Проліферація мононуклеарних лейкоцитів. Вплив імуномодуляторів на лейкоцити

У наступній серії експериментів порівнювався вплив імуномодуляторів на спонтанну та стимульовану ФГА, проліферативну активність МЛПК здорових донорів.
Дані демонструють стимулюючий ефект імуномодуляторів на проліферативний потенціал МЛПК. При використанні АСО відсоток владних форм наростає від 18,4 до 42,0 і максимальний індекс стимуляції при цьому становить 10,0. Стимулювання ФГА зумовило збільшення цих показників (34,8 і 61,3), відповідно. Індекс стимуляції склав при більшій дозі 14,6. У всіх випадках показники без ФГА і з ФГА істотно відрізняються.

Ця ж закономірність простежується при введенні в середу Іммуновак-ВП-4 і ГМДП. Виявлено чітке зростання індексу стимуляції при збільшенні концентрації ІММП і додаванні ФГА. Порівняння середніх концентрацій імуномодуляторів показує, що власний вплив Іммуновак-ВП-4 (1 мкг / мл) на проліферативну активність вище впливу АСО (0,15 ЄС / мл) в 1,9 рази, а ГМДП (1 мкг / мл) в 1 ,4 рази.

Результати цього дослідження були підтверджені в наступному експерименті при використанні іншого методичного підходу - тесту відновлення вітального барвника Alamar Blue (Biosours, USA). Проведені експерименти показали, що, як і в попередньому випадку, активність ВП-4 і ГМДП була вище в порівнянні з АСО і контрольними групами.

Цитотоксичний ефект NK відтворюється in vitro, і це властивість лімфоцитів використовують для оцінки їх киллерной активності. На відміну від цитотоксичних специфічних лімфоцитів природні кілери розпізнають свої мішені без участі головного комплексу гістосумісності I і II класів.

Одним з методів оцінки протипухлинної активності імуномодулюючих препаратів є визначення спонтанної і стимульованої митогенами цитотоксичности мононуклеарних лейкоцитів периферичної крові (МЛПК) in vitro. З цією метою застосовують мітогени рослинного (пектини) і бактеріального походження (ЛПС), що є найбільш сильними неспецифічними активаторами клітин імунної системи.

їх використання як референс-препаратів дає можливість оцінити ступінь впливу різних ІММП на активність МЛПК по здатності руйнувати пухлинні клітини-мішені in vitro.

В теперішньому дослідженні стимулюючий ефект бактеріальної вакцини ВП-4 на цитотоксичну активність МЛПК порівнювали з дією неспецифічних поліклональних активаторів: Т-клітинного митогена - ФГА і В-клітинних митогенов - ЛПС К. pneumoniae і E. coli. У попередніх дослідженнях було встановлено відсутність прямого цитотоксичної дії препаратів на пухлинні клітини в діапазоні впливають концентрацій від 0,1 до 10,0 мкг / мл.

Для вивчення модулюючим активності митогенов і вакцини на цитотоксичний ефект МЛПК по відношенню до клітин раку товстої кишки людини Colo використовували різні співвідношення МЛПК і пухлинних клітин, а також доз препаратів. Зменшення співвідношення пухлинні клітини / МЛПКс 1: 5 до 1: 2,5 і 1: 1 призводило до зниження спонтанної цитотоксичності щодо пухлинних клітин (з 38,0 ± 1,0% до 32,6 ± 0,9% і 20, 9 ± 0,3% відповідно).

значення цитотоксичної активності мононуклеаров в присутності ФГА, ЛПС і ВП-4 в середовищі культивування досягали максимальних значень при співвідношенні клітин 1: 5 і концентрації препаратів 10 мкг / мл.