Иммуностимулирующая здатність дендритних клітин. Активація вродженого імунітету

підвищений увагу генної інженерії останнім часом звернено на збільшення імуностимулюючої здатності ДК. Через вірусні або невірусні вектори в ДК вбудовують такі трансгени, як імуностимулюючі цитокіни (наприклад, IL-12, GM-CSF), костіму-лирующие молекули і антигени. Існують наступні методи перенесення генетичного матеріалу в ДК: катионная ліпідопосре-довай трансфекція, електропорація, балістична трансфекція і трансдукція вірусних векторів. Стимулююча здатність модифікованих ДК залежить від трансфекціонних систем і від походження ДК, а також від стадії розвитку ДК. Перевага генної трансфекції - в ендогенної презентації на молекулах МНС I ендогенно експрессіруемого білка.

вивчення ефективності шляхів введення ДК виявило, що при внутрішньовенному введенні накопичення ДК відзначається в печінці, селезінці і кістковому мозку і відсутній в регіонарних лімфатичних вузлах При внутрішньошкірне введення в лімфатичних вузлах визначається невелика фракція ДК, а при підшкірному шляху введення ДК там не виявляються. Тому дослідники часто комбінують шляху введення для досягнення максимального ефекту, а також збільшують кількість введень для посилення антігенспеціфіческую відповіді.

наведені матеріали свідчать про те, що, незважаючи на ключову роль ДК в реалізації ефекторних функцій вродженого імунітету, а також максимальної (у порівнянні з іншими АПК) здатності представляти антиген і інструктувати спрямованість адаптивного імунітету, використання ДК в клініці для модуляції імунної статусу знаходиться на стадії накопичення знань .

У сучасній літературі активно обговорюється можливість створення неспецифічної імунологічної захисту проти невідомого патогена шляхом активації системи вродженого імунітету. Виходячи з цих передумов, такі PAMPs можна розглядати як потенційно перспективні компоненти різного роду імунопрепаратів для стимуляції неспецифічного захисту від патогенів та цілеспрямованого програмування адаптивного імунітету.

була досліджена здатність полікомопонентной бактеріальної вакцини Іммуновак-ВП-4 активувати вроджений імунітет і надавати протективний дію при інфекційному процесі. Вибір вакцини був обумовлений такими міркуваннями: вакцина складається з комбінації антигенних комплексів 4 умовно патогенних мікроорганізмів і містить великий набір PAMPs (ліпополісахарид, пептидогликан, тейхоевие кислоти і т.д.) - Крім того, раніше в дослідах на тваринах і при випробуванні на людях виявили виражену імуномодулюючу дію препарату.

протективногороль активність полікомопнентной бактеріальної вакцини «Іммуновак-ВП-4» вивчали на модельній інфекції мишей при зараженні летальною дозою (106 мікробних клітин) штаму Salmonella typhimurium 415. За 24 години до зараження мишей вакцинували одноразово внутрішньоочеревинно дозою 400 мкг вакцини. Для контролю заражающей дози використовували інтактних тварин, яких заражали трьома 10-кратно убутними дозами культури (10-105-10 мікробних клітин) і визначали величину LD50. На дозу брали по 6 мишей.

В сироватці крові мишей визначали спектр експрессіруемих цитокінів Зразки сироваток досліджували в різні інтервали часу, як після вакцинації, так і після зараження S. typhimurium вакцинованих мишей. Контролем служили показники у інтактних тварин.

У цьому досвіді була вивчена експресія цитокінів у вакцинованих мишей до зараження і в динаміці 120 годин після зараження. Для судження ступеня збільшення рівня цитокінів в досліджених групах мишей ми представили їх в абсолютних величинах і у відносних по кратності, і відсотку підвищення в порівнянні з інтактними.

Як і в попередніх дослідженнях вакцинація викликала активну експресію IL-10, IL-6, TNF-a вже через 1 годину після введення Іммуновак-ВП-4, через 4 години виявлено значне збільшення IL-12 і IFN-y, що грають центральну роль у формуванні і регуляції ефекторних механізмів природженого і адаптивного імунітету. До 24 годинах рівні цитокінів знижуються, але і в цей термін вони значно перевищують показники контролю.

Інша динаміка відбувалася після зараження вакцинованих мишей. У перші 48 годин після зараження кількість цитокінів в сироватці було без динаміки і залишалося на рівні, зазначеному через 24 години після вакцинації. Значне збільшення спектру і кількості цитокінів відзначали у віддалені терміни спостереження 48-96 годин, причому найбільш високі значення були у IFN-y і IL-10, тоді як кількість IL-12 не мало суттєвої динаміки в усі терміни спостереження.

На цьому тлі вакциновані Іммуновак-ВП-4 миші в 100% залишалися живими протягом 4 діб після зараження. У контрольній групі інтактних мишей загибель тварин реєстрували через 24 години після зараження. До 5-ї доби 100% контрольних тварин загинули.