Вплив імуномодуляторів на дендритні клітини. Морфологія дендритних клітин

Фазово-контрастна мікроскопія дендритних клітин, отриманих в лабораторіях клітинного імунітету РОНЦ ім. М.М. Блохіна і терапевтичних вакцин НДІ ім. ІІ. Мечникова РАМН з клітин кісткового мозку і клітин ембріональної печінки мишей, виявляла зірчасті клітинні форми з характерними цитоплазматическими відростками, що відповідає опису ДК іншими дослідниками.

морфологічну характеристику дендритних клітин вивчали спільно з д-ром. мед. наук О.В. Лебединської. Клітини, які прилипли до пластику культурального флакона, мали вуалевіднимі характер з численними довгими тонкими відростками на поверхні.

клітини при культивуванні протягом семи діб без внесення до культурального середовища індукторів дозрівання характеризувалися ніжною цитоплазмой вуалевіднимі характеру, при активації ДК імуномодуляторами мікробного походження (ІММП), а також TNF-a, набували численні відростки, характерні для зрілих клітин. При цьому цитоплазма ставала більш щільною.

Електронномікроськопічеськие дослідження показали, що у суспензії дендритних клітин, генерованих як з клітин кісткового мозку, так і з клітин ембріональної печінки мишей, виявляються типові електронно-мікроскопічні ознаки зрілих дендритних клітин - наявність численних довгих (понад 10 мкм) цитоплазматических відростків ниткоподібної і вуалевіднимі форми або у вигляді цибулинних псевдоподий, якими вони контактують з клітинами мікрооточення.
Клітини мають великі розміри, округлу форму, ексцентрично розташоване дольчатое ядро, частіше неправильної форми з хроматином, розташованим по периферії.

Цитоплазма містить численні вакуолі різної величини, всередині яких виявляються різноманітні включення. Усередині клітин визначаються розвинені синтетичні органели: велика кількість ендосом, лізосом, добре розвинений апарат Гольджі, мітохондрії і численні елементи гладкою і шорсткою ендоплазматічес-кою мережі.

Цитоплазма дендритних клітин містить численні вакуолі різної величини, всередині яких виявляється різноманітне вміст. Клітини мають розвинені синтетичні органели: мітохондрії, гранулярную ендоплазматичну мережу, рибосоми, полірібосоми і апарат Гольджі. За Романовським-Гімзою цитоплазма зрілих ДК забарвлюється базофильно, при фарбуванні за Браше в ній визначається яскравий піронінофільних компонент, який свідчить про наявність в клітинах великої кількості РНК.

Обробка Шифф-реактивом виявляє в цитоплазмі ШИК-позитивні гранули, інтенсивність забарвлення яких злегка зменшується після впливу амилазой, що говорить про наявність в клітинах як глікогену, так і глікозаміногліканів.

після додавання в культуру дендритних клітин мишей TNF-a, кілька змінювалися гистохимические характеристики дендритних клітин. Цитоплазма набувала більш яскраву піронінофільних забарвлення, яка відображатиме підвищений вміст в ній РНК, зростала також зміст глікогену і глікозаміногліканів (ШИК-позитивні гранули при фарбуванні по Шабадашу мали більші розміри і збільшувалися в кількості). Піронінофільних ядерця в ядрах ставали більшими і численними. В мазках з`являлися клітини з морфологічними і гистохимическими характеристиками ДК в стані мітотичного і амітотіческого ділення і численні владні форми. Аналогічні морфологічні та гістохімічні особливості характеризували ДК після активації культур імуномодуляторами мікробного походження.

Таким чином, застосування імуномодуляторів мікробного походження (Іммуновак-ВП-4, ГМДП) і TNF-a дозволяє отримати зрілі ДК, характерізущіеся типовою морфологією: великі округлі клітини, з ексцентрично розташованим ядром, і наявністю специфічних виростів на поверхні клітини.