------- + ----------- --- + -------------- + | В альфа (III) | У | анти-А (альфа) | 20,6 | + ---------------- + ---------------- + ----------- --- + -------------- + | АВО (IV) | А, В | немає | 8,1 | + ---------------- + ---------------- + ----------- --- + -------------- + агглютинина а (альфа) є антитілом по відношенню кагглютіногену а, а агглютинин В (бета) є антитілом поотношению до агглютіногеном В. Помилкове переливання іногруппнойкрові, що містить агглютіногени , проти яких у хворого імеютсяантітела, тобто крові, що містить агглютиноген А, при наявності уреціпіента агглютінінов альфа (анти-А) або крові, содержащейагглютіноген В, при наявності у реципієнта агглютинина бета (анти-В), призводить до явища несовместімості.3. Система Резус (Rh-Hr) .Крім антигенів системи АВО в еритроцитах людей імеетсямножество інших антигенів, що утворюють різні групповиесістеми, незалежні як від системи АВО, так і один від друга.Наіболее важливе значення при переливанні крові, після группкрові АВО, мають антигени системи резус D, C, E, з, е, Cw, особливо що володіє найбільшою активністю антиген D, називаемийрезус-фактором.Еті антигени, перебуваючи в еритроцитах людей в разлічнихсочетаніях, утворюють 28 фенотипів (див. "Інструкцію по определеніюрезус-приналежності крові") Так само, як і антиген D, будь-який інший фактор цієї сістемиможет викликати утворення ізоімунному антитіл у осіб, його немають, проте значно рідше і, здебільшого, лише каксопутствующіх антитіл проти антигену D.Главним відмінністю системи резус від системи АВО є те, щов крові людей містяться лише агглютіногени цієї системи, аантітел по відношенню до них, подібних антитіл альфа і бетасістеми АВО, зазвичай, в нормі у людей не імеется.Однако у резус-негативних осіб при деяких умовах (пріпереліваніі або при іншому способі введення резус-положітельнойкрові або під час вагітності жінки резус-положітельнимплодом) може відбутися сенсибілізація, тобто можуть образоватьсяізоіммунние антитіла антірезус.Последствіем цієї сенсибілізації у вагітної жінки являетсярожденіе дітей з гемолітичною хворобою або внутрішньоутробна смертьплода. Тому наявність у жінок такого анамнезу, так само каксведенія про трансфузійних реакціях як у жінок, так і у чоловіків, вже вказують на можливу наявність у них резус-антітел.Еслі хворому, в крові якого є резус-антитіла, помилково перелити резус-позитивну кров , то це призведе кявленію несовместімості.Ліц, в крові яких міститься резус-антиген D, т.е.резус-позитивних (Rh +), близько 85% .15% людей є резус-негативними (rh-). (Вичісленосреді осіб російської національності) .4. Значення інших групових систем ерітроцітовпріпереліваніі крові.Антігени інших групових систем також мають активність, у першу чергу Келл (K), Даффі (Fy), Кідд (Jk), потім антігенисістеми MNSs і другіе.Однако антигенная активність їх значно нижче і антитіла поотношению до них зустрічаються редко.Антітела до всіх цих антигенів можуть утворитися у человекалюбой групи системи АВО, а також, крім антитіл анти-D, незалежно від резус-приналежності, тобто як урезус-негативних, так і у резус-позитивних осіб. Образуютсяоні при тих же умовах, що і антитіла анти-D, тобто при повторномвведеніі крові і вагітностях, і можуть служити прічінойзаболеванія новонародженого або трансфузионного осложненія.5. Причини несумісності і заходи її попередження.Якщо реципієнту, в крові якого є антитіла, перелітькровь донора, еритроцити якого містять антигени, протівкоторих спрямовані ці антитіла, така кров буде руйнуватися в організмі реципієнта, тобто вона є для нього несовместімой.Перед переливанням крові лікар повинен переконатися в тому, чтопредназначенная для переливання кров не містить антигенів, проти яких в крові хворого є антитіла, тобто совместімас кров`ю реціпіента.Для того, щоб не допустити переливання несумісної крові іследует за цим клінічних проявів несумісності, лікар, переливающий кров, зобов`язаний: - правильно вибрати кров щодо груп крові системи АВО-- правильно вибрати кров за резус-прінадлежності-- перевірити всю інформацію щодо цього документацію-- здійснити контрольне дослідження, що включають проби насовместімость.Врач повинен також врахувати, що крім нормально существующіхантітел системи АВО - альфа і бета і мають велике практіческоезначеніе ізоімунному антитіл антирезус-D у реципієнта, хоча ізначно рідше, можуть зустрітися антитіла до іншим антігенамерітроцітов: с, е, з, е, СW, K, Fy, Jk, M, N, S, s і др.Предупрежденію несумісності по відношенню до цих антигенів, так само як і щодо антигену D має, в першу чергу , служити ретельне виявлення трансфузионного і акушерскогоанамнеза. Крім того, несумісність до деяких з них можетбить встановлена при проведенні проб на совместімость.6. Вибір крові, сумісної щодо груп крові АВО (див.рис. 1) .lt; * gt; ---------------------------- ---- lt; * gt; - Малюнки не пріводятся.Вопроси сумісності щодо груп системи АВО решаютсяразлічно в залежності від того, переливається чи цільна кров іліпредполагается використовувати еритроцити, звільнені від плазми (відмиті, розморожені) .а) при переливанні цільної крові вона повинна бути одноіменнойпо групам АВО, т. е. реципієнту може переливатися кров тієї жегруппи, до якої належить він сам. При переливанні цельнойкрові дітям це правило є обязательним.Прі переливанні крові дорослим реципієнтам в ісключітельнихслучаях допускається переливання крові групи 0 (I) реціпіентамдругой групи, однак кількість переливається крові в цих случаяхдолжно бути огранічено.Еті обмеження пов`язані з тим, що групові антитіла удоноров групи 0 ( I), особливо аглютиніни альфа (анти-А), іногданосят імунний характер, бувають дуже активними і тому могутвизивать руйнування еритроцитів крові реципієнта іншої групи-б) при використанні еритроцитів, звільнених від плазми (відмитих, розморожених), еритроцити групи 0 (I) є як биуніверсальной трансфузійним і можуть бути перелітиреціпіенту будь-якої групи. Реципієнти групи АВ (IV), в кровікоторих не міститься групових антитіл, є як биуніверсальнимі реципієнтами і їм можуть бути перелито ерітроцітилюбой групи крові, звільнені від плазми.7. Вибір крові, сумісної за резус-антигену D.Кроме груп системи АВО, при переливанні крові должнаучітиваться резус-приналежність донора і реципієнта. Переліваемаякровь повинна бути однойменної з кров`ю реципієнта в отношеніірезус-прінадлежності.Ето особливо важливо для резус-негативних реципієнтів, незалежно від наявності або відсутності у них резус-антитіл, В останньому випадку для попередження можливого їх образованія.Прі переливанні еритроцитів, звільнених отплазми, резус-позитивним новонародженим з гемолітичною хворобою, рекомендується введення резус-негативних ерітроцітов.8. Перевірка документаціі.Вибрав кров для переливання хворому, фахівець зобов`язаний: а) порівняти запис визначення групи крові реципієнта посістеме АВО (в історії хвороби) і донора (на контейнері з кров`ю, приготовленої для переливання) і переконатися, що, згідно з етімзапісям, кров донора сумісна з кров`ю реципієнта в отношеніігрупп крові системи АВО-б) перевірити запис про резус-приналежності в історії болезніреціпіента і на контейнері з кров`ю і переконатися, що кров донораі реципієнта збігаються з резус-прінадлежності.После перевірки документації необхідно зробити контрольниеісследованія.9. Контрольні ісследованія.Незавісімо від проведених досліджень і наявних запісейнепосредственно перед тим, як приступити до переливання крові, СПЕЦІАЛІСТ ЗОБОВ`ЯЗАНИЙ: а) визначити групову приналежність крові хворого ісверіть результат із записом в історії хвороби і з обозначеніемгруппи крові донора на контейнері (флаконі) -б) визначити групову приналежність крові донора, взятої ізфлакона (з трубочки контейнера), і звірити результат з записом на ньому-в) провести пробу на сумісність за групою крові АВО (див.розділ I і III) -г) провести пробу на сумісність за резус-антигену D (див.розділ I, IV, V, VI) .II. Загальні відомості про проби на СОВМЕСТІМОСТЬПЕРЕЛІВАЕМОЙ крові1. Порядок ісследованія.Проби на сумісність за групою крові АВО і резус-антигену Dпроводятся окремо і не можуть замінити один одного, так какантітела різного характеру вимагають різних методів для своеговиявленія.Для проб на сумісність використовується сироватка кровіреціпіента і консервована кров або еритроцитарна массадонора.Еслі хворому переливається кров з кількох флаконів (контейнерів), проби на сумісність повинні бути зроблені з кровьюіз кожного флакона (контейнера), навіть якщо на них позначено, чтокровь отримана від одного і того ж донора.Сиворотка хворого повинна бути свіжою, отриманої в той жедень, коли робиться переливання крові, або напередодні при условіісохраненія її при температурі 4-8ш С. Винятком є сроківзятія сироватки для проведення проби на сумісність у хворих сгемотрансфузіоннимі ускладненнями (див. розділ VII, п. 9) .2. Отримання сироватки хворого і крові донора.Для отримання сироватки у хворого беруть 4-5 мл крові безстабілізатора в пробірку, на якій підписують прізвище іініціали реципієнта, групу його крові і дату. При цьому лікар долженлічно переконатися в тому, що написи на пробірці зроблені правильно іотносятся до того хворому, у якого взята ця кровь.Через 1-2 хвилини пробірку з кров`ю сильно струшують дляотделенія згортка від стінок пробірки або обводять його сухойстеклянной палочкой.После ретракции згортка від нього відділяється сироватка, котораяі служить для проби на совместімость.lt; * gt; -------------------------------- lt; * gt; - Примітка: якщо необхідно прискорити отделеніесивороткі, пробірку з кров`ю центрифугують близько 5 хв. прі2000-3000 об / мін.Кровь донора отримують з контейнера, який подготовлендля переливання. Для цього кров випускають через голку в небольшомколічестве (5-10 крапель) в пробірку або на платівку, на которойбудет проводитися проба. На пробірці (платівці) надпісиваютфамілію, ініціали донора, групу його крові і номер контейнера. Прицьому лікар повинен особисто переконатися в тому, що на пробірці (платівці) правильно написані всі відомості про донора, наявні наконтейнере, з якого отримана ця кровь.3. Характеристика антитіл системи АВО і умови проведеніяпроби на сумісність за групою крові АВО.Антітела системи АВО - альфа і бета - є вродженими у людини. Вони являють собою аглютиніни, визивающіесклеіваніе несумісної крові та в прямій реакції междусивороткой і еритроцитами. Ця реакція добре протікає наплоскості при температурі близько 20Ш і тому при цих же условіяхпроізводітся проба на сумісність за групою крові АВО.4. Характеристика резус-антітел.В відміну від нормальних природних антитіл системи АВОантітела антирезус, так само як і інші аллоіммунние антитіла, неє вродженими, а з`являються в крові у людини лішьвследствіе изоиммунизации і відрізняються від антитіл системи АВО, зокрема, тим, що вимагають інших умов для свого виявленія.Антіерітроцітарние антитіла бувають різної форми: повні інеполние. Повні антитіла активні при проведенні реакції в солевойсреде при температурі 37ш- неповні проявляють свою дію вдругих умовах, якими є: проведення реакції в натівнойсиворотке з підігрівом, додаванням різних колоїдів або другіхреактівов.5. Способи виявлення резус-антитіл і вибір методики дляпроведення проби на сумісність за резус-антигену D.Ввіду того, що при сенсибілізації до резус-антигену D Вподавляющем більшості випадків утворюються неповні антитіла, аполние антитіла утворюються рідко і майже завжди разом снеполнимі, в лікувальній практиці зазвичай використовуються для проби насовместімость ті реакції, які виявляють саме неполниеантітела. Такими пробами є: а) проба із застосуванням поліглюкіну (розділ IV) -б) проба із застосуванням желатину (розділ V) -в) непряма проба Кумбса (розділ VI) -г) проба на площині при температурі 48ш С (розділ VII). всі перераховані проби виявляють неповні резус-антитіла іпоетому в лікувальній практиці для визначення сумісності можнопользоваться будь-який з них, однак найбільш чувствітельниміявляются непряма проба Кумбса і проба із застосуванням желатіна.Кроме резус-антитіл ці проби виявляють і багато неполниеізоіммунние антитіла інший специфічності. Тому непряма пробаКумбса і проба із застосуванням желатину особливо рекомендуються какпроба на сумісність при переливанні крові хворим, перенесшімтрансфузіонную реакцію, і іншим сенсибілізованим особам, чутливим до введення чужих еритроцитів, хоча і сумісних погруппе крові системи АВО і по резус-прінадлежностіlt; * gt; .- ------------------------------- lt; * gt; - Примітка: при проведенні проб на сумісність порезус-антигену D слід враховувати, що якщо резус-отріцательномубольному буде помилково обрана резус-позитивна кров, етоможет бути виявлено тільки в тому випадку, якщо у реципієнта імеютсяв крові резус-антитіла. Виявити відмінність в резус-прінадлежностікрові донора і реципієнта, якщо останній не має антитіл, пробина сумісне не могут.Предупрежденіе такіхошібокдолжнобитьобеспеченопредварітельним визначенням резус-приналежності крові донора іреціпіента і ретельною перевіркою записів результатів в історііболезні і на контейнері з кровью.III. ПРОБА НА СОВМЕСТІМОСТЬПО ГРУПАМ КРОВІ СИСТЕМИ АВОПроба на сумісність за групою крові АВО проводиться напротязі 5 хвилин, на площині, при кімнатній температуре.Техніка.Для дослідження слід використовувати білу порцелянову ілілюбую іншу білу пластинку із змочуваною поверхнею. Напластінке надписати прізвище, ініціали та групу крові хворого, прізвище, ініціали і групу крові донора і номер контейнера скровью.На пластинку накапати 2-3 краплі сироватки хворого і туди жедобавіть маленьку краплю крові донора так, щоб співвідношення крові сироватки було приблизно 1:10 ( для зручності рекомендуетсясначала спустити через голку кілька крапель крові донора на бортпластінкі, а потім звідти кінцем сухий скляній палочкіперенесті маленьку краплю крові для перемішування з сивороткойбольного) .крові розмішати з сироваткою сухий скляній паличкою, пластинку злегка покачати, потім на 1-2 хвилини залишити в спокої ізнову періодично похитувати, одночасно спостерігаючи за ходомреакціі протягом 5 мінут.Оценка результату.Якщо в суміші сироватки хворого і крові донора наступілаагглютінація еритроцитів - агглютінати видно спочатку в відемелкіх, потім великих грудочок на тлі повністю або майжеповністю знебарвленою сироватки - це значить, що кров доноранесовместіма з кров`ю хворого і не повинна бути йому переліта.Еслі суміш крові донора і сироватки хворого після закінчення 5 хвилин залишається гомогенно забарвленої, без ознак аглютинації, то це означає, що кров донора сумісна з кров`ю хворого вотношении груп крові системи АВО.Следует пам`ятати, що при несумісності за групами крові АВОагглютінація настає зазвичай протягом першої хвилини, але прінізком титри антитіл у хворого, а також при слабо вираженнойактівності агглютиногена у донора (наприклад, підгрупа А2), аглютинація може наступити значно пізніше, іноді тільки докінця 5-й мінути.Прі деяких патологічних станах, наприклад, при опіках, цирозу печінки, при септик-пиемических станах, сивороткабольних набуває властивість викликати неспецифічне склеіваніеерітроцітов в так звані монетні стовпчики, сімулірующіеагглютінацію, тому вибір сумісної крові таким хворим биваетзатруднен.В цих случаяхследуетвновьпроверітьгрупповуюпрінадлежность крові донора і хворого і, якщо в щодо цього не було помилки і кров обрана правильно, перевірити результат пробина сумісність мікроскопічно при підігріванні і добавленііізотоніческого розчину NaCl. Для цього знову зробити пробу і, якщо при мікроскопії видно не агглютінати з еритроцитів, а"монетні стовпчики", І при подальшому додаванні 2-3 капельізотоніческого розчину NaCl і підігріванні до 37 ш З онірасходятся і еритроцити розташовуються у вигляді гомогенної суспензії -можна вважати кров донора сумісна щодо груп кровісістеми АВО.После того, як встановлена сумісність за групою кровісістеми АВО, лікар повинен переконатися, що кров донора сумісна скровью хворого також щодо резус-антигену D, для чегопроізвесті ще одну з проб на сумісність: пробу з 33% -нимраствором поліглюкіну (розділ IV), пробу із застосуванням желатину (розділ V) або непряму пробу Кумбса ( розділ VI), пробу наплоскості при температурі + 48ш С (розділ VII) .IV. ПРОБА НА СОВМЕСТІМОСТЬС ВИКОРИСТАННЯМ 33% розчину ПОЛІГЛЮКІНАПроба проводиться в пробірці без підігріву протягом 5 хвилин.Для проби застосовується 33% -ний розчин поліглюкіну, пріготовленнийспеціально для лабораторних целей.Техніка.Для дослідження використовувати центрифужную або будь-яку другуюпробірку ємністю не менше 10 мл.На пробірці надписати прізвище, ініціали, групу кровібольного і донора, номер контейнера з кровью.На дно пробірки пастерівської піпеткою внести 2 краплі сивороткібольного, одну краплю донорської крові, одну краплю 33% раствораполіглюкіна і перемішати вміст шляхом встряхіванія.Пробірку нахилити майже до горизонтального положення, затеммедленно повертати таким чином, щоб вміст еерастекалось по стінках. Таке розтікання вмісту пробірки постенкам робить реакцію більш вираженной.Контакт еритроцитів з сироваткою хворого при поворачіванііпробіркі слід продовжувати не менше 3 хвилин. Через 3-5 хв. впробірку долити 2-3 мл ізотонічного розчину NaCl і перемешатьсодержімое шляхом 2-3-х разового перевертання пробірки. (Невзбалтивать!) Оцінка результату.Якщо в пробірці спостерігається аглютинація еритроцитів в відевзвесі дрібних або великих грудочок іноді пластівчасту форми нафоне просвітленої або повністю прозорої рідини, Цеозначає, що кров донора несумісна з кров`ю хворого і неповинна бути йому переліта.Еслі вміст пробірки залишається рівномірно забарвленим і внем не спостерігається ознак аглютинації еритроцитів, це означає, що кров донора сумісна з кров`ю хворого в отношеніірезус-антигену DV ПРОБА НА СУМІСНІСТЬ З ПРІМЕНЕНІЕМ10% розчину ЖЕЛАТІНАПроба проводиться в пробірці при температурі 46-48ш З напротязі 10-15 мінут.Техніка.Для дослідження використовувати центрифужную або будь-яку другуюпробірку ємністю не менше 10 мл.На пробірці надписати прізвище, ініціали та групу кровібольного і донора, і номер контейнера з кровью.lt; * gt; -------------------------------- lt; * gt; - Примітка: для зручності рекомендується спочатку випустітьіз флакона через голку кілька крапель крові донора в другуюпробірку, а потім звідти пастерівської піпеткою перенести маленькуюкаплю в пробірку.На дно пробірки за допомогою піпетки помістити одну маленькуюкаплю еритроцитів донора, потім туди накапати дві капліподогретого до розрідження 10% розчину желатину і 1-2 каплісивороткі больного.Раствор желатину необхідно тщательнопросмотреть перед вживанням. При помутнінні або появленііхлопьев желатин непрігоден.Содержімое пробірки перемішати шляхом струшування і поместітьее в водяну баню або в горизонтальному положенні в термостат прі46-48ш С на 15 мін.После інкубації долити в неї 5-8 мл ізотонічного раствораNaCl, вміст пробірки перемішати 1-2- кратним перевертиваніемее і переглянути на світло неозброєним оком і потім путеммікроскопірованія.Оценка результату.Якщо в пробірці спостерігається аглютинація еритроцитів -ерітроціти видно у вигляді суспензії дрібних, рідше великих грудочок нафоне просвітленої або повністю прозорої рідини це означає, що кров донора несумісна з кров`ю хворого і недолжна бути йому переліта.Еслі вміст пробірки залишається рівномірно забарвленим і внем не спостерігається яких-небудь ознак аглютинації, це означає, що кров донора сумісна з кров`ю реципієнта (див. рис. 3) .lt; * gt; ------ -------------------------- lt; * gt; - Картинка не пріводітся.VI. НЕПРЯМА проба Кумбса, ЯК ПРОБА НАСОВМЕСТІМОСТЬ переливають КРОВІНепрямая проба Кумбса, як проба на сумісність переліваемойкрові, проводиться шляхом інкубації сироватки хворого серітроцітамі донора протягом 45 хвилин при 37шС з последующімотмиваніем їх, додаванням спеціального реактиву (сироватки дляпроби Кумбса) і наглядом протягом 20 хв. lt; * gt; -------------------------------- lt; * gt; - Примітка: в етойпробеагглютінаціясенсібілізірованних еритроцитів відбувається за рахунок іммуннихантітел проти білка крові людини, що знаходяться в сироватці дляпроби Кумбса. Остання готується з крові тварин, попередньо імунізованих сироваткою крові человека.Техніка.Пробірку з кров`ю донора долити до верху ізотоніческімраствором NaCl і перемішати вміст шляхом перевертиваніяпробіркі. Пробірку центрифугувати близько 5 хв. до оседаніяерітроцітов, після чого відсмоктати надстой рідини і сноваповторіть процедуру відмивання ерітроцітов.На інший центрифужной або будь-який невеликий пробірці надпісатьфамілію, ініціали та групу крові хворого і донора і номер флаконас кров`ю. На дно цієї пробірки за допомогою пастерівської піпеткіперенесті з першої пробірки одну маленьку краплю (0,05 мл) відмитих еритроцитів донора і додати до них 3 краплі сивороткібольного.Сиворотку перемішати з еритроцитами струшуванням пробірки, після чого поставити її в термостат при 37ш С на 45 хвилин .Через 45 хвилин пробірку вийняти з термостата, долити в неї доверху ізотонічний розчин NaCl, перемішати вміст іцентріфугіровать до осадження еритроцитів. Таке отмиваніепроізвесті 2 рази, а якщо використовується відалевская або ще меньшаяпробірка - 3-4 рази, кожен раз ретельно відсмоктуючи отмивнуюжідкость.К відмитим, щільно осілим, еритроцитів додати 4-6 капельізотоніческого розчину NaCl для отримання приблизно 5% суспензії ерітроцітов.Одну краплю 5% суспензії еритроцитів перенести на білу фарфоровуюілі будь-яку іншу білу пластинку із змочуваною поверхнею, додати туди 1-2 краплі сироватки для проби Кумбса і перемешатькаплі скляній палочкой.Пластінку злегка покачати, потім на 1-2 хвилини залишити спокої і знову періодично похитувати, одночасно спостерігаючи заходом реакції протягом 20 мінут.lt; * gt; -------------------------------- lt; * gt; - Примітка: при несумісності в непрямій пробі Кумбсаагглютінація зазвичай настає протягом першої хвилини. Однакоследует пам`ятати, що при низькому титрі резус-антитіл (або другіхантітел) аглютинація може наступити значно пізніше, іноді докінця 20-й мінути.Оценка результату.Якщо добавленіесивороткідля проби Кумбса визоветагглютінацію еритроцитів - агглютінати видно у вигляді грудочок напросветленном або повністю прозорої тлі - це значить , чтокровь донора несумісна з кров`ю хворого і не повинна бути емупереліта.Еслі суспензія еритроцитів залишилася гомогенно забарвленої, безпрізнаков аглютинації, це означає, що кров донора сумісна скровью хворого за резус-антигену D, а також в отношеніідругіх ізоантігенов, до яких могли утворитися ізоіммунниеантітела неповної форми.В районах, де до теперішнього часу використовувалася толькопроба на сумісність на чашці Петрі, тимчасово допускаетсясохраненіе цієї проби в період переходу на проби із застосуванням 10% розчину желатину або 33% розчину поліглюкіну або іспользованіянепрямой проби Кумбса.VII. ЗАХОДИ ПОПЕРЕДЖЕННЯ НЕСУМІСНОСТІ ПО відношеннюдо інших антигенів СИСТЕМИ резус і антигенів ДРУГІХСЕРОЛОГІЧЕСКІХ СИСТЕМ. ПІДБІР КРОВІ ДЛЯІЗОСЕНСІБІЛІЗІРОВАННИХ БОЛЬНИХ1. Загальні сведенія.Више було сказано, що, крім антигенів системи АВО ірезус-антигену D, причиною несумісності при переливанні кровімогут бути інші антигени системи резус або антигени другіхсістем. Це може статися в тих випадках, коли кровьперелівается сенсибілізованій хворому, що має в кровіантітела проти цих антігенов.Для вирішення питання про можливу сенсибілізації хворого кразлічним антигенів першорядне значення має трансфузійний іакушерскій анамнез. Наявність в анамнезі вказівок на возможнуюсенсібілізацію (див. П. 4) вимагає подальшого дослідження кровіреціпіента (див. П. 5) і, якщо будуть знайдені антитіла, спеціальноговибора або індивідуального підбору крові (див. П.п. 6, 7). Слід відзначити, що багато ізоімунні антитіла виявляються тими жеметодамі, що і антитіла анти-D, деякі - так само як антітеласістеми АВО. Тому несумісність крові донора щодо етіхантітел може бути виявлена вже при виконанні проб насовместімость по групам крові АВО і резус-антигену D.2. Значення проби на сумісність за групою крові АВО длявиявленія інших антітел.В деяких випадках в крові у людей утворюються ізоіммунниеантітела анти-М і анти-N. Ці антитіла в більшості случаевактівни в тих же умовах, що і антитіла системи АВО, т.е.визивают агглютинацию еритроцитів на площині при комнатнойтемпературе. Тому, якщо у хворого є антитіла анти-М іліанті-N, а еритроцити донора містять етіфактори, тонесовместімость по відношенню до них виявиться при пробі насовместімость по групам крові АВО. Кров такого донори не мусить бути перелита цьому реціпіенту.В таких випадках кров реципієнта необхідно досліджувати влабораторіі на ізоімунні антитіла. Попередньо следуетпроверіть правильність визначення групи крові ірезус-приналежності. Якщо стан хворого не позволяетотложіть трансфузию до отримання результатовісследованіяспеціфічності антитіл, слід спробувати знайти сумісну кровьпутем проведення проб на сумісність з декількома образцамікрові донора.3. Значення проб на сумісність по резус-антигену длявиявленія інших антітел.Прі проведенні проб на сумісність по резус-антигену D можновиявіть також неповні ізоімунні антитіла до інших антігенамсістеми резус: С, Е, з, е, а іноді і до антигенів інших сістемерітроцітов. З цієї точки зору найбільш чутливими являютсянепрямая проба Кумбса і проба з желатином, за допомогою которихвиявляются неповні антитіла до всіх антигенів системи Резус, системам Келл-Челлано, Даффі, Кідд і деяким другім.Следовательно, якщо в крові реципієнта є такі антитіла, топроба Кумбса і проба з желатином виявлять несумісність кровідонора, в якій містяться ці антигени. Кров такого донора неповинна бути перелита цьому реціпіенту.Для уточнення специфічності антитіл і вибору совместімогодонора кров реципієнта необхідно досліджувати вспеціалізірованних лабораторіях. Попередньо слід проверітьправільность визначення групи крові і резус-приналежності. Еслісостояніе хворого не дозволяє відкласти трансфузию до полученіярезультатов дослідження специфічності антитіл, слід попитатьсянайті сумісну кров шляхом проведення проб на сумісність снесколькімі зразками крові доноров.4. Облік трансфузионного і акушерського анамнеза.Еслі хворий отримував трансфузии крові, однойменної ілісовместімой по групам крові системи АВО і резус-приналежності D, але не дивлячись на це, трансфузии супроводжувалися реакціями іліосложненіямі, це вказує на можливу сенсибілізацію хворого кдругу антигенів системи резус або до антигенів інших систем і нанесовместімость для нього крові, що містить ці антігени.Еслі жінка мала вагітності, що закінчилися народженням детейс гемолітичною хворобою або народженням мертвих плодів, і кровьетой жінки резус-позитивна або резус-негативна, але несодержіт антитіл анти-D, то це також вказує на возможнуюсенсібілізацію жінки до будь-якого іншого антигену сістемирезус або інших систем і на несумісність для неї крові, що містить ці антігени.В таких випадках кров реципієнта повинна бути заблаговременноісследована на наявність ізоімунному антітел.5. Дослідження крові на наявність ізоімунному антітел.Определеніе ізоімунному антитіл виробляється фахівцями-серологію в установах служби крові (відділеннях, станціяхпереліванія крові), які мають стандартними ерітроцітаміразлічной фенотипической структури. Для цієї мети удобнопользоваться еритроцитами групи 0 (I). Серед них повинні битьобразци еритроцитів резус-негативні і резус-положітельниеразлічного фенотипу: CcDEe, CcDee, CCDеe, ccDEе, ссDЕЕ, ccDee, Сcddеe, ccddЕе.Среді резус-позитивних еритроцитів доцільно іметьобразци гомозиготні і гетерозиготні за антигенами С і Е, тобто , що містять і не містять антигени з і е.Среді резус-негативних еритроцитів слід мати образциразлічние за антигенами системи Даффі, Келл-Челлано, Кідд. Крімтого, всі стандарти повинні бути тіпірованних по системі MNSs, Pp, Левіс і др.Ввіду того, що ізоімунні антитіла можуть бути як повною, так і неповної форми, їх слід виявляти, використовуючи різні методипрі різних температурних режимах. Для виявлення неполнихантітел необхідно проводити непряму пробу Кумбса або реакції сиспользованием колоїдів (желатин, поліглюкін). Для виявленіяполних антитіл проводять реакцію сольовий аглютинації при разнихтемпературах: 37ш, 20Ш, 4ш С.Заключеніе про наявність, а також про форму і специфічності антітелделают за результатами реакції у всіх методах.Форма антитіл. Якщо позитивна реакція виявилася зрізними зразками еритроцитів тільки при проведенні непрямойпроби Кумбса (або реакції з застосуванням желатину або поліглюкіну), це означає, що в дослідженій сироватці містяться тольконеполние антітела.Еслі позитивна реакція виявилася при непрямій пробі Кумбса (або в реакції з застосуванням желатину або поліглюкіну ) і водночас в реакції сольової аглютинації, це означає, що всиворотке містяться як неповні, так і повні антитіла. Полниеантітела можуть бути тепловими, тоді позитивний результатвиявітся при температурі 37ш С, або холодовими, давшіміположітельний результат при 20Ш З або 4ш С.Еслі сироватка дала позитивний результат тільки в реакціісолевой аглютинації в пробірках, це означає, що вона содержіттолько повні антитіла - теплові або холодові ( в залежності від того, при якій температурі виявилася аглютинація) .Якщо аглютинація еритроцитів не спостерігається в жодній ізетіх проб, це говорить про відсутність як повних, так і неполнихізоіммунних антитіл до антигенів, що містяться в стандартнихерітроцітах, які були використані при цьому ісследованіі.Спеціфічность антитіл встановлюється взавісімостіотрезультатов реакції зі стандартними еритроцитами, содержащіміразние антигени. Цей висновок необхідно зробити для повних інеполних антитіл в отдельності.Большую роль при визначенні специфічності антитіл можетсиграть визначення антигенної структури еритроцитів самогобольного. Якщо таке дослідження було можливим, то це оченьоблегчіт вирішення питання про специфічність антитіл, так як ухворого можуть бути антитіла тільки до тих антигенів, які несодержатся в його власній крові.Неполние антитіла в одній і тій же сироватці можуть мати какодну, так і різну специфічність. при одночасному присутності в сироватці неповних і полнихантітел онітакжемогутбитьоднойіліразлічнойспеціфічності.Полние антитіла здебільшого бувають моноспеціфічнимі.Такім чином, дослідження сироватки хворого з прімененіемразних методів при наявності стандартних еритроцитів, тіпірованнихпо різним ізоантігенамі, дозволяє вирішити питання про характереіммунізаціі.Еслі у хворого виявлені ізоімунні антитіла, то, знаючи іхспеціфічность, можна забезпечити сумісність при переліваніікрові спеціальним вибором донора (див. п. 6) .Якщо у хворого виявлені антитіла, але визначити іхспеціфічность неможливо, наприклад, через недостатнє наборастандартних еритроцитів, сумісність переливається крові можнообеспечіть індивідуальним підбором донора (див. п. 7) .6. Спеціальний вибір донора.Спеціальний вибір донора (донорської крові) проводиться на СПКілі ОПК в тих випадках, коли встановлена форма і спеціфічностьімеющіхся у хворого антитіл, а на СПК або ОПК є донори, тіпірованних по цих антигенів. Вибір проводиться з числа ліцодногруппних за системою АВО і резус-прінадлежності.Еслі передбачається переливати еритроцити, звільнені отплазми, можна використовувати також і разногруппную кров, носовместімую щодо еритроцитів донора.В цих випадках еритроцити групи 0 (I) можна переліватьреціпіентам будь-якої групи, а реципієнтам групи АВ (IV) -ерітроціти будь-якої групи крові, але в обох випадках однойменні порезус-прінадлежності.Далее вибираються донори, які містять в крові антигенів, проти яких у хворого виявлені антитіла. Після такогоспеціального вибору донора, еритроцити якого не содержатантігенов, проти яких у хворого виявлені ізоіммунниеантітела, кров цього донора слід перевірити в пробах насовместімость з сироваткою хворого з обов`язковим включенням тогометода, в якому опинилися активними антитіла хворого. Затем,при благоприятном результате этих исследований, от доноразаготавливается кровь (или берется кровь, заготовленная от негоранее) и передается в лечебное учреждение специально для этогобольного.Несмотря на специальный выбор крови, врач должен передтрансфузией провести все контрольные исследования, предусмотренныев разделе 1, 9 и только после этого он может приступить кпереливанию крови, начав его с биологической пробы.В тех случаях, когда СПК или ОПК не располагают кровьюдоноров, типированных как необходимо для конкретного больного,подбор кровитакому сенсибилизированному больному следуетпроводить индивидуально.7. Индивидуальный подбор донора.Индивидуальный подбор донора (донорской крови) производится последующим показаниям:а) втехслучаях,когдатрансфузиологобнаружилнесовместимость в пробах по группам крови АВО или резус-антигену иконтрольная проверка исключает ошибки в отношении этих антигенови если при этом состояние больного позволяет отложить трансфузию,чтобы дополнительно исследовать кровь на изоиммунные антитела.Подбор осуществляют, используя ту же реакцию, с помощьюкоторой обнаружены антитела. Если агглютинация наблюдалась припроведении пробы на совместимость по группам крови АВО, то подборкрови следует вести на плоскости при комнатной температуре. Еслиагглютинация наблюдалась при проведении пробы на совместимость порезус-антигену D, то подбор следует проводить, используя непрямуюпробу Кумбса или реакции с использованием коллоидов (разделы IV,V).Когда будет подобрана кровь, не дающая агглютинации ссывороткой больного, следует провести с ней все другие реакции,предусмотренные при переливании. В тех случаях, когда дляпереливания подбиралась кровь из флакончиков-спутников, врачдолжен повторить все исследования, взяв кровь непосредственно изконтейнера, подготовленного для трансфузии. При отсутствиипризнаков несовместимости врач может приступить к переливаниюкрови, начав его с биологической пробы.Следует учесть, что если несовместимость выявлена только погруппам крови АВО, а контрольные пробы исключают ошибку по этимантигенам, то это чаще всего бывает за счет антител анти-М илианти-N и подобрать совместимую кровь в этих случаях удается обычноуже среди 5-6 образцов. Если несовместимость выявилась из-заналичия неполных антител, подбор может оказаться более трудным,но все же, если трансфузия срочная, можно попытаться найтисовместимую кровь.б) индивидуальный подбор проводится также в тех случаях, когдаопределены наличие и специфичность изоиммунных антител в кровибольного, но СПК и ОПК не имеет возможности специально выбратькровь из-за отсутствия типированного донора с подходящей дляданного больного антигенной структурой. Подбор в этих случаяхпроводится с кровью, взятой из флакончиков-спутников, или скровью, полученной непосредственно у доноров из пальца. Начинатьподбор следует, используя ту реакцию, в которой оказалисьактивными изоиммунные антитела. Если выявлены полные антитела, тоследует учитывать и температуру, при которой они оказалисьактивными.Вероятность нахождения совместимой крови в таких случаяхзависит от специфичности антител. При антителах с или е подборследует вести из числа резус-положительных доноров. При этомобычно удается довольно быстро найти с-отрицательную кровь (16%),но значительно труднее е-отрицательную ввиду редкой встречаемостилиц, не содержащих этого фактора (2,5%).Большая или меньшая трудность подбора крови при антителахдругой специфичности будет зависеть также от частоты факторов, ккоторым направлены антитела. Особенно затруднен подбор бывает приналичии антител к фактору Челлано, выявленному у 99,85% лиц, атакже в случае сочетания антител разной специфичности.После такого индивидуального подбора кровь, заготовленная отдоноров, передается в лечебное учреждение для переливания данномубольному.в) индивидуальный подбор крови донора следует проводить такжев тех случаях, когда у больного выявлены изоиммунные антитела, ноне установлена их специфичность. Это может быть связано сограниченностью на СПК (ОПК) образцов стандартных эритроцитов,типированных по изосерологическим системам, а также, возможно, сналичием в крови больного антител к неизвестному до этого времениантигену. Подбор в таких случаях следует проводить, используякровь изфлакончиков-спутниковили кровь, полученнуюнепосредственно у донора из пальца, начиная его той же реакцией, спомощью которой оказались активными антитела больного. В такихслучаях решить заранее вопрос, среди каких доноров легче подобратькровь, бывает трудно. После такого индивидуального подбора кровьпередается в лечебное учреждение для переливания данному больному.8. Использование подобранной крови.Как специальный, так и индивидуальный подборкрови,производимой на СПК (ОПК), является предварительной процедурой.Врач-трансфузиолог, получив флакон с кровью, должен во избежаниеошибки сверить паспортные данные на флаконе с данными о кровибольного в истории болезни, произвести контрольные реакции -определение группы крови больного и донора и пробы насовместимость. При совпадении группы крови и резус-принадлежностибольного и донора и отсутствии агглютинации в пробах насовместимость, врач может приступить к переливанию крови, начавего с биологической пробы.9. Особенностипробы на совместимость у больных сгемотрансфузионными осложнениями.У больных,перенесшихгемотрансфузионное осложнение,происходят характерные серологических сдвиги, заключающиеся в том,что в период до 10-20-го дня идет нарастание сенсибилизации,выражающееся в повышении титра антител, послуживших причинойосложнения, и в появлении антител другой специфичности. После20-го дня начинается постепенное снижение титра антител иисчезновение их в порядке, обратном появлению. Поэтому такимбольным в период нарастания сенсибилизации пробу на совместимостьследует проводить с сывороткой, полученной от них непосредственнов день проведения трансфузии крови или не далее чем накануне. Припереливании крови после 20-го дня, кроме этой пробы, желательнодополнительно проводить пробу на совместимость с порциейсыворотки, заготовленной на высоте сенсибилизации (10-20-й день).Это дает возможность предупредить переливание больному крови,содержащей антиген, против которого у него совсем недавно имелисьантитела.VIII. ЗАПИСИ О ВЫБОРЕ КРОВИ ИПРОВЕДЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХВрач, переливающий кровь, обязан записать в истории болезни:1) паспортные данные с каждого контейнера с кровью - фамилию иинициалы донора,группу крови, резус-принадлежность, номерконтейнера и дату заготовки крови-2) результат контрольной проверки групповой принадлежностикрови больного-3) результат контрольной проверки групповой принадлежностикрови донора, взятой из контейнера-4) результат пробы на совместимость по группам крови АВО-5) метод и результат пробы на совместимость по резус-антигенуD.Записи скрепляются подписью врача.IX. ЗАКЛЮЧЕНИЕСамыми важнымипоказателями,позволяющимисудитьосовместимости переливаемой крови(эритроцитов) являютсясовместимость по группе крови системы АВО и совместимость порезус-антигену D.Для обеспечения совместимости переливаемой крови необходимо наосновании определения группы крови реципиента и записи в историиболезни, а также документации на контейнере с кровью, правильновыбрать кровьв отношении групп крови системы АВО ирезус-принадлежности (см.раздел I, п.п. 6,7).Непосредственно перед переливанием крови, независимо отпроведенных ранее исследований и имеющихся записей, врач обязанснова проверить групповую принадлежность реципиента и крови донора(раздел I. 9), сделать пробу на совместимость по группам крови АВО(раздел III) и одну из проб на совместимость по резус-антигену D(разделы IV, V, VI, VII).Врач должен предусмотреть возможнуюнесовместимостьпо отношению к другим антигенам и принять меры для еепредупреждения.Если кровь (эритроциты) донора оказалась несовместимой скровью реципиента в пробе на совместимость по группам АВО или впробе на совместимость по резус-антигену D, она не должна быть емуперелита!Если кровь (эритроциты) донора оказалась совместимой с кровьюреципиента в пробах на совместимость по группам крови АВО ирезус-антигену D и нет указаний на несовместимость по отношению кдругим антигенам - кровь (эритроциты) может быть перелита.Переливание начинается с биологической пробы.Ответственным за выполнение перечисленных требований иобеспечение совместимости при переливаниикровиявляетсяврач-специалист, переливающий кровь."Інструкцію щодо попередження несумісності при переліваніікрові", Затверджену Міністерством охорони здоров`я СРСР 05 декабря1990 року N 05-14 / 37-14, вважати такою, що втратила силу з моментаутвержденія даної інструкціі.Начальнік Управленіяорганізаціі медіцінскойпомощі населеніюМінздрава РФА.І.ВЯЛКОВПріложеніе N 2УТВЕРЖДЕНОПріказ МОЗ Россііот 09.01.1998 р N 2ІНСТРУКЦІЯПО ВИГОТОВЛЕННЯ СТАНДАРТНИХ ІЗОГЕМАГГЛЮТІНІРУЮЩІХСИВОРОТОК ДЛЯ ВИЗНАЧЕННЯ ГРУП кРОВІ СИСТЕМИ АВОСтандартнимі ізогемагглютінірующімісивороткаміявляютсясивороткі, приготовані з крові людей і деяких другіхжідкостей, що містять групові антитіла (аглютиніни). Сивороткіпредназначаются для визначення групової приналежності кровілюдей по системі АВО.Стандартние ізогемагглютінірующіх сироватки представляють собойпрозрачную рідина, забарвлену відповідно до групповойпрінадлежностью, і розфасовану в ампули або флакони. На етікеткеуказивают названіяучрежденія, ізготовівшегосиворотку, специфічність, титр аглютинінів і термін годності.I. ДЖЕРЕЛА ОТРИМАННЯ СИВОРОТОКІсточнікамі отримання стандартних сироваток служать: а) кров, заготовлена без консервантаотдонора, попередньо обстеженого і містить в крові групповиеантітела з титром, достатнім для виготовлення стандартнихсивороток-б) плазма, отримана при проведенні плазмаферезу іліотделенная з донорської крові, з яких-небудь причин невикористана для лікувальних цілей і містить групові антітелас титром, достатнім для виготовлення стандартних сироваток-в) дополнітельнийісточнік- плевральний транссудат, асцитичної рідина, якщо в них містяться групові антитіла стітром, достатнім для виготовлення стандартних сивороток.II. УМОВИ ПРИДАТНОСТІ СТАНДАРТНОЙІЗОГЕМАГГЛЮТІНІРУЮЩЕЙ СИВОРОТКІК стандартної ізогемагглютінірующіх сироватці пред`являютсяследующіе вимоги: а) сироватка повинна бути специфічною, тобто содержатьопределенние групові антитіла - альфа (анти-А), бета (анти-В) або обидва антитіла разом, і не викликати неспеціфіческойагглютінаціі еритроцитів однойменної групи і групи 0 (I) .Сиворотка групи АВ (IV), що не містить групових агглютінінов, неповинна викликати аглютинації-б) повинна бути активною, що виражається в наступі первихпрізнаков аглютинації зі стандартними еритроцитами груп А1 і Вв протягом перших 30 секунд і зі стандартними еритроцитами группиА2 в протягом першої хвилини і титром аглютинінів по відношенню керітроцітам груп А1 і в не нижче, ніж 1:32 і групи А2 - не нижче, ніж 1: 16-в) не повинна надавати на еритроцити гемолізує дії-г) повинна бути прозорою. Допускається невелика опалесценція, що не впливає на якість сироватки-д) повинна бути пофарбована: група А (II) в світло-синій колір, група В (III) - в червоний колір, група АВ (IV) - в жовтий цвет.е) слід забезпечувати від інфікування прібавленіемконсервірующіх засобів-ж) повинна мати точну паспортизацію, т. е. обозначеніегрупповой приналежності, титру, терміну придатності, номера серії інаіменованія установи, її виготовив. Всі ці відомості должнибить позначені на етикетці, що наклеюється на флакон (ампулу) состандартной сироваткою, а також внесені в "Журнал регістрацііізготовленной стандартної сироватки", В який записують такжесведенія про дату виготовлення сироватки і результатах контрольнихпроверок її качества.III. Основні етапи РОБОТИ ПО ПРІГОТОВЛЕНІЮСТАНДАРТНОЙ ізогемагглютінірующіх СИВОРОТКІ1. Попереднє визначення придатності крові донора длявиготовлення з неї стандартної ізогемагглютінірующіх сивороткіпутем взяття від нього крові і відділення від неї сироватки або путемполученія плазми за допомогою проведення плазмаферезу. Ісследованіяпроізводятся заздалегідь в пробної порції крові, полученнойнепосредственно від донора в невеликому колічестве.2. Взяття крові від донора, відділення від неї сироватки іліполученіе плазми від донора за допомогою плазмафереза.3. Попереднє визначення придатності плазми, передбачуваної для передачі в сироваткове відділення длявиготовлення з неї стандартної ізогемагглютінірующіх сивороткі.4. Обробка плазми для отримання з неї сивороткі.5. Збір залишків крові з флакончиків (пробірок) - супутників вобще ємність, відділення від неї сироватки (плазми) іпредварітельное визначення прігодностідляізготовленіястандартной ізогемагглютінірующіх сивороткі.6. Отримання в лікувальних установах асцитичної рідини, плеврального транссудату, звільнення їх від згустків фібрину іпредварітельное визначення придатності цього матеріалу длявиготовлення з нього стандартної ізогемагглютінірующіх сивороткі.7. Визначення придатності сироватки, плазми для ізготовленіяіз неї стандартної ізогемагглютінірующіх сироватки, що включає: а) визначення групової приналежності сироватки (групповихагглютінінов) -б) визначення здатності сироватки викликати неспеціфіческуюагглютінацію-в) визначення гемолізуючих властивостей сироватки-г) визначення активності сироватки-д) швидкість настання аглютинації -е) титр агглютінінов.8. Попередній висновок про придатність сивороткі.9. Консервування сивороткі.10. Перший контроль сироватки до розліва.11. Другий контроль сироватки до розліва.12. Фільтрування сивороткі.13. Фарбування сивороткі.14. Остаточний висновок про придатність сивороткі.15. Розлив сивороткі.16. Паспортизація розлитої сивороткі.17. Контроль розлитої сивороткі.IV. МЕТОДИ серологічних ІССЛЕДОВАНІЙ1. Визначення групової приналежності сироватки при помощістандартних ерітроцітов.Определеніе проводиться на білій порцеляновій або будь другойбелой пластінкесо смачиваемой поверхнею, на которойнадпісиваются позначення: зліва "Про", у середині "А" і справа "В".Соответственно Кожному позначенню на платівку завдають по одноймаленькой краплі (0,01 мл) стандартних еритроцитів груп 0 (I), А (II), і В (III). На кожну краплю еритроцитів капають одну большуюкаплю (0,1 мл) досліджуваної сироватки з тим, щоб соотношеніеколічества еритроцитів і сироватки було приблизно 1: 10.Ерітроціти перемішують з сироваткою сухий скляній паличкою, пластинку злегка похитують, потім на 1-2 хвилини залишають спокої, потім знову похитують і одночасно спостерігають результат.Наблюденіе проводять протягом 5 хвилин. Через 3-5 хвилин в каждуюкаплю, в якій настала аглютинація, додають 1 краплю (0,1 мл) ізотонічного розчину NaCl і знову похитують пластінку.Результат враховують за наявністю або відсутністю аглютинації вкаждом краплі. При цьому можливі чотири варіанти: - аглютинація наступила з еритроцитами груп А (II) і В (III), але відсутній з еритроцитами групи 0 (I). Це вказує наналічіе в випробуваної сироватці двох аглютинінів альфа (анти-А) ібета (анти-В), тобто на приналежність досліджуваної сироватки кгруппе Про альфа бета (I) - аглютинація наступила з еритроцитами групи В (III) і відсутність з еритроцитами груп О (I) і А (II). Це вказує наналічіе в випробуваної сироватці тільки агглютинина бета (анти-В), тобто. на приналежність досліджуваної сироватки до групи А бета (II) - аглютинація наступила з еритроцитами групи А (II) і відсутність з еритроцитами груп О (I) і В (III). Це вказує наналічіе в випробуваної сироватці тільки агглютинина альфа (анти-А), тобто. на приналежність досліджуваної сироватки до групи В альфа (III) - аглютинація відсутня з еритроцитами всіх трьох груп. Етоуказивает на відсутність групових агглютінінов, т.е.напрінадлежность випробуваної сироватки до групи АВ (IV) .2. Визначення здатності сироватки викликати неспеціфіческуюагглютінацію.Еті дослідження можна проводити одночасно з определеніемгрупповой приналежності за допомогою стандартних ерітроцітов.Дополнітельно в дослідження включають 6-8 зразків ерітроцітовгруппи О (I) і одногруппной з досліджуваної сивороткой.Наблюденіе результатів з еритроцитами однойменної групи ігруппи О (I) проводять до 20 мінут.Еслі випробувана сироватка викликає аглютинацію ерітроцітоводноіменной групи і групи О (I), це означає, що вона обладаетсвойством викликати неспецифічну аглютинацію. У цих случаяхучітивают швидкість її настання і інтенсівность.3. Визначення гемолізуючих властивостей сивороткі.Гемолізірующіе властивості сироватки виявляються одночасно зпевним груповий приналежності за допомогою стандартнихерітроцітов. Якщо при змішуванні з еритроцитами сироватка визиваетіх гемоліз, значить сироватка має гемолізує свойствамі.4. Визначення швидкості настання агглютінаціі.Скорость настання аглютинації визначають так само, какгрупповую приналежність - за допомогою стандартних еритроцитів, ніс додатковим включенням в реакцію стандартних ерітроцітовгруппи А2. Швидкість настання аглютинації враховують з помощьюсекундомера від моменту перемішування сироватки з еритроцитами домомента настання перших ознак аглютинації окремо поотношению до еритроцитів груп А1, А2 і В.5. Визначення титру агглютінінов.Для визначення титру аглютинінів в досліджуваній сивороткепріготавлівают розведення її у фізіологічному розчині NaCl. Дляетого в штатив ставлять 10 пробірок і в кожну з них вносятградуірованной піпеткою по 1 мл ізотонічного розчин NaCl. Затемв першу пробірку тієї ж піпеткою додають 1 мл іспитуемойсивороткі і перемішують її з фізіологічним розчином путемвстряхіванія пробірки. З цієї пробірки 1 мл суміші переносять по-друге і знову перемішують і так до останньої пробірки. Урезультаті в пробірках утворюються розведення сироватки від 1: 2 до1: 1024.Непосредственно на платівці можна приготувати разведеніясивороткі в арифметичній прогресії. Для цього слід зробити впробірке перший вихідне розведення (будь-яке) .Наприклад, до однієї краплі сироватки додати 15 капельізотоніческого розчину хлориду натрію, отримавши таким образомразведеніе 1:16. Цю розведену сироватку нанести в 6пронумерованних точок на пластику: в першу точку 2 краплі, по-друге, третю і всі наступні - по 1 краплі. Потім добавітьізотоніческій розчин: в другу точку 1 краплю, в третю - 2каплі, в четверту - 3 краплі, в п`яту - 4 краплі, в шосту - 5капель. Краплі перемішують скляною паличкою, починаючи споследней точки в напрямку до першої. Так отримують разведеніясивороткі на платівці: 1:16, 1:32, 1:48, 1:64, 1:80, 1: 96.Прі визначенні титру агглютинина альфа2 по відношенню керітроцітамА2 готують додатково промежуточноеразведеніе сироватки 1: 24.Разведенія сироватки можна приготувати , отмеряя сироватку іізотоніческій розчин NaCl краплями, для чого використовують одну й ту ж саму піпетку.На пробірках відзначають ступінь розведення сироватки. Далі 0,1 мл (одну велику краплю) кожного розведення сироватки переносять напластінку, попередньо надписавши на ній позначення степеніразведенія сироватки 1: 2, 1: 4 і т.д. до 1: 1024.Разведенія сироватки можна готувати такженепосредственно на платівці. Для цього в десять пронумерованнихточек наносять по одній великій краплі (0,1 мл) ізотоніческогораствора NaCl, в першу точку додають одну краплю (0,1 мл) досліджуваної сироватки, перемішують краплі, потім тією ж піпеткойпереносят одну краплю суміші в другу точку і т. д. до десятої, отримуючи таким чином розведення сироватки від 1: 2 до 1: 1024.На пластинку поруч з кожною краплею розведеної сивороткінаносят маленьку краплю (0,01 мл) стандартних ерітроцітовсоответствующей групи, тобто еритроцити А, і А2, коли тітруютагглютініни альфа і еритроцити групи В, коли титрують агглютінінибета. Співвідношення еритроцитів і сироватки повинно бути 1: 10.Каждую краплю стандартних еритроцитів ретельно перемішують ссивороткой сухий скляній паличкою, після чого пластінкупокачівают, потім залишають на 1-1,5 хвилини в спокої, сновапокачівают і одночасно спостерігають результат протягом 5 мінут.Наібольшее разведеніесивороткі, в якому наступілаагглютінація стандартних еритроцитів до закінчення 5 хвилин, приймають за титр аглютинінів в цій сиворотке.V. ПОПЕРЕДНЄ ВИСНОВОК ПРО ПРИДАТНІСТЬ КРОВІДЛЯ ВИГОТОВЛЕННЯ З НЕЇ СТАНДАРТНОЇ СИВОРОТКІОсновним показником придатності крові донора для ізготовленіяіз неї стандартної сироватки є її активність, тобто скоростьнаступленія аглютинації і титр агглютінінов.Скорость настання аглютинації повинна бути не більше ніж 30секунд з еритроцитами груп А1 і В і не більше 1 хвилини серітроцітамі групи А2.Тітр сироватки повинен бути: для агглютинина альфа не нижче, чем1: 32 по відношенню до еритроцитів А1, не нижче, ніж 1:16 по відношеннюдо еритроцитів А2 і для агглютинина бета не нижче, ніж 1:32 керітроцітам В.Прі предварітельномісследованіі безпосередньо взятойпробной порції крові титр аглютинінів повинен бути, хоча б наодном розведення вище, з огляду на можливу його падіння в процессеобработкі і консервування основної порції крові.Одновременно слід враховувати, чи не викликає сироватка кровінеспеціфіческой аглютинації або гемолізу ерітроцітов.Еслі сироватка викликає слабку неспецифічну агглютінаціюерітроцітов, пізніше, ніж через 2 хвилини, то це не являетсяпротівопоказаніем до використання цієї крові, так як ці свойствапрі подальшій обробці сироватки зазвичай зникають .Якщо сироватка викликає неспецифічну аглютинацію раніше 2мінути, то брати у донора кров для приготування стандартнойсивороткі НЕ следует.Гемолізірующіх властивостей крові у донорів зазвичай на спостерігається, але якщо це має місце, то брати кров у донори не следует.В цьому випадку так само, як і при вираженій неспеціфіческойреакціі, донора слід піддати додатковому медіцінскомуобследованію.Доноров, кров яких відповідає вимогам, що пред`являються до стандартних сироваток, слід брати на особийучет з метою подальшого використання їх крові для ізготовленіястандартних сивороток.VI. Взяття КРОВІ У ДОНОРА І ВІДДІЛЕННЯ ВІД НЕЇ СИВОРОТКІКровь у донора беруть з вени в сухий стерильний посуд. Через15-30 хвилин посудину з кров`ю струшують для відділення згортка отстенкі і потім поміщають на добу в холодильник при 4-8ш С.Отделівшуюся за цей час сироватку відсмоктують або зливають в іншій посудину, а посудину із згортком залишають ще на одну добу прі4-8ш С. зазвичай через одну добу з згортка відділяється ещенекоторое кількість сироватки, яку приєднують в первойпорціі. Сироватку консервують борною кислотою з розрахунку 2-3 г на 100 мл сироватки, або азидом натрію з розрахунку 1 г на 1 млсивороткі.Для прискорення згортання крові посудину можна поставити сначалана одну годину в термостат, а потім в холодільнік.Паспортізація. На посудині з кров`ю, а потім з сивороткойнадпісивают паспортні дані, тобто прізвище, ім`я та отчестводонора, групову приналежність, дату взяття крові, колічествокрові і отриманої з неї сироватки, а також результатісследованія пробної порції крові. Ці ж відомості записують в"Журнал реєстрації матеріалу, що надходить для ізготовленіястандартной сироватки" (Подальша обробка см. Пункт IX) .Полученіе сироватки з крові, що залишилася у флакончиках (пробірках) - супутниках після взяття її у доноров.Для виготовлення сироватки може бути використана кров ізфлакончіков (пробірок) - супутників. Для цього залишки кровіслівают (кожну групу окремо) в сухі флакони. На флаконенадпісивают групу крові і дату заготовкі.VII. ОТРИМАННЯ СИРОВАТКИ З ПЛАЗМИПрі отриманні сироватки з плазми з останньої удаляетсяфібрін. Це можна здійснити декількома способамі.1. До плазмі додають розчин хлориду кальцію з розрахунку 3 мл20% або 6 мл 10% на 100 мл плазми. Через 30-40 хвилин під флаконеобразуется згорток. Якщо згорток пристав до стінки, то флаконследует струсити, щоб згорток відокремився. Флакон з содержімимоставляют на дві доби в холодильнику, після чого отделівшуюсясиворотку переливають через лійку з марлею в інший флакон.Сиворотку консервують і на флакон переносять паспортні данние.Іногда у флаконі з сироваткою через деякий час сновавипадает згорток фібріна- в цих випадках сироватку ще разперелівают через воронку з марлею (з тканиною) в інший флакон.2. До плазмі додають рівний об`єм одногруппной сироватки стітром антитіл не нижче 1:32. Вміст флакона перемішують, залишають на одну добу при кімнатній температурі і потім помещаютв холодильник на 10-14 днів. На паспорті флакона допісиваютсведенія про дату і кількість доданої сивороткі.За 10-14 днів утворюється щільний згорток фібрину і, крометого, можетісчезнутьсвойствовизиватьгемолізілінеспеціфіческую агглютинацию ерітроцітов.Отделівшуюся сироватку зливають в інший флакон через воронку сткана, сироватку консервують, на флакон наносять паспортниеданние.Паспортізація. Паспортні записи про плазму переносять з флаконана флакон у міру відділення сироватки. До них додають запис Одате отримання сироватки. Ті ж відомості записують в "Журналрегістраціі матеріалу, що надходить для виготовлення стандартнойсивороткі системи АВО".Дальнейшая Обробка сироватки (див. Пункт IX) .VIII. ОТРИМАННЯ СИРОВАТКИ з плевральної ТРАНССУДАТАІ асцитичної рідини тих випадках, коли в процесі лікування хворому делаетсяпункція грудної або черевної порожнини з метою видалення рідини, останню можна використовувати для виготовлення стандартнойсивороткі. Для цього рідину збирають в чистий посуд. Подоставленіі в лабораторію рідина переливають у флакон черезворонку з марлею або тканиною для відділення згортка (якщо онімеется) і консервують борною кислотою або азидом натрію, какуказано више.Паспортізація. На флаконі підписують відомості про те, з чегосиворотка приготовлена, і дату. Ті ж відомості записують в"Журнал реєстрації матеріалу, що надійшов для ізготовленіястандартной сироватки системи АВО".IX. ПОДАЛЬША ОБРОБКА І ПОПЕРЕДНЄ ЗАКЛЮЧЕНІЕО ПРИДАТНОСТІ СИРОВАТКИ, ОТРИМАНОЇ З ЛЮБИХІСТОЧНІКОВ1. Серологічні ісследованія.В сироватці визначають: а) групову приналежність (групові аглютиніни) -б) гемолізуючих властивості-
Поділитися в соц мережах: